彭攸
- 作品数：13 被引量：53H指数：5
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金奉贤区科学技术发展基金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- miRNAs慢病毒文库筛选靶向EZH23'非翻译区的新型miRNAs及其在乳腺癌中的表达被引量：2
- 2014年
- 目的重组过表达EZH2基因3'非翻译区的MCF-7细胞株中筛选靶向miRNAs,并进行细胞和组织定量分析。方法重组细胞株感染慢病毒文库,利用细胞毒性药物筛选后抽提细胞基因组,以此为模板PCR扩增出miRNA前体,测序确定miRNAs名称,并对其进行PCR定量分析。结果在重组细胞株中共筛选出7种miRNAs,依次为miR-15b、miR-16-2、miR-181b2、miR-217、miR-224、miR-329-1、miR-487b,这些新型miRNAs用生物信息学软件PicTar和TargetScan无法预测。Real-time PCR发现,与乳腺癌细胞MCF-7相比,正常乳腺细胞株HBL-100中miR-217、miR-329-1、miR-487b高表达;乳腺癌组织中仅miR-15b及miR-16-2表达增加,与癌旁组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论在重组过表达EZH2 3'-UTR的乳腺癌MCF-7细胞株中结合慢病毒文库可筛选出用生物信息学软件未预测的新型靶向miRNAs,这些新型miRNA在正常乳腺细胞与肿瘤细胞及组织中存在差异表达。
- 刘萃萃王璐璐赵卫卫彭攸王玉平孙振亮冯景
- 关键词：乳腺癌EZH2EZH2
- EZH2基因3'非翻译区慢病毒载体构建及重组体筛选被引量：1
- 2013年
- 目的构建携带人EZH2基因3'非翻译区(3'UTR)的慢病毒筛选载体并实现该重组体在人乳腺癌MCF-7中稳定整合,为下一步MicroRNAs(miRNAs)筛选奠定基础。方法从组织中提取并用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出EZH2基因3'UTR,构建携带EZH2基因3'UTR的重组慢病毒载体CTX-Lentivirus-EZH2 3'UTR,脂质体法将重组的慢病毒载体和包装载体混合物共转染工具细胞293T细胞,包装产生慢病毒颗粒。用裂解液裂解病毒颗粒,根据慢病毒载体上的CMV启动子表达量检测病毒滴度。用慢病毒颗粒感染乳腺癌MCF-7细胞后,通过嘌呤霉素筛选稳定整合的乳腺癌细胞MCF-7,用Real-Time PCR和Western blotting方法检测EZH2基因3'UTR是否整合入细胞MCF-7中。结果 PCR扩增检测阳性菌落和测序结果证实,EZH2基因3'UTR成功定向克隆到慢病毒载体上。Real-Time PCR检测病毒滴度为4.3×109拷贝/mL。筛选稳定整合MCF-7细胞的最佳浓度为0.2μg/mL。重组慢病毒转导MCF-7后,Real-Time PCR和Western blotting方法分别检测EZH2基因3'UTR整合到乳腺癌细胞MCF-7基因组中。慢病毒感染实验组和对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建携带EZH2基因3'UTR慢病毒筛选载体,实现重组体在乳腺癌MCF-7细胞中稳定整合。
- 赵卫卫彭攸李晓娇卢晓佳王玉平刘萃萃王璐璐冯景
- 关键词：EZH2非翻译区慢病毒载体MCF-7
- 区域内HPV亚型分布特点及其与宫颈病变的关系
- 目的了解上海市奉贤地区妇女生殖道人乳头状瘤病毒（HPV,human papolloma virus）的感染状况及其分布特点,分析其与宫颈病变的关系,为区域内HPV防治提供初步建议。方法以2011年1月至2015年12月于...
