张勋
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：江苏大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金中国博士后科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生更多>>
- 去氢甲睾酮ELISA试剂盒的研制
- 2012年
- 以实验室自主研发的一株能稳定分泌去氢甲睾酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株为基础,应用ELISA原理研制去氢甲睾酮残留快速检测试剂盒,并对试剂盒特性进行测定。结果表明,该试剂盒标准曲线的回归方程为y=-0.205 5x+0.516(R2=0.993 1),线性检测范围为0.1ng/mL～100ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为3.20ng/mL,对猪肉加标样品的检测回收率在87.41%±5.44%～110.70%±2.05%之间,试剂盒检测与去氢甲睾酮结构类似物丙酸睾酮酯、群勃龙的交叉反应率均小于1%;试剂盒在4℃能稳定保存6个月。说明试剂盒能够应用于食品中残留去氢甲睾酮的快速检测。
- 姚萍董英王云张勋
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附试验试剂盒
- 去氢甲睾酮多克隆抗体免疫亲和柱的制备研究被引量：5
- 2011年
- 将去氢甲睾酮多克隆抗体同CNBr-Sepharose4B进行偶联,制成了对去氢甲睾酮具有特异性吸附的免疫亲和柱(IAC),优化了免疫亲和柱的制备和使用条件;同时用间接竞争ELISA(icELISA)和高效液相色谱法(HPLC)对该免疫亲和柱的性能进行评价。结果表明:CNBr-Sepharose4B偶联抗体的最佳反应时间为2.5h,抗体最佳初始质量浓度为0.5mg/mL;IAC的柱容量约为1700ng DMT/g干胶;最适洗脱条件为80%的甲醇-水溶液,平均加标回收率为97.87%。该亲和柱重复使用3次,回收率仍不低于90%。
- 徐燕王云张勋伍娟董英
- 关键词：免疫亲和柱间接竞争ELISAHPLC
- 去氢甲睾酮抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的：制备兔抗去氢甲睾酮（DMT）抗体，为采用免疫法分析食品中该激素的残留提供基础。方法：采用碳二亚胺法将肟化后的DMT分别偶联到钥孔血蓝蛋白、鸡卵清蛋白和牛血清白蛋白蛋白载体上，制备完全抗原，并利用薄层层析法、红外和紫外光谱法对其进行确证后，免疫新西兰大白兔；通过间接ELISA法测定和比较2种兔抗血清的效价、IC50及交叉反应率。结果：成功制备了DMT的完全抗原，其抗体效价分别为1：64000（KLH—DMT）和1：256000（OVA—DMT），IC50值分别为0．24ug／L和5.29ug／L；抗血清与丙酸睾酮酯、群勃龙的IC50值均大于781．25ug／L。结论：制备的DMT完全抗原具有较高的免疫原性，抗体与类似物丙酸睾酮酯、群勃龙无明显的交叉反应，可用于ELISA实验。
- 张勋董英王云朱帜
- 关键词：ELISA多克隆抗体免疫原性
- 去氢甲睾酮单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:制备去氢甲睾酮(DMT)的单克隆抗体(mAb),为采用免疫法分析食品中该激素的残留提供基础。方法:通过采用碳二亚胺法合成的完全抗原DMT-KLH免疫BALB/c小鼠,经过效价测定,ELISA方法建立,细胞融合、筛选和亚克隆,建立了去氢甲睾酮mAb杂交瘤细胞株,并采用ELISA方法测定mAb纯化后的效价、IC50、交叉反应率和抗体亲和力等参数,以及对猪肉样品中的DMT加标含量进行测定。结果:经过3次亚克隆成功建立1株分泌去氢甲睾酮mAb的杂交瘤细胞株,纯化后抗体的蛋白浓度为0.87mg/mL,效价为1∶32000,IC50值为7.57μg/L,亲和常数为3.09×109L/mol与丙酸睾酮酯、群勃龙的交叉反应率均小于1%,猪肉样品中平均加标回收率为97.73%。结论:成功筛选到分泌DMT mAb的杂交瘤细胞株,并对其产生的mAb的效价、IC50值、特异性、稳定性、IgG亚类和亲和力等特性进行了鉴定,为下一步开展DMT免疫学检测方法研究奠定了基础。
- 张勋董英王云徐燕
- 关键词：单克隆抗体
- 己烯雌酚完全抗原及其单抗的制备与分析被引量：3
- 2009年
- 为建立己烯雌酚免疫学检测技术,试验采用混合酸酐法制备完全抗原DES-HS-BSA,并对制备产物进行紫外光谱、红外光谱、SDS-PAGE、MS分析鉴定,以DES-HS-BSA免疫Balb/c小鼠,用ELISA试验测定抗体。结果表明:半抗原衍生物DES-HS已被成功地偶联到牛血清白蛋白上,计算得每分子牛血清白蛋白上结合26个DES-HS;ELISA试验结果证实免疫小鼠血清中含有抗己烯雌酚的抗体,将免疫好的小鼠脾脏细胞和SP2/0细胞融合,筛选出了1株能稳定分泌己烯雌酚单抗的杂交瘤细胞株18G5,抗体亚型为IgG3。
- 伦丽丽董英王云朱帜张勋
- 关键词：己烯雌酚单克隆抗体
