王曰文 作品数:11 被引量:19 H指数:2 供职机构: 聊城大学 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
Fe^(2+)对雄性泥鳅生殖毒性的研究 被引量:4 2011年 以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)精子为受试材料,应用计算机辅助精子分析(CASA)系统,研究了亚铁离子(Fe2+)对雄性泥鳅的生殖毒性。在预实验的基础上,设置30、60和300μmol/L 3个Fe2+浓度梯度。泥鳅精子暴露0、0.5、1.0、2.0和4.0h后激活,测定运动百分数、时间和速度等精子运动参数。结果表明,60mol/L的Fe2+溶液明显影响泥鳅的精子运动时间和相对速度(P<0.05)。高浓度的Fe2+能够抑制泥鳅精子运动,对泥鳅具有潜在生殖毒性作用。 陈玉明 陈杰 王曰文 胡家会 陈凤梅关键词:泥鳅 精子运动 生殖毒性 拟南芥甲基结合蛋白基因AtMBP11启动子在种子形成和萌发中的功能鉴定 2012年 为研究拟南芥甲基结合蛋白基因AtMBP11在种子形成和萌发过程中的调控模式,克隆拟南芥AtMBP11启动子,将其替换植物表达载体pBI121的35S启动子序列,转入拟南芥基因组中。转基因拟南芥后代卡那霉素抗性发生分离,选取具有3 1分离比的后代自交,产生纯合的具有单拷贝插入的后代。转基因后代GUS染色结果表明,新克隆的MBP启动子控制基因在种子、花药和花粉中高效表达。通过对AtMBP11核心启动子缺失分析表明,G-box元件是主要功能元件。 冀芦沙 于守超 赵燕 肖庆振 王曰文关键词:拟南芥 启动子 CdCl_2对泥鳅精子运动的影响 被引量:2 2012年 以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)的精子为实验材料,在预实验的基础上,用浓度分别为0、50、100、200、400和800μmol/L的CdCl2精子保存液孵育(4℃)泥鳅精子0、2、4、6和8 h后,在显微镜下分别用含有相应浓度CdCl2的激活液激活(25℃),立即观察泥鳅精子的激活率、运动率、运动时间和运动速度。实验显示,CdCl2影响泥鳅精子的运动能力,呈现出明显的浓度和时间依赖性,CdCl2对泥鳅的受精可能具有抑制作用。 王曰文 陈杰 陈玉明 陈凤梅 胡家会关键词:CDCL2 精子运动 Expression and Purification of Arabidopsis High Mobility Group B Protein Gene At2G34450 in Pichia pastoris 2012年 [Objective] The aim was to study the expression of Arabidopsis gene A/2G34450 in Pichia pastoris and to obtain recombinant Arabidopsis HMGB protein. [Method] The At2G34450 gene was cloned into yeast expression vector pPIC9K containing AOXl promoter and the sequences of secreting α-signal peptides. Recombinant plasmid was linearized by Sal l and transformed into P. pastoris GSl15 competent cells by electroporation. Positive integrated clones were screened out, and the At2G34450 protein was expressed under the induction of methanol. [Result] The At2G34450 protein was expressed in yeast medium through methanol induction. SDS-PAGE results showed that recombination product was At2G34450 protein. [Conclusion] At2G34450 protein was successfully expressed in the P. pastoris system for the first time, which paves a direct path to further research on the functions of HMGB family members. 冀芦沙 肖庆振 王曰文 王洪霞关键词:ARABIDOPSIS Cu^(2+)对泥鳅精子运动的影响 被引量:2 2011年 以泥鳅精子为受试材料,应用计算机辅助精子分析(CASA),研究不同浓度Cu2+暴露对运动型精子和静止型精子的毒性。