王惠
- 作品数：20 被引量：48H指数：4
- 供职机构：蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目蚌埠市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三氧化二砷对黑素瘤B16细胞黏附和迁移的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:了解三氧化二砷(As2O3)对黑素瘤B16细胞迁移能力的影响,评价As2O3抗肿瘤侵袭和转移能力。方法:用Transwell侵袭转移模型评价As2O3抗黑素瘤B16细胞的侵袭和转移作用。MTT法检测B16细胞的黏附能力。流式细胞术检测B16细胞表面黏附分子CD44的表达情况。结果:As2O3可显著抑制B16细胞的迁移和黏附能力(P<0.05～P<0.01),降低细胞表面黏附分子CD44的表达(P<0.01)。结论:As2O3具有抗黑素瘤B16细胞侵袭和转移作用,降低细胞表面黏附分子CD44的表达可能是其机制之一。
- 杨同怀陈治文夏俊王惠
- 关键词：三氧化二砷黑素瘤B16细胞迁移CD44
- CXCR4抑制性多肽对乳腺癌细胞株转移作用的研究被引量：4
- 2008年
- 背景与目的:CXCR4_SDF_1α体系在乳腺癌靶向转移中具有重要作用,已证明多种CXCR4拮抗剂对乳腺癌转移有抑制作用。本研究拟探讨CXCR4抑制性多肽(N_terminal21_merpeptide,NT21MP)对乳腺癌细胞株MCF_7转移相关因素的影响。材料与方法:采用免疫组织化学和荧光抗体检测NT21MP对乳腺癌细胞株MCF_7和SK_BR3表面CXCR4表达的抑制作用;用粘附和趋化实验观察NT21MP对不同转移阶段MCF_7细胞的作用;并用软琼脂集落形成实验评价克隆形成率。结果:分别以0.1、0.5、1.0、4.0μg/mlNT21MP处理MCF_7细胞24h后,相对于空白对照,CXCR4表达明显下降(P<0.05)。5、50、100、500ng/mlNT21MP处理后,MCF_7细胞对纤维连接素(FN)和Matrigel的粘附能力均下降(P<0.05)。趋化抑制实验中,NT21MP降低穿膜细胞数并呈浓度依赖性(P<0.05)。NT21MP抑制MCF_7细胞集落的形成,抑制率在22.0%～51.8%之间,并呈浓度依赖性。结论:NT21MP可有效降低CXCR4的表达,从而降低MCF_7对FN和Matrigel的粘附,抑制其对趋化因子SDF_1α的靶向趋化作用,并抑制MCF_7在软琼脂中的克隆形成率。
- 杨清玲李成华丁勇兴陈昌杰章菊王惠
- 关键词：CXCR4N-TERMINALPEPTIDE乳腺肿瘤
- RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响被引量：7
- 2008年
- 目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。
- 杨清玲丁勇兴王惠李成华
- 关键词：SURVIVIN多西他赛RNA干扰
- 同型半胱氨酸对A7r5细胞增殖及MMP-9表达的影响
- 2010年
- 观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。0.25、0.50和1.00 mmol/LHcy分别作用A7r5细胞48 h,倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-9蛋白的表达。随着Hcy浓度的升高,细胞数目逐渐增多,体积增大,生长旺盛,呈增殖表现。不同浓度Hcy处理组MMP-9 mRNA及蛋白的表达均逐渐增加,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。同时显示正常对照组中MMP-9表达相对较少,为(3.60±1.42)%、(1.60±0.82)%。Hcy能促进A7r5细胞增殖,正常A7r5细胞中MMP-9表达较少;Hcy可诱导A7r5细胞MMP-9的表达,这一效应可能是Hcy致心血管疾病的分子机制之一。提示MMP-9可能成为干预心血管疾病的靶点。
- 禹莉章尧陈昌杰王惠凌云志
- 关键词：同型半胱氨酸MMP-9
- 葡萄籽提取物抑制乳腺癌细胞生长的实验研究
- 2009年
- 目的:探讨葡萄籽提取物(grape seed extact,GSE)抑制乳腺癌细胞生长的分子机制。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测GSE对乳腺癌细胞的抑制作用,并筛选合适的GSE实验浓度;流式细胞术检测GSE对乳腺癌细胞内活性氧(ROS)产生的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤细胞中肿瘤相关基因Bcl-2和Bax表达的水平。结果:GSE抑制乳腺癌细胞的生长,作用具有剂量依赖性(P<0.01),IC50为100μg/ml;GSE降低肿瘤细胞内ROS的产生;GSE能减少乳腺癌细胞中Bcl-2基因的表达,对Bax基因无影响,其Bcl-2/Bax值显著降低(P<0.01)。结论:GSE抑制乳腺癌细胞生长,可能是通过降低ROS的产生,减少相关基因Bcl-2的表达水平,进而降低Bcl-2/Bax值而实现的。
- 刘臣彪陈昌杰章尧章菊杨清玲王惠
- 关键词：细胞株葡萄籽提取物活性氧BCL-2BAX
- 石蜡包埋淋巴瘤组织线粒体DNA的提取及PCR扩增
- 2010年
- 目的:探讨从石蜡包埋组织标本获取线粒体DNA(mtDNA)并进行PCR扩增的有效方法。方法:选取27例石蜡包埋的淋巴瘤组织,分别使用二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20进行脱蜡,改进裂解缓冲液的成分及浓度,酚/氯仿抽提以获取mtDNA并进行电泳和PCR分析。结果:0.5%Tween-20法获取mtDNA纯度及浓度含量明显高于二甲苯/乙醇法(P<0.01);二甲苯/乙醇法和0.5%Tween-20法获取的mtDNA PCR扩增成功率分别为11.1%和40.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20两种方法都可以扩增出mtDNA的目的片段,但0.5%Tween-20法操作简便,PCR扩增成功率高,不用接触二甲苯等有毒化学试剂,是一种较为理想的mtDNA提纯方法。
