赵建民
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
- 供职机构：中国科学院烟台海岸带研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院战略性先导科技专项中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)金属硫蛋白基因克隆及Cd^(2+)胁迫下的表达分析被引量：2
- 2014年
- 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸的小分子蛋白质,参与机体重金属解毒和金属元素代谢等生理过程。本研究采用RACE技术,克隆获得了菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)金属硫蛋白(RpMT)的全长cDNA序列。RpMT的cDNA全长为570bp,编码75个氨基酸,包含15个MT所特有的Cys-Xn-Cys结构。采用实时荧光定量PCR技术,分析了两种壳色菲律宾蛤仔(白蛤和斑马蛤)RpMT基因在Cd2+暴露后的表达变化。结果发现:Cd2+急性和亚慢性暴露均可导致两种壳色蛤仔消化腺和鳃组织RpMT基因表达量的显著上调;暴露后两种壳色蛤仔鳃组织RpMT基因表达量的增加幅度均高于消化腺组织,且以白蛤鳃组织基因表达水平的上调幅度较高。上述结果表明,RpMT可能在菲律宾蛤仔抵御Cd2+胁迫过程中发挥了重要作用。
- 林晓玲王清袁泽轶于倩吴惠丰丛明李斐赵建民
- 关键词：金属硫蛋白基因克隆壳色
- 典型持久性有机污染物与抑癌基因相互作用的分子模拟与验证被引量：4
- 2015年
- 化学品的环境污染问题给人类带来了惨痛的教训.对化学品进行生态风险评价,是预防和控制其污染的前提.发展计算(预测)毒理学方法,可以高效地评价和预测化学物质的环境暴露、危害性和风险性.本研究采用分子模拟与光谱实验(紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及熔点实验)相结合的方法,研究了典型持久性有机污染物2,2',4,4'-四溴联苯醚(BDE-47)与抑癌基因p53启动子区域片段(p53-DNA)的相互作用机制.分子模拟的结果显示,BDE-47以部分嵌插和沟槽结合的形式与p53-DNA相互作用.光谱实验验证了分子模拟的结果:BDE-47与p53-DNA发生增色效应,同时BDE-47的加入使EB-p53-DNA体系发生静态荧光猝灭,说明BDE-47竞争性地嵌插入p53-DNA的碱基对中,同时伴有沟槽结合,结合常数Kb为7.24×103 L/mol.本研究从分子水平上阐明了BDE-47与p53-DNA间的相互作用机制,对于化学品的风险筛查和管理具有重要意义.
- 吴惠丰曹璐璐李斐李雪花赵建民
- 关键词：持久性有机污染物分子模拟光谱法
- 菲律宾蛤仔对三价和五价无机砷的富集转化规律被引量：8
- 2017年
- 砷是具有类金属特性的污染物,不同赋存形态的砷毒性差异极大,海洋贝类由于其生活习性易于富集高浓度的砷,本研究以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为对象,探讨其在亚砷酸盐(arsenite,AsⅢ)和砷酸盐(arsenate,AsⅤ)暴露14天后的生物富集和转化规律。结果表明,菲律宾蛤仔对砷的积累量随海水中无机砷浓度的升高而逐渐增加。但菲律宾蛤仔鳃组织对砷的生物利用度很低,10μg/L暴露组菲律宾蛤仔鳃组织对砷的积累量与对照组相比无显著差异。菲律宾蛤仔对三价砷的生物利用度高于五价砷,且砷更易于在菲律宾蛤仔肝胰腺中积累。菲律宾蛤仔组织中无机砷转化过程主要包括As(Ⅲ)氧化,As(Ⅴ)还原和甲基转化。在对照组和各暴露组有机砷砷甜菜碱(As B)和二甲基胂酸(dimethylarsinic acid,DMA)是主要赋存形态,一甲基胂酸(monomethylarsonic acid,MMA)在100μg/LAs(Ⅴ)暴露处理后含量显著下降,表明在无机砷的限速转化反应中MMA可以较快地代谢或转化为其他赋存形态。无机砷在菲律宾蛤仔鳃组织中主要转化为DMA,肝胰腺中主要转化为As B。以上研究结果为阐明菲律宾蛤仔的生物富集和转化机制提供了重要依据,同时也可为贝类安全养殖和食用提供一定理论依据。
- 陈丽竹王丹曹瑞文王清赵建民祝艳霞吴惠丰
