王春晖
- 作品数：29 被引量：81H指数：5
- 供职机构：惠州市中心人民医院更多>>
- 发文基金：惠州市科技计划项目广东省社会发展领域科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大肠杆菌0157(:)H7EspF蛋白诱导细胞凋亡的研究
- 本文采用重叠延伸PCR技术将EHEC 0157：H7毒力岛LEE上的espF基因N端核苷酸序列缺失，克隆到自杀质粒pCVD442，通过转化、转移、同源重组、抗性筛选、PCR和测序鉴定，构建EHEC 0157：H7 esp...
- 周莹王春晖张其威万成松
- 关键词：大肠杆菌蛋白表达细胞凋亡基因缺失
- 文献传递
- 首发冠心病患者的颈围与血脂谱相关性分析被引量：2
- 2015年
- 目的通过分析首发冠心病患者的颈围和血脂谱,探讨血脂谱、颈围与冠心病发病及病变程度的相关性。方法选取2013年1月至2014年12月期间在惠州市中心人民医院经冠状动脉造影确诊的冠心病患者367例作为观察组,以同期体检健康的志愿者310例作为对照组,测量颈围,同时用全自动生化分析仪进行血脂及载脂蛋白分析。颈围与血脂谱相关性采用Pearson相关分析,采用Logistic回归分析冠心病的危险因素。结果 1总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(Apo B)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、TC/HDL-C、Apo B/Apo AⅠ和颈围等指标在观察组明显高于对照组,观察组的Apo AⅠ低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);2除Apo B外,观察组中的血脂谱和颈围在不同的Gensini积分分组的组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3颈围与TC、LDL-C、Apo B、TC/HDL-C、Apo B/Apo AⅠ、non-HDL-C呈正相关,与HDL-C、Apo AⅠ呈负相关(P<0.05)。4 Logistic分析显示,颈围、LDL-C为冠心病事件发生的独立危险因素(OR=1.128,95%CI:1.075,1.185;OR=2.872,95%CI:2.182,3.781)。结论颈围与血脂谱联合检测可作为预测冠心病事件发生及病变程度的简单、廉价、实用的方法。
- 廖惠贞刘志云王春晖张碧琼
- 关键词：血脂谱颈围冠心病
- 不同年龄段儿童急性呼吸道病原体感染情况分析被引量：2
- 2019年
- 目的:了解不同年龄段儿童急性呼吸道病原体感染情况,为感染防控和临床治疗提供依据。方法:818例住院患儿按年龄分为婴儿、幼儿、学龄前期、学龄期4组,采用荧光定量PCR法对收集的样本进行呼吸道感染病原体检测。结果:各年龄组患儿中以学龄前组和幼儿组的病原体总阳性率最高(57.1%和56.3%),婴儿组最低为39.8%(P<0.01)。病原体检出阳性率以肺炎支原体最高(34.5%),其次为副流感病毒(19.8%)和呼吸道合胞病毒(11.6%)。肺炎支原体感染中学龄前组的阳性率最高为43.3%,婴儿组阳性率最低为12.3%(P<0.01)。呼吸道合胞病毒感染中婴儿组的阳性率最高为19.9%,学龄组阳性率最低为6.6%(P<0.01),其余病原体感染均无年龄差异。180例标本检出2种或2种以上病原体,合并感染率为22.0%(180/818)。除肺炎衣原体外,其他病原体合并感染率均大于其单一感染率。结论:不同年龄段患儿呼吸道病原体感染程度和种类各异,多种病原体合并感染较常见,提示疾病严重程度与年龄、合并感染有一定相关性。
- 王春晖廖惠贞李旭艳曹碧红
- 关键词：儿童呼吸道病原体荧光定量PCR法
- 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体的制备和初步纯化
- 2012年