- 马佳宋文庆杨清玲王惠
- 关键词：DNA复制线粒体DNA淋巴瘤石蜡包埋组织
- 淋巴瘤组织中线粒体DNA突变的研究被引量：4
- 2010年
- 目的通过检测恶性淋巴瘤组织中线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变,以探讨mtDNA突变在恶性淋巴瘤发生中的作用。方法提取38例恶性淋巴瘤组织及其对应患者外周血白细胞的DNA,经PCR扩增部分mtDNA片段,PCR产物直接测序法测定mtDNA序列。以外周血淋巴细胞测序结果作为对照,确定肿瘤组织mtDNA的突变。结果18例(47.4%)恶性淋巴瘤组织中发现25个突变,25个突变发生在15个核苷酸位点,其中21个突变位于mtDNA的D-Loop区,4个突变位于mtDNA的编码区,D-Loop发生变异的频率是编码区的4.26倍。13个(13/25,52%)突变位于mtDNA多态性位点。结论恶性淋巴瘤组织中存在mtDNA的突变,mtDNA突变可能与淋巴瘤的发生、进展有一定关系。
- 马佳陈治文梅传忠杨清玲王惠
- 关键词：线粒体DNA突变淋巴瘤
- 苯并[a]芘对宫颈癌HeLa细胞细胞色素P450 1A1的诱导作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨苯并[a]芘(BaP)对宫颈癌HeLa细胞增殖及细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的影响。方法不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、7.5和10.0μmol/L)的BaP处理宫颈癌HeLa细胞,MTT法检测BaP对HeLa细胞增殖的影响,W estern b lotting和RT-PCR分别检测CYP1A1的蛋白表达和mRNA表达,荧光素标记检测CYP1A1活性。结果 MTT法检测显示,各浓度BaP组光密度(D553 nm)均较对照组(0μmol/L BaP)升高,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。W estern b lotting和RT-PCR检测结果显示,各浓度BaP组CYP1A1 mRNA及蛋白的表达水平均高于对照组,其中7.5μmol/L BaP组最高(P<0.05)。CYP1A1活性检测结果显示,各浓度BaP组HeLa细胞CYP1A1酶活力均高于对照组,以5.0μmol/L BaP组活力最高(P<0.05)。结论 BaP可诱导HeLa细胞增殖,诱导HeLa细胞表达CYP1A1,并增加酶活性。
- 石玉荣耿建王惠章尧
- 关键词：苯并[A]芘细胞色素P450HELA细胞
- 氯化镁对同型半胱氨酸诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9表达的影响
- 2009年
- 观察MgCl2对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达的影响,旨在探讨镁剂治疗心血管疾病的分子机制。采用细胞培养、MTT法、Western印迹以及RT-PCR等方法,研究0.5mmol/LHcy分别与不同浓度的MgCl2共同作用A7r5细胞48h后,MgCl2对Hcy诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9的mRNA及其蛋白质表达的影响。MTT法结果显示,随着MgCl2浓度增加,吸光度值逐渐减少,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);MgCl2使Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白质表达均减少,其中2.0、3.0mmol/LMgCl2组抑制作用显著(P<0.05)。研究结果表明Hcy促进A7r5细胞增殖的效应能被MgCl2抑制;MgCl2能抑制Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的表达。这一效应可能是镁剂治疗心血管疾病的分子机制之一。
- 禹莉陈昌杰王惠章尧
- 关键词：MGCL2同型半胱氨酸MMP-2MMP-9
- 肝细胞癌中载脂蛋白M,肝受体同系物1和肝细胞核因子1α表达的相关性分析被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织和癌旁组织中载脂蛋白M(apoM)、肝受体同系物1(LRH-1)和肝细胞核因子1α(HNF-1α)的表达并分析3者之间的相关性。方法:采用RT-PCR和免疫组化分别检测17例原发性肝细胞癌和相应癌旁组织中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA的表达及apoM和HNF-1α蛋白的表达。结果:apoM、LRH-1和HNF-1αmRNA及apoM和HNF-1α蛋白在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织(P均<0.01)。LRH-1、HNF-1αmRNA和apoMmRNA表达均呈正相关关系(依次为r=0.463,P<0.01;r=0.356,P<0.05)。结论:肝细胞癌中apoM的表达和LRH-1及HNF-1α表达密切相关,LRH-1和HNF-1α可能是apoM表达的重要调节因子。
- 程龙强章尧陈昌杰杨清玲王惠
- 关键词：肝细胞癌载脂蛋白M