- 关键词：菲律宾蛤仔砷
- 具槽帕拉藻代谢组提取方法的比较研究被引量：2
- 2015年
- 代谢组学技术已被广泛应用于环境科学、生物医学、营养学等众多研究领域。以海洋环境指示物种具槽帕拉藻(Paralia sulate)为研究对象,采用两种细胞破碎方式和三种溶剂系统对均一生物样本的代谢物进行提取,结合核磁共振(Nuclear magnetic resonance,NMR)波谱分析和主成分分析(Principal components analysis,PCA),对不同的代谢物提取系统进行了评估。结果表明:甲醇/水(1∶1)与匀浆相结合的方法具有高提取产率、高重现性、易操作和速度快等特性,是适合具槽帕拉藻代谢物提取的方法,可为后续代谢途径的研究提供参考。
- 于倩王清韩伟张倩吴惠丰赵建民
- 关键词：代谢组学NMR
- Cd^(2+)和Pb^(2+)单一与复合污染对脊尾白虾的急性毒性效应研究被引量：3
- 2017年
- 近年来,中国近岸重金属污染问题日趋严重。作者通过研究重金属Cd^(2+)和Pb^(2+)对脊尾白虾(Palaemon carincauda)的单一及复合急性毒性效应,为其养殖水质管理提供科学依据。本研究采用半静态急性毒性测定方法,开展了不同浓度Cd^(2+)和Pb^(2+)对脊尾白虾96 h内的急性毒性试验。研究结果表明:在单一污染物暴露下,Cd^(2+)对脊尾白虾24、48、72、96 h的半数致死质量浓度(LC50)分别为138.699、33.110、9.719、3.650 mg/L,Pb^(2+)对脊尾白虾48、72、96 h的LC50分别为254.541、62.750、29.074 mg/L;Cd^(2+)、Pb^(2+)对脊尾白虾96 h的安全质量浓度分别为0.365和2.907 mg/L;在等浓度配比(1︰1)暴露下,Cd^(2+)和Pb^(2+)复合污染对目标生物在48、72、96 h暴露期间的毒性相加指数(additive index,AI)分别为0.155、0.068、0.258。综上所述,Cd^(2+)对脊尾白虾的毒性较Pb^(2+)更强,Cd^(2+)和Pb^(2+)对脊尾白虾的复合污染均表现出较明显的协同作用。
- 谢嘉滕佳刘永亮杨顶珑曹瑞文陈丽竹王清李斐吉成龙吴惠丰丛明赵建民
- 关键词：PB2+急性毒性
- 菲律宾蛤仔(Venerupis philippinarum)Rho型GST和微粒体型GST的序列分析及表达特征研究被引量：1
- 2014年
- 谷胱甘肽硫转移酶是一类在细胞解毒和抗氧化过程中发挥重要作用的超家族酶系。采用cDNA末端快速扩增技术,从菲律宾蛤仔中克隆获得Rho型GST和微粒体型GST基因的全长序列(分别命名为VpGSTR和VpGSTMi)。序列分析显示,VpGSTR和VpGSTMi的cDNA全长分别为942bp和661bp,编码234和149个氨基酸。系统分析结果表明,菲律宾蛤仔GSTR与GSTMi在进化树上的位置与其分类所处的位置一致。荧光定量PCR结果发现,VpGSTR和VpGSTMi广泛分布于所检测组织中,且在肝胰腺组织中表达量最高。在鳗弧菌侵染后,VpGSTR和VpGSTMi基因表达量在24h内均表现出明显的上升趋势。上述结果表明,VpGSTR和VpGSTMi可能在菲律宾蛤仔抵御细菌侵染导致的氧化应激中发挥重要功能。
- 章盈盈袁泽轶王清李巧梅吴惠丰赵建民
- 关键词：谷胱甘肽硫转移酶菲律宾蛤仔
- 不同形态磷源对具槽帕拉藻(Paralia sulcata)生长和磷酸酶活性的影响被引量：8
- 2015年
- 分别采用磷酸二氢钾(KH2PO4)、β-甘油磷酸钠(Sodium-β-glycerophosphate,β-G-P)、葡萄糖-6-磷酸(Glucose-6-phosphate,G-6-P)、卵磷脂(Lecithin,LEC)和三磷酸腺苷二钠(Adenosine disodium triphosphate,ATP)作为f/2培养基的磷源,探讨了不同形态磷源对具槽帕拉藻(Paralia sulcata)生长及磷酸酶活性的影响。结果发现,具槽帕拉藻能够有效利用上述五种磷源,且溶解有机磷(Dissolved organic phosphorus,DOP)比KH2PO4更有利于具槽帕拉藻的生长;对碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AP)活性分析发现,大分子DOP(LEC)可能需要通过磷酸酶的水解作用才能被吸收利用。在胞外磷充足的情况下,具槽帕拉藻能够在胞内储存磷源,而在磷限制时则可利用胞内储存的磷源来维持藻细胞的生长。
