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红系特异元件调控的GFP报道基因在不同转基因小鼠中表达行为的研究: 为了研究红系特异元件HS2或HS3及?珠蛋白基因启动子指导的GFP报道基因在不同转基因小鼠体内的表达行为,我们将本所先前研究中已经获得的带有人红系特异调控元件HS2及?珠蛋白启动子、GFP报道基因的原代转基因小鼠(命名为...; 颜景斌肖艳萍陈美珏王舒任兆瑞曾溢滔; 文献传递

用慢病毒载体介导产生绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠被引量：35: 2006年; 以慢病毒(lentivirus)载体为骨架,携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的假病毒,通过小鼠受精卵卵周隙注射,将其感染小鼠受精卵,经移植于假孕母鼠后获得转基因小鼠．应用PCR、荧光显微镜观察和流式细胞仪分析等技术,证明了GFP基因的整合率达到40％以上;实时定量PCR 分析结果表明转基因小鼠中GFP基因整合的拷贝数约为40;染色体荧光原位杂交分析结果显示 GFP基因在小鼠染色体上的整合是随机的,并通过交配可将外源基因遗传至子代,获得的多整合位点和不同表达水平的转基因小鼠具有明显的实际应用和研究价值．文中报道的慢病毒载体介导的转基因技术为高效制备和选育高表达转基因小鼠品系提供了一种有效的途径．; 张敬之郭歆冰谢书阳朱怡文黄英王舒任兆瑞; 关键词：慢病毒载体转基因小鼠 GFP

转基因胎儿细胞在母鼠外周血中存在情况的分析: 产前基因诊断是控制遗传病发生的一项重要措施,用于诊断的胎儿细胞主要通过羊水、绒毛细胞中分离得到,但这种途径可能对孕妇和胎儿造成一定的损伤.Walknowska等在1969年首次证实母体外周血中存在胎儿细胞,它们可以作为产...; 颜景斌王舒巩芷娟黄淑帧; 关键词：转基因胎儿细胞外周血; 文献传递

上市公司股权集中度对股价波动性的影响: 本文以大股东公司治理理论为基础,分析了上市公司股权集中度对股价波动性的影响,并利用A股上市公司2013-2017年20个季度的数据进行实证检验。结果表明,第一大股东及其一致行动人的持股比例在10%-50%之间时,股权集中...; 王舒; 关键词：股价波动性股权集中度一致行动人; 文献传递

基于深度测序的正常核型急性髓细胞白血病分子分型研究: 急性髓细胞白血病是一种具有高度异质性且发病快、临床表现复杂、治疗预后差异大的血液肿瘤。急性髓细胞白血病通常伴有特征性的细胞遗传学异常和分子生物学异常,这不仅表明急性髓细胞白血病有着不同的发病机制,也说明根据这些细胞遗传学...; 王舒; 关键词：急性髓细胞白血病基因突变

应用荧光原位杂交分析移植山羊体内的人源细胞被引量：2: 2003年; 目的应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析人造血干细胞(human hematopoietiestem cell,hHSC)经宫内移植至山羊体内后人源细胞的存在、比例及其动态变化。方法用人特异17号染色体卫星DNA探针对13头移植山羊进行间期FISH(interphase FISH,IFISH)分析,并用人男性特异Y染色体卫星DNA探针对其中2头移值人男性HSC的山羊进行IFISH分析。标本采用外周血细胞滴片、骨髓涂片和肝脏组织印片。结果在13头移植山羊中,11头山羊体内有人源细胞存在,其中2头为人男性细胞,证实这些山羊为人/山羊异种移植嵌合体;人源细胞比例随山羊月龄递减,最长已存活21个月;所检测月龄段的移植山羊外周血、骨髓和肝脏组织中人源细胞比例小于1‰,但其中2头山羊肝脏组织中人源细胞集中一处,局部比例高达207.92‰和392.41‰。结论 FISH检测出人源细胞能在山羊体内存在并长期存活,表明山羊是经宫内移植hHSC的合适受体;人源细胞在外周血和骨髓中比例低,而在肝脏组织局部比例高,提示山羊肝脏组织局部内环境适于人源细胞存活、增殖和分化。; 肖艳萍陈美珏盛敏巩芷娟王舒黄淑帧; 关键词：荧光原位杂交山羊

鼠外周血中转基因胎儿细胞的检测及意义: 2005年; 目的探讨仔鼠出生前后小鼠胎儿细胞在母鼠体内存在的情况,为应用循环于母血中的胎儿细胞进行基因诊断提供科学依据。方法将非转基因的正常母鼠和以HS2、HS3元件、β珠蛋白基因启动子指导的红系特异表达绿色荧光蛋白(GFP)基因的转基因公鼠交配,仔鼠出生前后采集母鼠的外周血用流式细胞仪检测其中表达GFP细胞的比例,并用PCR对母鼠和仔鼠的鼠尾DNA及母鼠的外周血进行检测。结果在仔鼠出生前母体外周血中未检出表达GFP的细胞,而分娩后1～3周此类细胞含量达到峰值,4～5周后将逐步消失。PCR检测证实母鼠体内没有外源GFP基因的DNA片断,但分娩后其外周血中则存在GFP基因阳性片断,这与荧光激活细胞分选仪(FACS)的检测结果一致。结论转基因细胞是一种良好的标记物,可以用来观察胎儿细胞在母体中存在的规律,为使用母体外周血进行基因诊断提供了依据。; 颜景斌王舒巩芷娟黄淑帧; 关键词：外周血胎儿细胞仔鼠转基因细胞

外源基因在转基因小鼠中整合状况的分析被引量：1: 2006年; 目的研究外源基因在转基因小鼠及其家系中的整合状况。方法采用PCR、定量PCR和荧光原位杂交(FISH)的方法对原代转基因小鼠中外源人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因的整合和嵌合情况进行分析。使用PCR、直接测序法鉴定整合的外源基因多拷贝的连接方向和连接方式。结果7个家系中F0-8、F0-10和F0-11的后代中阳性个体比例明显低于50%,3个原代小鼠DNA中hFⅨ基因拷贝数分别只有子代中的66.2%、18.8%和28.3%。F0-11小鼠各脏器中嵌合比差异极大,且未见胚系特异性分布。不同个体间整合拷贝数差异极大,最少的F0-69为单拷贝,最多的F0-10有43个拷贝。而整合位点分析发现外源基因在随机分布中仍呈现一定的趋向性。PCR和测序结果证明所有小鼠中外源基因多拷贝均为头尾连接,连接的机制以粘性末端介导的连接为主,F0-13中还存在同源序列配对、断裂、修复介导的头尾连接。结论在整合有hFⅨ基因的转基因小鼠中多拷贝外源基因多以粘性末端介导的头尾连接方式整合在染色体的某些特定区域。; 颜景斌朱怡文肖艳萍王舒任兆瑞黄淑帧曾溢滔; 关键词：转基因小鼠外源基因拷贝数嵌合体

人-珠蛋白位点控制区HS-2、HS-3元件指导的绿色荧光蛋白基因在转基因小鼠家系中的表达研究: DNase I敏感位点HS-2和HS-3是人口-珠蛋白位点控制区(LCR)中最重要的两个元件,两者在调控口-珠蛋白基因时空表达中起着关键性的作用,同时也是研究基因表达调控的好材料。本研究将我所已有的分别整合有口．珠蛋白基...; 颜景斌王舒肖艳萍贾春平; 文献传递

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王舒