何丹
- 作品数:3 被引量:18H指数:2
- 供职机构:南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 两种生防活性蛋白Harpin/_(Xooc)和AiiA的表达及生物活性检测
- 农药伴随人类改造自然、征服自然已有一百多年的历史,在植物保护中发挥了巨大的作用,促进了农业发展,给人类带来了巨大的经济效益。然而使用农药所引起的副作用,如:病虫草产生抗药性、对非靶标生物的直接毒害、对环境的污染等,已成为...
- 何丹
- 关键词:AIIA生物活性检测
- 文献传递网络资源链接
- Harpin_(Xooc)蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测被引量:7
- 2008年
- 采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌RS105菌株中扩增harpinXooc编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵上清液经浓缩后进行SDS-PAGE电泳分析,在约18kD处有特异目标条带出现。Western blot检测表明表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明酵母重组表达蛋白harpinXooc能够诱导烟草产生过敏反应和促进烟草生长,活性高于在大肠杆菌中表达的harpinXooc。
- 何丹刘俊高学文沈波
- 关键词:毕赤酵母生物活性检测
- 转harpin_(Xooc)蛋白编码基因hrf2对油菜抗菌核病的影响被引量:12
- 2008年
- 【目的】尝试利用转基因方法提高油菜抗病性。【方法】将来自水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)编码harpinXooc蛋白的hrf2基因插入植物表达载体pCAMBIA1301中,构建了植物重组表达质粒pCAMBIA1301-hrf2。由根癌农杆菌LBA4404介导,将重组表达质粒pCAMBIA1301-hrf2转化甘蓝型油菜杨油4号子叶节。【结果】获得了抗潮霉素的再生转基因油菜植株,经PCR,RT-PCR和GUS染色检测证明hrf2基因已整合到油菜基因组中。抗病性鉴定结果表明,转基因油菜对油菜菌核病有较好的抗性,在转基因植株叶片上油菜菌核病菌菌丝的生长受到明显抑制。【结论】利用农杆菌转化法可将hrf2基因导入油菜基因组中,并使转基因油菜对菌核病的抗性提高。
- 马玲莉霍蓉高学文何丹邵敏王琦
- 关键词:转基因油菜抗病性