刘怡
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
- 供职机构:扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目江苏省科技支撑计划项目江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种检测传染性喉气管炎病毒的夹心ELISA方法的建立被引量:2
- 2017年
- 通过将传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白g D基因78~600 nt抗原编码区在大肠杆菌中进行高效可溶性表达,以重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株特异性单克隆抗体4D6和7D9,经亚类鉴定均为IgG1,轻链为κ链。经交叉配对试验,建立了以7D9为捕获抗体,以HRP偶联7D9(HRP-7D9)作为检测抗体的ILTV抗原检测夹心ELISA方法。经测定,该方法具有良好的特异性和敏感性,对ILTV抗原的最低检测限为10~2TCID_(50)/m L。应用该方法对40份临床样品进行双盲测试,以PCR方法同步检测进行对照,结果显示两种方法之间的符合率为87.5%。
- 张小荣张林刘怡黄海琼吴艳涛
- 关键词:传染性喉气管炎病毒单克隆抗体夹心ELISA
- 基于马立克病毒的传染性喉气管炎病毒载体疫苗研制被引量:3
- 2017年
- 以表达EGFP报告基因的重组I型马立克病毒疫苗株(CVI988/Rispens)rMDV-EGFP为母本病毒,通过同源重组的方法用表达传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB和gD基因的表达盒替换病毒rMDV-EGFP中的EGFP报告基因表达盒,分别获得了表达gB和gD基因的重组马立克病毒rMDV-ILTgB和rMDV-ILTgD。经PCR和间接免疫荧光试验鉴定,证明重组病毒中插入的目的基因大小正确,且能够表达gB和gD目的蛋白。免疫效力试验结果表明:与弱毒疫苗相比,重组病毒rMDV-ILTgB和rMDV-ILTgD均可对ILTV强毒攻击提供更好的免疫保护。重组病毒免疫组试验鸡不仅在发病率、致死率和攻毒后体重增长等指标方面与攻毒对照组均存在显著差异,而且与常规弱毒疫苗免疫组在致死率和攻毒后体重增长指标方面也存在显著差异。
- 张小荣刘怡黄海琼蒙杰蒋叶林吴艳涛
- 关键词:鸡传染性喉气管炎病毒GB基因GD基因免疫效力