本文选用新西兰白兔(New Zealand White Rabbit,NZWR)、青紫兰兔(Chinchilla Rabbit,CR)、日本白兔(Japanese White Rabbit,JWR)3个品系的血样提取基因组DNA,并应用随机引物扩增多态性DNA技术(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)进行遗传分析和比较。结果表明,使用随机引物PCR扩增后,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测共发现78个条带,其中多态性片段25条,占32.1%,从7套共140个随机引物中筛选出10个多态性较高的引物,包括BH9、AD1、BH11、AN12、AN14、O19、AD3、AD19、O4和O14。其中BH9、AD1扩增效果最好,扩增产物有较大的共性和较好的多态性,可作为实验兔品系鉴定的分子依据。日本白兔和新西兰兔片段共享度最高为0.8268,青紫兰兔和日本白兔最低为0.6190,统计结果显示RAPD标记多态性丰富,3品系的种内相似度大于种间相似度。该技术可用于实验兔的遗传检测。
为建立兔的胚胎库,探索一种效果稳定可靠、方法简捷的冷冻方法,试验选择冷冻管法一步式玻璃化冷冻保存兔胚胎,比较了不同冲胚时间对兔胚胎冷冻保存效果的影响。配种后65h冲胚保存效果好于60h和55h,复苏胚胎囊胚孵化率依次为:63.1%、62.5%和60.7%,差异不显著。不同预处理对冷冻效果的试验中,胚胎在4℃预处理4min保存效果最好,囊胚孵化率为71.5%。在4℃下2min的保存效果(21.6%)低于同组的其它处理,差异显著(P<0.05)。室温1min的保存效果略高于前者(31.0%),但显著低于同组其它处理(P<0.01)。优化冷冻过程以后,比较两品系的冷冻效果,青紫兰兔(Chinchilla Rabbit,CR)有效供体的平均胚胎数高于新西兰兔(New Zealand White Rabbit,NZWR),42.4±8.8vs38.9±5.5枚/只,但差异不显著(P>0.05)。胚胎移植后,新西兰兔6只受体1只死亡,5只妊娠,产活子38只,青紫兰受体5只有4只妊娠,共产活子28只。胚胎活子效率28.8%和25.9%(NZWR和CR),差异不显著。显示冷冻管一步法玻璃化冷冻保存兔胚的方法可以保存兔胚并获得子兔。
