万骏
- 作品数：9 被引量：3H指数：1
- 供职机构：清华大学深圳研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达被引量：3
- 2008年
- 目的构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础。方法常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况。结果三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因。结论成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础。
- 杨峥嵘马原栋万骏郑义王海峰赵洁彭扬洋罗海波羊东晔黄来强
- 关键词：人乳头瘤病毒腺病毒
- 一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗
- 本发明公开了一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗。本发明疫苗的活性成分是修饰的树突状细胞；所述修饰的树突状细胞是将复制缺陷型重组腺病毒rAd-HPV16，18，58mE67和复制缺陷型重组腺病毒rAd-RNAi-SOCS1转...
- 郑义黄来强万骏张毅娟师超凡张宏玲
- 文献传递
- 人宫颈癌的一种治疗性疫苗
- 本发明公开了人宫颈癌的一种治疗性疫苗。该疫苗的活性成分是重组腺病毒；所述重组腺病毒按照如下方法制备：将包括HPV16mE67、HPV18mE67和HPV58mE67以及连接三者的短核苷酸片段的转录融合三基因片段插入Ade...
- 黄来强郑义杨峥嵘万骏马原栋
- 文献传递
- TGF-β受体结合蛋白-1的新用途
- 本发明公开了TGF-β受体结合蛋白-1的新用途。本发明所提供的TGF-β受体结合蛋白-1的新用途，包括A和B：A、调控TGF-β受体结合蛋白-1表达水平的物质在制备调控细胞粘附和/或迁移的试剂中的应用。B、调控TGF-β...
- 黄来强万骏张宏玲王婧葛远龙
- 文献传递
- 一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗
- 本发明公开了一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗。本发明疫苗的活性成分是修饰的树突状细胞；所述修饰的树突状细胞是将复制缺陷型重组腺病毒rAd－HPV16，18，58mE67和复制缺陷型重组腺病毒rAd－RNAi－SOCS1转...
- 郑义黄来强万骏张毅娟师超凡张宏玲
- 文献传递
- Ezrin多克隆抗体制作及应用
- 2013年
- 构建Ezrin原核重组表达载体pET-28a(+)-ezrin,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导获得Ezrin蛋白,将经镍柱亲和层析纯化后的蛋白分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠(KM),获得抗血清,采用ELISA和Western blotting,免疫荧光测定其效价和特异性。ELISA对抗血清进行效价测定表明抗血清可与抗原发生特异性免疫反应;通过Western blotting对抗血清进行鉴定表明抗血清可以识别几种细胞株内的特异性条带,其相对分子量为82 kD,与预测分子量相符;免疫荧光试验表明抗血清可以识别细胞内的Ezrin蛋白,且定位情况与文献报道相符。最后通过protein G对抗血清进行了纯化。结果表明用该方法制备的Ezrin多克隆抗体有较高的特异性和灵敏度。
- 张宏玲万骏严飞张新胜曹威陶伟黄来强
- 关键词：原核表达纯化EZRIN蛋白动物免疫抗血清抗体鉴定
- 人宫颈癌的一种治疗性疫苗
- 本发明公开了人宫颈癌的一种治疗性疫苗。该疫苗的活性成分是重组腺病毒；所述重组腺病毒按照如下方法制备：将包括HPV16mE67、HPV18mE67和HPV58mE67以及连接三者的短核苷酸片段的转录融合三基因片段插入Ade...
- 黄来强郑义杨峥嵘万骏马原栋
- 文献传递
- TRIP-1抗体的制作及应用
- 2013年
- 旨在制作TGF-β二型受体结合蛋白TRIP-1的抗体,以便推进对该蛋白在TGF-β信号通路以及癌症发生发展中的功能研究。首先克隆出人的TRIP-1基因,构建其原核重组表达载体pET-His-TRIP-1,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导获得TRIP-1蛋白,纯化后将其分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠(KM),免疫4次后取血清,并对抗血清进行效价和亲和力测定。通过Western blot和免疫荧光试验鉴定抗血清特异性。最后,利用proteinG初步纯化抗血清。结果表明,通过重组表达获得抗原蛋白,纯化后免疫新西兰大耳兔和昆明鼠可得到效价较高的抗TRIP-1的多克隆抗体,在稀释倍数较高的情况下仍可以用于Westernblot和免疫荧光试验,且有非常好的特异性。
- 张宏玲万骏董一辰曹威张新胜张锦勰黄来强
- 关键词：原核表达纯化动物免疫抗血清抗体鉴定
- TGF-β受体结合蛋白-1的用途
- 本发明公开了TGF-β受体结合蛋白-1的新用途。本发明所提供的TGF-β受体结合蛋白-1的新用途，包括A和B：A、调控TGF-β受体结合蛋白-1表达水平的物质在制备调控细胞粘附和/或迁移的试剂中的应用。B、调控TGF-β...
- 黄来强万骏张宏玲王婧葛远龙
- 文献传递