- 肖林林赵卫卫彭攸刘秀芬余繁荣魏取好冯景
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌感染率
- 文献传递
- 区域内HPV亚型分布特点及其与宫颈病变的关系被引量：7
- 2017年
- 目的了解上海市奉贤地区妇女生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)的感染状况及其分布特点,分析其与宫颈病变的关系,为区域内HPV防治提供初步建议。方法以2011年1月至2015年12月于上海市第六人民医院南院接受HPV检测的16岁以上女性为研究对象,对其宫颈分泌物进行HPV的21个亚型分型检测,其中1 374例经阴道镜下定点宫颈活检,确定病理分级,数据录入并应用SPSS20.0软件进行统计学分析。结果研究病例中HPV的21个亚型均有检出,HPV阳性率为17.54%(6 313/35 977),奉贤区5年间HPV感染率较高型别依次是HPV18、HPV52、HPV16、HPVCP8304、HPV58、HPV53;在1 374例宫颈病变中HPV的阳性率为82.75%(237/1 374),在宫颈病变患者中常见型别分布为HPV16、HPV58、HPV52、HPV18、HPV31。结论上海市奉贤地区的HPV感染情况具备一定的地域特征,可根据研究结果制定符合奉贤地区的HPV防治策略。
- 肖林林赵卫卫彭攸刘秀芬余繁荣魏取好冯景
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌感染率
- 高敏肌钙蛋白Ⅰ、同型半胱氨酸、炎症因子在急性加重期慢性阻塞性肺疾病中的诊断价值被引量：9
- 2019年
- 目的探讨高敏肌钙蛋白Ⅰ(hs-cTnI)、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的诊断价值。方法收集AECOPD患者96例,以50例体检健康者为健康对照组,采用电化学发光法测定hs-cTnI水平、循环酶法测定Hcy水平、免疫比浊法测定hs-CRP水平、胶体金印迹法测定PCT水平,相关性分析采用Pearson相关分析,分析各指标与AECOPD之间的相关性、利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析hs-cTnI、Hcy、hs-CRP、PCT诊断COPE急性加重期的曲线下面积(AUC)。结果 AECOPD组hs-cTnI、hs-CRP和PCT水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),AECOPD组Hcy水平低于健康对照组,差异无统计学意义(P>0.05);Pearson相关性分析中,hscTnI、hs-CRP和PCT水平与AECOPD呈正相关(r分别为0.346、0.401、0.509),Hcy水平与AECOPD相关性较差(r=0.078);ROC分析中,hs-cTnI、hs-CRP和PCT的AUC分别为0.825、0.834、0.922,最佳诊断界值分别为0.082、18.25、3.075,灵敏度分别为0.823、0.802、0.781,特异度分别为0.92、0.62、0.94,约登指数分别为0.743、0.422、0.721,kappa值分别为:0.699、0.423、0.664。结论 Hcy检测对AECOPD诊断价值低,hscTnI、hs-CRP和PCT检测在AECOPD具有一定的诊断价值,可作为AECOPD的辅助诊断指标。
- 傅虹肖林林彭攸魏取好冯景
- 关键词：炎症标志物慢性阻塞性肺疾病受试者工作特征曲线同型半胱氨酸
- 人EZH2基因编码区及3'非翻译区融合蛋白重组慢病毒表达载体构建及其在293T细胞中的表达被引量：4
- 2012年
- 目的构建携带人EZH2基因编码区(coding region,CDS)及3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)融合红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)重组慢病毒表达载体,使mCherry-EZH2融合蛋白在293T细胞中稳定表达。方法运用In-Fusion定向克隆技术构建人EZH2基因CDS区及3'UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体,测序无误后抽提质粒,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度。Western blot检测mCherry-EZH2的表达。结果测序证实重组慢病毒表达载体基因序列完全正确;病毒颗粒包装成功,滴度为1.59×109IU/ml;Western blot检测293T细胞中可以表达mCherry-EZH2融合蛋白。结论成功构建人EZH2基因CDS区及3'UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体及病毒,其mCherry-EZH2可以在293T细胞中稳定表达。为进一步分析可能调控EZH2基因CDS区及3'UTR表达的miRNA奠定前期实验基础。
- 彭攸赵卫卫李晓娇王玉平卢晓佳邬美玉冯景
- 关键词：EZH2基因红色荧光蛋白
- miR-34b调控去泛素化酶USP22在急性髓细胞白血病细胞HL60中的生物学作用被引量：4
- 2019年
