张志奇
- 作品数：27 被引量：34H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- AA-861抑制5-LO途径对KC和HSC的影响
- 2009年
- 目的探讨5-脂氧合酶（5-LO）特异性抑制剂AA-861对肝枯否细胞（KC）和星状细胞（HSC）的活化、增殖和基因表达的影响。方法（1）观察AA-861对脂多糖（LPS）诱导的活化KC凋亡、KC中5-LOmRNA和蛋白表达的影响；（2）分别将LPS和AA-861处理后的KC上清液加入静止HSC中，观察HSC的活化、增殖及基因表达情况。结果（1）经LPS刺激后，KC中5-LO的mRNA和蛋白表达均显著增加，同时5-LO代谢产物的含量也显著增加；AA861显著降低活化KC中5-LOmRNA和蛋白的表达及其培养上清中5-LO代谢产物的含量，并显著增加KC的凋亡，AA-861对静止状态的KC的凋亡和基因表达无明显影响。（2）加入活化KC上清液后，静止HSC的增殖显著增加，其活化相关基因如平滑肌肌动蛋白-α（α—SMA）、Ⅰ型胶原（Collagen-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）等的表达也显著提高；加入AA-861处理后的活化KC上清液可抑制静止HSC的活化，降低其增殖力和活化相关基因的表达。结论AA-861可通过抑制5-LO途径，诱导过度增殖的KC凋亡，从而抑制HSC的活化和增殖，并降低HSC活化相关基因的表达。
- 张志奇邱江锋陈炜赵刚吴志勇
- 关键词：5-脂氧合酶枯否细胞肝星状细胞
- 特异性siRNA抑制肝星状细胞Smad2表达被引量：13
- 2004年
- 目的构建Smad2特异性siRNA表达克隆,探讨其在肝星状细胞(HSCs)中是否能够有效地抑制Smad2的表达。方法利用生物软件进行Smad2mRNA二级结构模拟,选择合适的靶位点,使用pBSKU6载体表达Smad2特异性siRNA,在体外转染HSC鄄T6细胞株,应用RT鄄PCR和Western鄄blot技术检测Smad2mRNA和蛋白的表达情况。结果成功构建siRNA表达克隆,转染后Smad2在基因和蛋白的表达水平均受到了明显抑制。在构建成功的4个克隆中,CR4抑制mRNA表达最为显著,达90%以上;抑制蛋白表达率也达到80%左右。同时CR1和CR4能有效地下调HSC分泌Ⅲ型胶原。结论在体外实验中,载体表达的特异性siRNA可有效地抑制HSCs中Smad2的表达,并可对激活的HSCs分泌细胞外基质产生有益的影响。
- 罗海峰吴志勇邱江锋陈炜张志奇孟方斌
- 关键词：RNA干扰肝星状细胞转化生长因子肝纤维化
- 门静脉高压症的细胞分子机制及治疗进展被引量：1
- 2003年
- 张志奇吴志勇
- 关键词：星形细胞内皮素一氧化氮基因治疗
- 门静脉高压症时一氧化氮在发病中的作用及基因治疗研究
- 吴志勇曹晖邱江锋张志奇张海婴周健谈焱
- 该项目资金来源于国家自然科学基金（30070740）和上海市科委基金（962B140，014119067及99XD14004）。背景：肝内阻力增加是肝硬化门静脉高压症（PHT）的始动因素，而由血管活性物质增多引起的高动力...
- 关键词：
- 关键词：门静脉高压症一氧化氮基因治疗
- eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内血流阻力的影响被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨内皮性一氧化氮合酶 (endothelialnitricoxidesynthase ,eNOS)对肝硬化大鼠肝内血流阻力 (intrahepaticvascularresistance ,IHVR)和门静脉压力 (portalvenouspressure ,PVP)的影响。方法 (1 )建立原位肝脏灌流模型 (insituliverperfusion ,ISLP) ,观察去甲肾上腺素 (noradrenalin ,NE)、NG 单甲基 L 精氨酸 (NG monomethyl L arginine,L NMMA)和精氨酸 (L arginine ,L Arg)对肝硬化大鼠门静脉灌注压 (portalperfusionpressure,PP)的影响。 (2 )观察活体门静脉注射L NMMA对肝硬化大鼠PVP的影响。结果 (1 )ISLP模型中 ,对照组大鼠灌流液中加入L NMMA后PP对NE的反应性显著增加 ,PP峰值增高至 (2 6 .7± 0 . 9)mmHg ;如预先给予L Arg后再加L NMMA ,PP对NE反应性显著低于单用L NMMA时 ,其PP峰值降为 (2 3 .2± 0 . 9)mmHg。eNOS基因治疗 5d后 ,PP对NE的反应性显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,其PP峰值为 (1 9. 9± 1 .0 )mmHg ;加入L NMMA后PP峰值虽升至 (2 3.5± 2 .0 )mmHg,但仍显著低于对照组PP(P <0 0 1 )。 (2 )活体门静脉注射L NMMA后 ,eNOS治疗组PVP虽由 (1 3. 9±0 . 7)mmHg升至 (1 9. 3± 1 . 0 )mmHg ,但仍显著低于对照组PVP(P <0 .0 1 ) ,活体试验与原位灌注结果相符。
- 张志奇吴志勇邱江锋罗海峰兰斓
- 关键词：ENOS基因治疗肝硬化去甲肾上腺素
- eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内eNOS表达和门静脉压力的影响
- 2003年
