李纲
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局科研基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丝素蛋白和乳酸-己内酯共聚物纳米纤维支架构建组织工程化角膜上皮的实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的评估兔角膜缘上皮细胞在丝素蛋白(SF)和乳酸-己内酯共聚物(PLCL)复合纳米纤维薄膜上的黏附、增殖和分化情况,探讨SF-PLCL复合纳米纤维薄膜作为组织工程角膜上皮支架材料的可行性。方法利用六氟异丙醇(HFIP)作为溶剂,配制浓度为8%的SF和PLCL共混物(质量比25∶75)的纺丝溶液。通过静电纺丝技术制备纳米纤维膜。将体外培养的第一代兔角膜缘上皮细胞种植于SF-PLCL纳米纤维薄膜上进行复合培养。利用扫描电镜观察SF-PLCL纳米纤维薄膜的表面形态及细胞材料复合物的表面形貌;利用免疫荧光染色分析角膜上皮细胞标记物K3的表达情况;通过细胞活力检测观察细胞在材料上的生长分布规律。结果 SF-PLCL纳米纤维薄膜的平均纤维直径为(715±186)nm,材料具有较好的透明度。扫描电镜显示角膜缘上皮细胞在材料上保持正常上皮细胞的铺路石样形态,黏附生长良好,细胞表面布满微绒毛,细胞间紧密联接;免疫荧光染色表明角膜缘上皮细胞在材料上可分化为成熟的角膜上皮细胞。细胞活力检测证实角膜缘上皮细胞在材料上生长良好,均匀分布,形成多层层化结构。结论角膜上皮细胞与SF-PLCL纳米纤维膜的生物相容性良好,SF-PLCL纳米纤维膜是一种潜在、合适的组织工程角膜上皮支架材料。
- 李纲钱婷婷洪佳旭徐建江吴继红崔呈俊莫秀梅
- 关键词：丝素蛋白静电纺丝角膜上皮
- 缺氧诱导因子-1α在视网膜母细胞瘤中表达的区域性分布及其与血管内皮生长因子、Bax、Ki-67的关系被引量：2
- 2011年
- 目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在视网膜母细胞瘤（RB）中表达分布的区域性及其与血管内皮生长因子（VEGF）、Ki67、Bax的关系。方法病理检查确诊的39例RB患儿的石蜡标本纳人研究。采用免疫组织化学EnVision法检测HIF-1α、VEGF、Bax和Ki-67在RB中的表达。按照肿瘤区域分为表面区、中央区、基底部、脉络膜区及子瘤5个区域，分析上述检测指标在肿瘤的表达、分布差异及相关性。结果39例RB标本中，HIF-1α表达阴性者10例，占25．6％；阳性者29例，占74．4％。其中，1＋者17例，占43．6％；2＋者12例，占30．8％。表面区、中央区、基底部、脉络膜区及子瘤区染色阳性者分别占71．1％、36．8％、84．2％、54．5％、82．1％。不同区域间阳性表达率分布比较，差异有统计学意义（x2=24．55，P〈O．001）。VEGF、Bax和Ki67表达阳性率分别为53．8％、66．7％、59．0％。其中，VEGF和Bax在不同区域的阳性表达率差异均有统计学意义（x2=26．77，22．79；P％0．001）；Ki-67在不同区域阳性表达率差异无统计学意义（x2=0．47，P=0．976）。HIF-1α与VEGF和Bax的表达呈正相关（rs=0．48，0．39；P=0．002，0．021），而与Ki-67的表达无明显相关（rs=0．09，P=0．606）。在不同区域，VEGF和Bax的表达均与HIF-1α有较好的一致性，即在肿瘤的表面区、基底部及子瘤区阳性率较高，在肿瘤的中央区和脉络膜区阳性率较低，而Ki-67与HIF-1α表达阳性率在不同区域无明显一致性。结论缺氧现象多分布在RB瘤体的边缘地带，且HIF-1α的表达在区域上与VEGF和Bax的表达成正相关关系。
- 岳晗钱江吴继红李纲毕颖文李霞萍
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基血管内皮生长因子类
- 不同年龄人角膜缘基底细胞增殖力和超微结构观察被引量：3
- 2009年
- 目的评价不同年龄段人角膜缘基底细胞增殖力和超微结构的差异。方法采用病例对照研究方法。2007至2008年于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼库取材新鲜角膜缘组织40例样本，按供体年龄编入4组，每组10例。A组供体年龄为0～19岁，B组为20～39岁，C组为40-59岁，D组为60～79岁。各年龄段组的10例角膜缘组织行细胞核增殖抗原（PCNA）免疫组织化学染色，观察角膜缘上皮染色情况并对基底细胞染色阳性率进行分级。同时对各年龄段组角膜缘组织行透射电子显微镜观察，比较各年龄段组角膜缘基底上皮细胞超微结构特点。结果A组样本中，角膜缘基底上皮细胞核PCNA染色呈强阳性（＋＋＋＋）占5例（50％），其余3个年龄段组强阳性染色明显减少，而以弱阳性（＋）染色为主，分别为4例（40％）、6例（60％）、5例（50％）。此外，仅A组中可见3例样本浅表上皮细胞核染色和1例样本细胞质染色。在透射电镜下观察，A组的干细胞样细胞具有3个特点，即胞体极小、细胞平行于基底膜方向伸展、细胞核内致密团块状异染色质多。其余3个年龄段组中，干细胞样细胞与相邻基底细胞大小差异较小，细胞垂直于基底膜方向伸展，细胞核内以常染色质为主。结论不同年龄人角膜缘基底细胞增殖力大小存在差异，且细胞超微结构呈现不同特点。
