叶青
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
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- 抗蓝载体单克隆抗体的制备及特性鉴定
- 2007年
- 目的制备抗蓝载体(blue carrier,BC)单克隆抗体(mAb),为相关研究提供支持与工具。方法用人工合成肽与蓝载体交联后免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及Dot-ELISA方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到1株可稳定分泌抗蓝载体单克隆抗体的杂交瘤细胞5B5,腹水效价2×10-6,单抗亚类为IgG1,抗体亲和力为7.8×108。Dot-ELISA结果显示,在相同条件下5B5mAb只与蓝载体特异性结合,与钥孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等载体蛋白不发生交叉反应。结论获得1株能特异性识别蓝载体蛋白的mAb,为评价短肽及半抗原交联免疫效果、某些疾病诊断及治疗方法疗效提供了工具。
- 叶青刘艳君朱平富宁
- 关键词:单克隆抗体
- 海藻糖封闭液在ELISA体系中的应用被引量:1
- 2007年
- 目的探索海藻糖(trehalose)作为封闭液用于酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验系统的可行性。方法在不同的抗原抗体反应体系采用不同浓度的海藻糖作为封闭液,对直接、间接及双抗体夹心ELISA敏感性与检测本底的影响。结果在一定的封闭时间里,不同浓度的海藻糖封闭液均可以在不影响ELISA反应体系敏感性的前提下增强对于非特异性吸附的抑制,封闭效果明显优于或等同于其他传统封闭液以及二糖类封闭液;结论海藻糖能够作为封闭液用于ELISA,并有望替代部分ELISA体系中的传统封闭液。
- 郑健叶青朱平富宁
- 关键词:海藻糖ELISA
- 非B细胞来源IgκV区保守序列特异性抗体的制备及鉴定
- 免疫球蛋白(Ig)是重要的免疫分子,其两种存在方式分别为:膜型和分泌型,前者作为B淋巴细胞表面的抗原受体在抗原识别、细胞的活化、分化甚至程序性细胞死亡中起重要作用;后者主要存在与血液及其它体液中的,能够与相应抗原相结合发...
- 叶青
- 关键词:特异性抗体免疫分子合成肽
- 文献传递
- 海藻糖在不同的抗原-抗体反应体系中的应用被引量:1
- 2007年
- 目的比较海藻糖(trehalose)以及其他封闭液在多种抗原抗体反应体系中以及膜基质反应体系中应用的可行性,并观察海藻糖对预包被板抗原、抗体稳定性的保护作用。方法采用间接、双抗体夹心ELISA、Dot-ELISA和Western Blot观察海藻糖作为封闭剂的作用,特别是对糖结合抗原抗体反应体系敏感性与检测本底的影响。结果在一定的时间内,不同浓度的海藻糖封闭液均可以在不影响各反应体系敏感性的前提下,抑制Dot-ELISA和Western Blot体系中的非特异性吸附,封闭效果明显优于其他二糖封闭液与部分传统封闭液;并可有效封闭糖结合抗原的抗体反应;更重要的是,海藻糖封闭液可在20天内有效保护37℃以上高温环境中预包被板蛋白的活性。结论海藻糖能够作为封闭液,应用于糖结合抗原抗体反应体系、部分以PVDF膜为基质的抗原抗体反应体系,并可以在一定时间内保护高温条件下预包被板抗原、抗体的稳定性。
- 郑健左大明叶青富宁
- 关键词:海藻糖抗原抗体反应稳定性