- 目的:探讨eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝内eNOS表达和门静脉压力的影响。方法:建立CCl_4肝内型肝硬化大鼠模型。取30只肝硬化大鼠,随机分成三组:eNOS治疗组(n=10)、Tris对照组(n=10)和空质粒对照组(n=10)。经门静脉分别注射脂质体-eNOS质粒、Tris缓冲液、脂质体-空质粒,分别测定注射前和注射5d后门静脉压力,并用RT-PCR和免疫组化方法检测三组大鼠注射5d后肝内eNOS的表达。结果:eNOS基因治疗5d后,eNOS mRNA和eNOS蛋白表达都显著增加。eNOS治疗组门静脉压力为(12.8±0.8)mmHg,显著低于治疗前的PVP(15.3±1.0)mmHg(P<0.01),而两对照组门静脉压力在注射前后无显著性差异。结论:以脂质体为载体,经门静脉注射eNOS基因治疗可增加肝内eNOS表达并降低门静脉压力。
- 张志奇吴志勇邱江锋罗海峰
- 关键词：门静脉基因治疗肝硬化
- 梅克尔憩室并发腹内疝致肠梗阻一例
- 2007年
- 病例：男，32岁。因突发腹痛3d入院，伴恶心、呕吐，轻度腹胀。肛门停止排便、排气。体检：腹平，左上腹似见胃肠型，中上腹压痛、反跳痛，以左上腹为甚，叩诊呈鼓音，右下腹浊音。肝、肾区均有叩痛，墨菲征阴性。肠鸣音弱。既往无类似发作。血常规：WBC8．4×10^9／L，N0．84，L0．13。血糖、血淀粉酶正常。腹腔穿刺见黄色液体，略浑浊。B超示腹腔内肠管扩张，肠间隙见少许积液，范围局限。腹部平片示中上腹见阶梯状气液平，肠管高度扩张、胀气，结肠未显影。术前诊断为急性肠梗阻。即行剖腹探查，术中见距回盲瓣约50cm处．
- 王银平赵刚张志奇孙婧璟
- 关键词：MECKEL憩室肠梗阻
- Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用被引量：3
- 2005年
- 目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果pEGFP-Cl-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05)。结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调。
- 罗海峰吴志勇陈炜邱江锋张志奇孟方斌
- 关键词：SMAD2特异性抗肝纤维化肝脏组织转染EGFP
- 组织转谷氨酰胺酶基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞的影响
- 2009年
- 目的构建组织转谷氨酰胺酶（tTG）RNA干扰（RNAi）慢病毒载体，研究其对肝星状细胞（HSC）的影响。方法设计、合成tTG基因RNAi有效靶序列，与慢病毒载体系统进行连接、转染，获得表达tTG基因的RNAi慢病毒载体质粒（Lenti—siRNA—tTG）；将大鼠活化HSC分成阴性对照组（CON）、siRNA—GFP对照组（GFP）和siRNA—tTG组（rtTG）。应用real—timePCR、Western blot和MTT法检测Lenti-siRNA—tTG感染后HSC中tTG、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（collagen-1）的mRNA和蛋白表达情况以及HSC的增殖情况。结果成功构建siRNA-tTG慢病毒载体；Lenti—siRNA-tTG感染后，HSC中tTG和collagen-1的mRNA表达水平降低（P〈0．05），HSC中tTG、lysine和collagen-1的蛋白表达水平下降（P〈0．01），HSC的增殖能力降低（P〈0．05）。结论Lenti-siRNA-tTG能通过抑制HSC中tTG基因的表达而抑制HSC的增殖，并降低HSC中collagen-1合成和交联的形成，具有潜在的抗纤维化形成的功能。
- 赵刚张志奇吴志勇陈波张斌
- 关键词：肝细胞RNA干扰慢病毒载体
- eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝窦容积的影响被引量：1
- 2003年
- 目的:观察以eNOS基因导入肝硬化门静脉高压症大鼠后,肝内eNOS表达和肝窦容积的变化;探讨eNOS基因转染对肝窦容积的影响。方法:①建立CC14肝内型肝硬化大鼠模型,分别取10只肝硬化大鼠和10只正常大鼠肝组织,用免疫组化、图像分析系统测定eNOS含量和肝窦容积;②取30只肝硬化大鼠,随机分成3组:内eNOS治疗组(n=10)、Tris对照组(n=10)和空质粒对照组(n=10)。分别经门静脉注射脂质体-eNOS质粒、Tris缓冲液脂质体-空质粒5d后,用RT-PCR和免疫组化方法检测3组大鼠肝内eNOSmRNA、eNOS含量和肝窦容积;结果:①硬化肝内eNOS含量和肝窦容积分别为(3.81±1.09)%和(3.51±0.72)%,均显著低于正常对照组的(14.78±3.06)%和(9.32±1.05)%(P<0.01);两组大鼠肝内eNOS含量与肝窦容积之间均呈显著正相关,相关系数r分别为0.676(P<0.05)和0.703(P<0.05)。②经门静脉注射各组之规定内容5d后,eNOS基因治疗组大鼠肝内eNOSmRNA、eNOS含量和肝窦容积分别为(1.22±0.14)U、(17.38±4.62)%和(5.77±1.49)%,均显著高于Tris处理组或空质粒处理组(P<0.01);3组的eNOS含量与肝窦容积之间均呈显著正相关,r分别为0.799(P<0.01)、0.767(P<0.01)和0.748(P<0.05)。结论:肝硬化时,因肝窦内皮细胞受损,肝内eNOS含量减少,肝内NO产量减少。
- 张志奇吴志勇邱江锋张燕兰斓
- 关键词：肝硬化ENOS基因基因治疗门静脉高压症