- 目的研究miR-34b调控其靶基因USP22分子机制及其在急性髓细胞白血病细胞HL60中的生物学效应。方法荧光定量PCR (qPCR)检测miR-34b、USP22转录水平;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测USP22、Bax、Bcl-2蛋白表达水平;急性髓细胞白血病HL60细胞中过表达、抑制miR-34b或干扰USP22后,CCK-8及AnneximV分别检测细胞增殖活性及凋亡变化。双荧光素酶报告基因系统证实miR-34b与USP22的3,非编码区(3-UTR)相互作用。结果 miR-34b在白血病细胞HL60中表达下调,为外周血健康对照单个核细胞的0. 46 ±0. 07倍(P<0.01)。与对照细胞相比,在HL60细胞中过表达miR-34b或抑制miR-34b后,细胞相对活性分别出现减低或增强现象(P<0.01)。miR-34b在HL60中过表达后,凋亡细胞(29.91 ±1. 14)%较对照细胞(8.77 ±0. 23)%增加了 2.41倍(P<0.01), Western印迹检测证实了促凋亡分子Bax及抑制凋亡分子Bcl-2在miR-34b过表达后分别出现了上调及下调现象。利用在线预测软件预测USP22可能是miR-34b直接调控基因。在HL60细胞中过表达或抑制miR-34b后,USP22转录水平及蛋白表达水平均不同程度上调及下调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因系统证实miR-34b过表达后,USP22野生型的3-UTR较对照组显著下调(P<0.01),而突变型无显著改变。进一步敲减USP22后HL60细胞增殖活性减低,并诱导细胞凋亡。结论 miR-34b对白血病细胞HL60的抑癌活性可部分通过抑制USP22得以实现;同时过表达miR-34b或抑制USP22表达有望成为急性髓细胞白血病的诊治靶点。
- 朱斌刘娟娟潘韶英丁志勇赵文理肖林林魏取好彭攸王素丽
- 关键词：急性髓细胞白血病增殖凋亡
- 外周血中NLR联合PLT、C1q、C3、ESR、TP检测在系统性红斑狼疮诊断中的作用
- 2023年
- 探究系统性红斑狼疮患者临床特征及实验室检测指标,并对其危险因素及保护因素进行联合检测,为系统性红斑狼疮诊断及预防提供参考依据。方法 回顾性分析2017年3月—2021年10月上海交通大学附属第六人民医院南院确诊为SLE的122例患者,同期选取129例健康体检者作为健康对照组。 比较两组间基线资料,采用 Logistic单因素及多因素回归分析影响系统性红斑狼疮患者的相关因素。 采用受试者工作特征(ROC)曲线评价NLR、C3、PLT、ESR、TP、C1q联合检测对系统性红斑狼疮的诊断价值。结果 SLE患病组IgA、IgM 、C3、C4、WBC、RBC、PLT、NLR、HGB、ESR、CR、TP、ALB、AFU、补体C1q等16项差异有统计学意义(p<0.05);Logistic 回归分析表明NLR、ESR是SLE患者的危险因素, 且NLR危险性更显著。PLT、C1q、C3、TP是SLE患者的保护因素。ROC 曲线分析显示,六项指标联合检测的诊断性能更好,AUC0.954;敏感91.8%;特异性88.4%。结论 NLR、ESR是SLE患者的危险因素,PLT、C1q、C3、TP是SLE患者的保护因素,NLR联合PLT、C1q、C3、ESR、TP检测对SLE诊断价值较大,对监测SLE患者的诊断及预后具有重要意义。
- 杨雅淋彭攸
- 关键词：补体C1QC3红细胞沉降率
- 术前外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值在乳腺癌诊断中的作用被引量：9
- 2018年
- 目的探讨术前外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在乳腺癌诊断中的最佳临界值及其在临床诊断中的作用。方法选取131例行手术治疗的乳腺癌患者(乳腺癌组)和120例乳腺良性病变患者(乳腺良性疾病组),并以95名女性体检健康者作为正常对照组。采用SYSMEX XT-800i全自动血液分析仪计数中性粒细胞(NE)和淋巴细胞(LY),计算NLR;采用电化学发光法检测外周血糖类抗原15-3(CA15-3)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)水平。根据受试者工作特征(ROC)曲线确定最佳临界值。结果乳腺癌组术前NLR、NE、LY、CA15-3明显高于正常对照组和乳腺良性疾病组(P<0.05)。NLR的曲线下面积(AUC)为0.935,最佳临界值为1.995,敏感性为85.2%,特异性为87.1%。以NLR为检测基础,联合CA15-3诊断乳腺癌的敏感性为98.0%,特异性为92.6%。结论 NLR诊断乳腺癌的最佳临界值为1.995,联合CA15-3能增加乳腺癌诊断的敏感性和特异性,对乳腺癌的诊断、病情评估具有指导意义。
- 赵卫卫肖林林刘秀芬彭攸黄丁丁王玉平冯景
- 关键词：糖类抗原15-3乳腺癌
- EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达及意义被引量：7
- 2015年
- 目的探讨EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达特点及与主要临床病理参数的关系。方法采用免疫组化SP法,检测131例三阴性乳腺癌、78例非三阴性乳腺癌及65例癌旁组织中EZH2及DNMT1的表达情况。采用多因素logistic回归分析EZH2及DNMT1阳性表达有关的因素,Spearman等级相关分析三阴性乳腺癌中EZH2及DNMT1表达的相关关系。结果 EZH2蛋白在三阴性乳腺癌组织、非三阴性乳腺癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为86.3%、89.7%和40.0%;DNMT1蛋白在三种组织中的阳性表达率分别为63.4%、66.6%和44.6%;两种蛋白在乳腺癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05);两种蛋白在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织间表达差异无统计学意义。在三阴性乳腺癌中,EZH2阳性表达与肿瘤组织学分级、肿瘤直径、淋巴结是否转移有关(P<0.05),DNMT1的表达与肿瘤组织学分级、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,肿瘤组织学分级为影响EZH2及DNMT1表达的最主要因素;三阴性乳腺癌中DNMT1与EZH2的表达呈正相关(r=0.34,P<0.01)。结论 EZH2与DNMT1的高表达与三阴性乳腺癌的分化、生长、转移有关,且两者在三阴性乳腺癌中的表达呈正相关,其联合检测可能对三阴性乳腺癌的预后判断更有价值。
- 武萍萍陶然彭攸赵卫卫刘萃萃王璐璐胡朝晖王玉平孙振亮冯景
- 关键词：DNA甲基转移酶1