- 于倩王清袁泽轶吴惠丰赵建民
- 关键词：碱性磷酸酶酸性磷酸酶
- As(Ⅲ)暴露对紫贻贝抗氧化酶活性和脂质过氧化的影响被引量：8
- 2013年
- 为探讨As(Ⅲ)对紫贻贝(Mytilus galloprovincialis)肝胰腺和鳃组织抗氧化能力的影响,测定了1、10、100μg/LAs(Ⅲ)暴露30天后,肝胰腺和鳃组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的活性变化以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化。结果发现:As(Ⅲ)暴露对紫贻贝肝胰腺CAT、SOD、GST活性以及GSH含量无显著影响,高浓度As(Ⅲ)暴露可诱导MDA含量的显著升高;对鳃组织而言,中等剂量暴露组CAT活性以及GSH含量较对照组水平极显著升高,高剂量As(Ⅲ)暴露组MDA含量较对照组也显著升高。研究结果表明,低浓度As(Ⅲ)长期暴露即可导致紫贻贝产生氧化胁迫,导致肝胰腺和鳃组织的脂质过氧化,且As(Ⅲ)对紫贻贝鳃组织的影响较肝胰腺组织更加显著。
- 李巧梅王清于倩吴惠丰由丽萍赵建民
- 关键词：三价砷抗氧化酶脂质过氧化紫贻贝
- 氨态氮对菲律宾蛤仔毒理机制研究的内参基因筛选被引量：5
- 2017年
- 为了准确和系统地分析NH_3-N对菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)毒性的分子机制,并对相关基因的转录组学数据进行验证,利用ge Norm和Normfinder这2种软件,以暴露30 d中不同时间点的鳃组织c DNA为模板,从18S r RNA(18S)、beta-actin(Actin)、beta-tubulin(Tubu)、elongation factor 1-alpha(EF1α)、cyclophilin A(Cy PA)、Ubiquitin(Ub)等6个备选管家基因中,筛选可以稳定表达的内参基因,作为转录组学分析的内参基因。以稀释50倍的鳃组织c DNA模板作为检测模板,ge Norm软件分析获得6对备选内参基因的表达稳定性依次为:EF1α>Cy PA>Actin>Tubu>Ub>18S,较优内参为EF1α和Cy PA;Norm Finder软件分析获得6对备选内参基因的表达稳定性为:EF1α>Actin>Tubu>Cy PA>Ub>18S,最优内参基因为EF1α。为了验证上述筛选结果,分别以EF1α和Cy PA作为内参基因研究unigene1的表达趋势,发现以EF1α为内参基因时,unigene1的q RT-PCR的表达趋势与其转录组表达倍数的变化趋势一致。因此确定NH_3-N暴露菲律宾蛤仔后,鳃组织中表达最为稳定的内参基因为EF1α。
- 曹滕飞丛明李兆艳赵建民吕家森李成华
- 关键词：菲律宾蛤仔内参基因
- BDE-47对人胚肾细胞HEK293的毒理效应及作用机制被引量：1
- 2015年
- 2,2’,4,4’-四溴联苯醚(BDE-47)是生物体中含量最高且毒性最强的PBDEs之一,有关BDE-47对肾细胞的毒性及其作用机制的研究仍有待补充。选取3个剂量组(低:10-6mol·L-1、中:10-5mol·L-1、高:10-4mol·L-1)及溶剂对照组,研究了BDE-47对人胚肾细胞(HEK293)的细胞凋亡率及活性氧(ROS)水平的影响;并从分子水平对细胞氧化损伤、凋亡相关蛋白(APE1及p53)及凋亡相关基因m RNA(p53、Bax、Caspase 3、Caspase 8)的表达量进行测定。实验结果显示:与对照组相比,中、高剂量组细胞凋亡率显著增加(P<0.05);ROS水平在中剂量组显著上升(P<0.01);随BDE-47浓度的变化,APE1蛋白表达量与细胞ROS水平存在一致性;p53、Bax、Caspase 8 m RNA表达量与BDE-47的浓度间存在剂量-效应关系。结果表明,BDE-47可诱导HEK293细胞凋亡及氧化应激,APE1可能是细胞ROS升高与细胞凋亡间重要的中介因子;BDE-47可以通过影响Caspase 8及线粒体途径中p53及Bax的表达诱导细胞凋亡。
- 曹璐璐李斐吴惠丰赵建民
- 关键词：人胚肾细胞BAX