- 郑天玉张忆徐建江李纲乐琦骅祝丽娜汤坚岑
- 关键词：角膜缘上皮细胞增殖细胞核抗原
- HIF-1α在视网膜母细胞瘤中表达的区域性分析及其与VEGF、Bax、Ki-67的关系
- 岳晗钱江李纲吴继红李霞萍
- 聚乳酸-聚羟基乙酸膜体外复合兔脂肪源性间充质细胞的生长规律
- 2009年
- 背景:虽然国外已有报道应用间充质干细胞复合聚乳酸-聚羟基乙酸应用于组织的构建,但研究重点在于这些复合物能否修复组织缺损,尚缺乏间充质细胞与材料相容性的研究。目的:观察兔脂肪源性间充质细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附及生长情况。设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-09/2009-03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和上海组织工程重点实验室完成。材料:6月龄雌性新西兰大白兔6只用于提取脂肪源性间充质细胞。聚乳酸及聚羟基乙酸购自美国Sigma公司。方法:兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第4代细胞用于实验。将聚乳酸与聚羟基乙酸按照7:3的比例合成聚乳酸-聚羟基乙酸膜,相对分子质量为104900。主要观察指标:用Dio染料标记第4代细胞后测定不同接种浓度细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附率;在细胞与材料共培养1周以后,分别利用荧光倒置显微镜、扫描电镜及双光子显微镜观察细胞在材料表面及内部的生长情况。结果:不同接种浓度细胞与材料的黏附率最高可达99%。细胞与材料共培养1周以后,荧光倒置显微镜检查发现材料中有表达绿色荧光的大量细胞,形态呈纤维样或卵圆状;扫描电镜表明细胞在材料表面呈复层生长且与材料黏附良好,细胞分泌基质较旺盛;双光子显微镜检查提示细胞在内部分布均匀且形态以纤维样为主。结论:脂肪源性间充质细胞可在聚乳酸-聚羟基乙酸膜材料表面及内部生长,两者生物相容性较好。
- 洪佳旭徐建江崔磊尹烁李纲
- 关键词：聚乳酸-聚羟基乙酸
- 贝伐单抗抑制角膜新生血管的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的评价贝伐单抗(avastin)局部应用对小鼠角膜新生血管(CNV)的抑制作用。方法通过碱烧伤建立CNV模型,将30只Balb/c小鼠随机分成5组,A组贝伐单抗1mg/mL每日点眼2次;B组贝伐单抗3mg/mL每日点眼2次;C组贝伐单抗5mg/mL每日点眼2次;D组0.1%地塞米松每日点眼2次;E组生理盐水每日点眼2次。分别于术后3、7、14d观察CNV情况并拍照。术后第14天,处死全部小鼠,行CNV内皮细胞荧光标记,计算CNV所占全角膜面积的比例。结果各组CNV面积为A组(37.11±3.17)%、B组(29.75±3.56)%、C组(18.76±2.55)%、D组(20.91±2.75)%,E组(41.65±2.11)%。各组小鼠CNV面积依次为C组
- 赵峰徐建江郑天玉王欣林志荣李纲王文韬
- 关键词：贝伐单抗角膜新生血管眼部碱烧伤
- 体外早期培养兔脂肪源性间充质细胞的增殖能力被引量：1
- 2008年
- 背景:最新研究表明人脂肪源性间充质细胞的表面标志分子及分化能力会随着培养时间的延长而有所改变。目的:观察体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞形态学特点及集落形成能力。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和中心实验室完成。材料:3月龄雌性新西兰大白兔9只,由上海市银根养兔室提供。方法:兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第2,3,4代细胞用于实验。主要观察指标:倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型,计数细胞集落形成率。结果:第2,3,4代兔脂肪源性间充质细胞均呈成纤维细胞样生长,体外生长迅速,CD29及PCNA均呈阳性表达,集落形成率分别为(8.0±0.6)%,(6.7±0.4)%,(4.6±0.5)%,经方差分析差异有显著性意义(F=12.18,P<0.05)。结论:体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞生长增殖旺盛,集落形成能力随着传代次数增加呈显著下降趋势。
- 洪佳旭徐建江李纲庄宏邱婷
- 关键词：脂肪间充质干细胞细胞培养增殖集落形成
