彭丽娟
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密黏附素与受体的研究进展被引量：2
- 2008年
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7能引起出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征、血小板减少性紫癜等。大肠杆菌O157∶H7的主要毒力因子紧密黏附素由其毒力岛LEE岛上的eae基因编码,C末端的280个氨基酸是受体结合位点。目前发现紧密黏附素受体有紧密黏附素转位受体(Tir)、核仁素和β1整合素。紧密黏附素主要与受体Tir结合,通过Ⅲ型分泌系统转位到宿主细胞,在Tir-细胞骨架偶联蛋白(Tccp)的参与下,与N-Wiskott aldrich综合征蛋白、肌动蛋白-相关蛋白2/3相互作用产生信号级联放大,导致宿主大肠黏膜上产生黏附-抹去损伤。
- 彭丽娟万成松
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7核仁素Β1整合素
- 肠出血性大肠杆菌O157P:H7紧密黏附素的基因克隆、表达及功能研究被引量：4
- 2009年
- 目的获得高纯度的eae基因表达蛋白紧密黏附素(Intimin),研究其黏附作用。方法从肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7全基因组中扩增出eae基因,T-A克隆后,将eae插入载体pET28a(+),并转化至E.coli BL21(DE3)中表达;用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出重组蛋白;SDS-PAGE检测目的蛋白相对分子质量,免疫印记分析其免疫反应性,免疫荧光检测其黏附性。结果获得了大小约2805bp的eae片段;构建了重组载体pET28a(+)-eae,并在E.coli BL21(DE3)中以包涵体形式表达Intimin,Mr约97000;Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出Intimin;大肠杆菌O157:H7多抗血清在Mr约97000处检测出一条特异性Intimin带;Intimin可黏附在HEp-2细胞表面。结论高纯度的重组蛋白Intimin具有一定的免疫反应性,能与HEp-2细胞黏附,为进一步研究Intimin蛋白与宿主受体蛋白的相互作用奠定基础。
- 彭丽娟周勇杨瑜惠长野赵卫万成松
- 关键词：肠出血性大肠杆菌0157:H7EAE基因克隆免疫印记
- 肠出血性大肠埃希菌O157:H7紧密黏附素的基因克隆、表达及功能初步研究
- 一、研究背景和目的
肠出血性大肠埃希菌/(Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC/)O157:H7是一种新现肠道致病菌,能引起人出血性肠炎/(Hemorrhagic colitis,HC...
- 彭丽娟
- 关键词：基因克隆免疫印记
- 文献传递
- 大肠杆菌O157:H7 IntC300 B细胞抗原表位的综合预测被引量：1
- 2008年
- 目的预测肠出血型大肠杆菌O157∶H7 IntiminC端300氨基酸片段(IntC300)的B细胞抗原表位。方法采用计算机软件和网络服务器分析IntC300的亲水性、β-转角、柔韧性、表面可及性和抗原指数,判断其B细胞抗原表位。结果B细胞抗原表位可能在20-36、76-88、189-198、262-279和284-296残基或其附近。结论对EHEC O157∶H7 IntC300 B细胞抗原表位的综合预测,为研究诊断性单克隆抗体及多肽疫苗提供了理论工具。
- 周勇吴仲鑫彭丽娟万成松
- 关键词：抗原表位
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7的紧密黏附素基因eae的测序及生物信息学分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆编码肠出血型大肠杆菌O157∶H7的紧密黏附素eae基因,并对其进行测序及生物信息学分析,为研究EHEC与宿主细胞相互作用奠定基础。方法利用PCR技术扩增eae基因,经过纯化,将其定向插入克隆载体PMD19-Tsimplevector并进行测序,应用生物信息学软件分析其生物学特性。结果用PCR方法扩增eae基因,大小为2802bp,编码934个氨基酸,用DNAstar5.0软件分析紧密黏附素(Intimin)蛋白的生物活性,在202～210、510～520、716～735个氨基酸残基的肽链上,显示该蛋白具有良好的亲水性,在175～220、300～315、550～610、710～780、825～880个氨基酸残基的肽链上具有良好的柔韧性,在220～300、615～710个氨基酸残基的肽链上,显示该蛋白具有良好的抗原性。结论本研究用PCR法扩增出了O157∶H7的eae基因,成功构建了肠出血性大肠杆菌O157∶H7紧密黏附素eae基因的重组质粒,并分析了黏附素蛋白的亲水性、柔韧性、抗原性,为进一步研究大肠杆菌O157∶H7黏附素的致病机制奠定了基础,为下一步表达出Intimin蛋白,进一步研究该蛋白与宿主细胞的粘附、免疫原性、抗原抗体反应提供了理论依据。
- 吴仲鑫周勇贡树基彭丽娟仲华万成松
- 关键词：大肠杆菌O157:H7克隆生物信息学分析
