王元忠
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第三军医大学更多>>
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- HEPC1和HEPC2基因的稳定转染促进RAW264.7细胞铁滞留被引量：1
- 2006年
- 目的观察HEPC1和HEPC2基因稳定转染对RAW264.7细胞铁滞留的影响。方法用脂质体将HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体分别稳定转染RAW264.7细胞,以转染空载体为对照,RT-PCR鉴定后,分别给予FeCl3和59FeCl3处理,然后测定各组细胞及培养上清中59Fe的放射活性,分别以105细胞的cpm和培养上清cpm/(细胞cpm+培养上清cpm)作为衡量铁贮存和铁释放的指标。结果RT-PCR鉴定HEPC1和HEPC2基因的稳定转染均获得成功;稳定转染HEPC1和稳定转染HEPC2的RAW264.7细胞组铁贮存分别是稳定转染空载体的RAW264.7细胞组的1.65倍(P<0.01)和1.71倍(P<0.01),而铁释放率则分别是稳定转染空载体的对照组的67.6%(P<0.01)和57.9%(P<0.01)。结论HEPC1和HEPC2基因的稳定转染具有促进RAW264.7细胞铁滞留的作用。
- 王元忠陈彬廖荣霞周建新
- 关键词：HEPCIDIN巨噬细胞铁代谢
- 核因子-κB参与小鼠Hepcidin基因的转录调控被引量：3
- 2006年
- 目的探讨核因子-kB(NF-kB)参与Hepcidin基因急性时相表达转录调控的可能性及其分子机制。方法腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应模型,检测Hepcidin表达与LPS的剂量效应和时间效应关系；电泳迁移率变动实验(EMSA)初步探讨NF-kB参与Hepcidin基因转录调控的可能性；构建NF-kB p65亚基特异的小干扰RNA(siRNA)表达载体pAVU6+27-NF-kB,DOTAP脂质体法瞬时转染小鼠原代肝细胞,观察NF-kB p65基因沉默后Hepcidin表达改变以及LPS诱导Hepcidin表达情况。结果 Hepcidin表达与LPS注射剂量和时间呈正相关,50 μg LPS注射后10h,Hepcidin表达达到峰值。EMSA 显示-53～-64 bp位点出现明显的滞后带。NF-kB p65特异的siRNA表达载体瞬时转染原代肝细胞后,基因沉默效率为50％～67％,转染细胞Hepcidin的表达水平明显下降,且并不能被LPS显著诱导。结论 NF- kB参与Hepcidin转录调控,p65亚基是其上调Hepcidin基因表达的关键组分,-53～-64 bp是p65亚基的作用位点。
- 廖荣霞孙建国钟小林周建新王元忠
- 关键词：急性时相反应HEPCIDINRNA干扰
- Hepcidin:具有抗菌活性的铁调节激素被引量：8
- 2005年
- Hepcid in是近年来发现的由肝细胞分泌的小分子多肽,具有广谱抗菌活性,同时也参与铁代谢,目前认为它是维持铁稳态极其重要的负激素,并参与或介导多种铁代谢紊乱性疾病。本文就hepcid in的鉴定、结构、功能及其与铁代谢紊乱性疾病的研究进展作一综述。
- 王元忠周建新
- 关键词：HEPCIDIN抗菌肽铁代谢
- DNA甲基化及其对肿瘤的作用被引量：2
- 2003年
- DNA甲基化是一种重要的表遗传修饰,在肿瘤细胞中表现为基因组整体水平的低甲基化和一些特定区域的高甲基化,发生低甲基化的序列主要是一些高度和中度重复序列,而发生高甲基化序列通常是跨越管家基因和肿瘤抑制基因启动子的CpG岛,它们在肿瘤的发生发展中起重要的作用,本文就这些序列的异常甲基化和其对肿瘤作用一些进展和观点作一介绍。
- 王元忠周建新
- 关键词：肿瘤DNA甲基化基因沉默
- PNRC在核仁的定位、功能及其剪接变异体的分析
- 核受体(nuclear receptor，NR)是一类转录因子，在调节机体的生殖、发育和体内稳态等过程中发挥极其重要的作用。核受体调节基因的转录通常需要募集辅调节子(coregulator)。在配体的作用下，核受体的构象...
- 王元忠
- 关键词：核磷蛋白核仁素剪接变异体核受体转录因子
- 文献传递
- HEPC1和HEPC2对小鼠巨噬细胞铁贮存与释放影响的实验研究
- Hepcidin(hep=hepatic,cidin=antimicrobialactivity,简称HEPC或HAMP)是近年来发现的第一种由哺乳动物肝脏特异性合成与分泌的抗菌肽，从鱼类到人类众多的脊椎动物肝脏中均检测...
- 王元忠
- 关键词：HEPCIDIN巨噬细胞铁代谢转染抗菌肽
- 文献传递
- HEPC1和HEPC2真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达被引量：3
- 2005年
- 目的 构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH 3T3细胞后的表达情况。方法 从小鼠肝组织中分离总RNA ,采用RT PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA ,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后,用脂质体将重组子分别转染至NIH3T3细胞中,G418进行长期筛选,然后用RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2的表达。结果 RT PCR获得预期大小的片段,重组子pcDNA3 HEPC1和pcDNA3 HEPC2酶切正确,测序表明HEPC1有1个碱基与GenBank中报告的不同,但其位于密码子的第3位在此不改变编码的氨基酸,HEPC2则完全与GenBank中报道的一致,经RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH3T3细胞中均有表达。结论 成功构建了小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH 3T3细胞中获得了表达,为下一步探讨HEPC1和HEPC2的功能及作用机制奠定了基础。
- 王元忠周建新钟小林廖荣霞
- 关键词：HEPCIDINPCDNA3NIH3T3细胞转染小鼠
