袁立科
- 作品数:2 被引量:8H指数:1
- 供职机构:甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 口蹄疫病毒Asial型P12A3C基因自杀式真核表达载体的构建
- 口蹄疫病毒/(Foot-and-mouth disease virus FMDV/)主要引起牛、猪、羊等偶蹄动物的口蹄疫/(Foot-and-mouth disease,FMD/)。FMD是一种急性接触性传染病,发病率极...
- 袁立科
- 文献传递
- 含LoxP位点和EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建被引量:7
- 2008年
- 提取鸭瘟病毒(DPV)疫苗株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的DPV UL区UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失468个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得了pSKLR;再将含2个LoxP位点的表达绿色荧光蛋白的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLR-EGEP-LoxP.大量提取pSKLR-EGEP-LoxP质粒,用脂质体转染鸭胚成纤维细胞,24 h后蛋白被正确表达,表明含LoxP位点的表达EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失的重组转移载体被成功构建.
- 潘华奇刘磊曹瑞兵魏凡华袁立科李娟孙海亮潘光炎
- 关键词:鸭瘟病毒EGFPTK基因