结果显示,运动型精子和静止型精子暴露在10μM的Cu2+中,两者运动能力均受到明显抑制;在30μM及以下浓度中运动型精子受影响程度较静止型精子大,而在更高浓度中出现相反结果。表明泥鳅精子对Cu2+毒性较敏感,不同能量代谢状态时其敏感性不同;Cu2+对泥鳅精子运动能力有较大影响,对淡水鱼具有潜在生殖毒性。 陈玉明 胡家会 陈杰 王曰文关键词:CU2+ 泥鳅 精子运动 毒性 硫酸铜对泥鳅精子活力的影响 被引量:2 2011年 以泥鳅精子为受试材料,应用计算机辅助精子分析系统,研究硫酸铜(0.1、1、10 mg/L)对泥鳅的精子活力的影响。结果表明,在0 h试验组,0.1 mg/L的硫酸铜明显降低泥鳅精子运动速度,1 mg/L的硫酸铜对运动时间和速度产生显著抑制作用,10 mg/L的硫酸铜对运动百分数、运动时间和速度都产生明显影响(P<0.05);泥鳅精子在硫酸铜中暴露2 h后,各运动参数均明显下降;硫酸铜对泥鳅精子运动能力的影响具有浓度和时间依赖性。表明硫酸铜对泥鳅精子运动具有抑制作用,对泥鳅具有潜在的生殖毒性。 陈玉明 陈杰 王曰文 陈凤梅 胡家会关键词:硫酸铜 精子活力 泥鳅 HgCl_2对泥鳅精子运动的影响 2012年 为了检测不同浓度的HgCl2对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus精子运动的影响,以泥鳅精子为实验材料,用含终浓度分别为0(对照)、1、5、10、15和20μmol/L的HgCl2待测液分别孵育0、2、4和6h后激活,激活后立即在显微镜(OlympusIX81)下观察精子运动参数。为进一步探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的机制,用终浓度为20μmol/L的HgCl2保存液孵育泥鳅精子10min,以含终浓度分别为0、0.1、1、10mmol/L的2-巯基乙醇和20μmol/LHgCl2混合液为激活液激活。激活后立即在显微镜下观察精子运动,发现2-巯基乙醇可逆转HgCl2对泥鳅精子的抑制作用,为探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的可能机制提供参考。 陈杰 胡家会 陈玉明 王曰文 陈凤梅关键词:泥鳅 精子运动 2-巯基乙醇 逆转作用 一种大量获得干净、无损伤受精卵的方法 本发明公开的是一种大量获得无损伤受精卵的方法,其步骤包括准备培养缸,准备实验用鱼,采集受精卵。对培养皿中的受精卵进行记数,并放入设置好的不同环境中进行培养观察研究。本方法获得的受精卵无损伤,数量大,能够满足实验和养殖要求... 胡家会 陈凤梅 陈杰 王曰文文献传递 拟南芥高迁移率族蛋白B族基因表达模式分析 被引量:2 2012年 为了解高迁移率族蛋白B族(HMGB)基因在拟南芥中的表达模式及作用方式,该研究克隆了拟南芥中5个编码HMGB的基因:AtHMGB1、AtHMGB2、AtHMGB3、AtHMGB4、AtHMGB5,并运用荧光实时定量PCR方法检测野生型拟南芥中以上5种基因在不同器官中的表达及在外源植物激素(ABA、2,4-D)处理前后的表达差异,选取AtHMGB2、AtHMGB4和AtHMGB5分别转化拟南芥并筛选出超表达株系,随即检测ABA诱导下超表达AtHMGB的转基因拟南芥的表型。研究证实:在野生型拟南芥中AtHMGB2在拟南芥各个器官中的表达量远高于其它家族成员,AtHMGB4和AtHMGB5在花、果荚和根中的表达略高于茎和叶;在ABA处理前后AtHMGB家族成员的表达水平有显著差异,其中AtHMGB2的表达被ABA显著负调控;ABA诱导下超表达AtHMGB2的转基因拟南芥与野生型相比出现萌发及生长迟缓现象,但超表达AtHMGB4与AtHMGB5的转基因拟南芥在ABA诱导下的种子萌发和幼苗生长与野生型相比差异不大。研究发现,AtHMGB家族成员在转录水平上响应ABA的方式各有不同,对理解AtHMGB家族成员的生物学功能提供了新的基础。 冀芦沙 于守超 赵燕 王曰文 王洪霞关键词:拟南芥 高迁移率族蛋白 温度对玫瑰无须鲃胚胎发育的影响 被引量:9 2013年 为了探索温度对玫瑰无须鲃(Puntius conchonius)胚胎发育的影响,将玫瑰无须鲃的受精卵置于不同温度培养容器中进行孵化观察。结果显示,在温度为18~32℃的环境条件下,玫瑰无须鲃的胚胎均能孵化,最适孵化温度范围为24~28℃。如果温度高于32℃或低于18℃时,玫瑰无须鲃的胚胎不能孵出仔鱼。在温度为34℃时,胚胎发育到原肠胚晚期全部死亡,温度为16℃时,胚胎发育停止于神经胚期,孵化时间随温度的升高而缩短,呈幂函数相关。玫瑰无须鲃胚胎发育的生物学零度为12.35℃,有效积温为419.40℃.h。 陈凤梅 胡家会 王曰文 陈杰关键词:胚胎发育 温度 孵化率 有效积温