- 目的制备肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7EspF蛋白多克隆抗体并初步纯化。方法生物信息学方法分析EHECO157:H7EspF蛋白的柔韧性、亲水性、表面可能性及抗原表位,选取1条由15个氨基酸残基组成的多肽为半抗原,在其C端偶联钥孔血蓝蛋白(KLH),免疫新西兰大白兔制备抗血清。ELISA测定抗血清效价,免疫印迹法鉴定其特异性,辛酸-硫酸铵法初步纯化抗血清,SDS-PAGE检测抗体纯度。结果选择EspF蛋白抗原指数最高的肽段72-TPSRPAPPPPTSGQA-86(0.506)为半抗原,合成抗原多肽经高效液相色谱鉴定,纯度为95.78%,经质谱分析其分子量为1563.76Mr,与目的多肽分子量一致;加强免疫3次后,EHECO157:H7EspF蛋白的抗血清效价达1:2048000;该血清对EHECO157:H7野生株和espF突变株(△espF)的EspF蛋白均有特异性,并经辛酸-硫酸铵法获得一定纯度的抗体。结论成功地制备了效价高、特异性强的EHECO157:H7EspF蛋白多克隆抗体。
- 周莹赵素慧韦耀王春晖张其威万成松
- 关键词：O157:H7多克隆抗体
- 2例罕见地中海贫血家系分析及产前诊断被引量：5
- 2018年
- 目的对2例罕见地中海贫血(地贫)家系进行分析及产前诊断。方法采集家系成员外周血进行血细胞分析及毛细管电泳血红蛋白分析;采集外周血及羊水,用导流杂交法进行常规α和β地中海贫血基因检测;采用多重链接探针扩增技术(MLPA)、DNA测序、缺口PCR(Gap-PCR)技术及血红蛋白持续增多症缺失型电泳等技术分析其罕见基因型。结果在2个家系中检测到1例罕见的越南型缺失β地中海贫血及1例东南亚缺失型α地贫复合α2基因CD124点突变;并对2个家系进行了产前诊断,检测到1个胎儿为越南型缺失β地中海贫血,另一个为东南亚缺失型α地贫。结论当血液学表型与基因型不符时,应进一步做罕见基因型的检测以避免漏诊或误诊,特别是生育过重型地贫患儿的夫妇。这有助于指导临床诊断、人群筛查和遗传咨询。
- 朱晓洁刘露刘瑞玉李旭艳曾宏曹碧红王春晖曾文冰
- 关键词：地中海贫血产前诊断
- 肠出血性大肠埃希菌O157:H7菌株的细胞毒性比较
- 2012年
- 目的比较肠出血性大肠埃希菌流行菌株的细胞毒性,筛选强毒株,为进一步研究细菌的致病机理提供理论依据。方法采用PCR技术鉴定菌株的毒力基因E-hlyA、stx2、stx1,Giemsa染色观察细菌的黏附情况,通过测定感染后Vero细胞的乳酸脱氢酶释放情况了解细菌的Vero细胞毒性强弱。结果肠出血性大肠埃希菌O157:H7菌株含有的毒力基因不同,均具有较强的黏附能力和Vero细胞毒性,其中国际菌株933W/O,中国流行菌株882364、01H112和日本菌株Cua9的Vero细胞毒性较强。结论筛选出的流行菌株强毒株,可用于进一步的细菌感染模型构建和毒力基因致病机制研究。
- 王春晖赵素慧万成松
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌乳酸脱氢酶
- 感染性疾病实验室诊断方法的Logistic回归分析被引量：13
- 2016年
- 目的建立Logistic回归模型,探讨检测C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)及降钙素原(PCT)在感染性疾病鉴别中的诊断价值。方法选取230例病毒感染者、245例细菌感染者和200例健康对照者,采用单因素及多因素分析方法对实验室检测结果进行比较分析,建立感染性疾病诊断方法的Logistic回归模型并绘制ROC曲线。结果感染组与对照组的CRP、SAA、PCT、白细胞计数(WBC)及SAA/CRP差异均有统计学意义(P<0.05)。细菌感染组CRP、SAA、PCT、WBC及中性粒细胞百分比(NEU%)水平明显高于病毒感染组和对照组,而病毒感染组血清淋巴细胞百分比(LY%)及SAA/CRP又明显高于细菌感染组(P<0.01)。细菌感染组筛选了4项指标进入Logistic回归模型:CRP、SAA、PCT及WBC,其中CRP、SAA和PCT的ROC曲线下面积均超过了0.900;病毒感染组仅SAA与WBC进入Logistic回归模型,其中SAA的ROC曲线下面积为0.859。结论以实验诊断技术建立的Logistic回归模型有利于临床早期鉴别诊断感染性疾病,尤以联合检测SAA和CRP或PCT更有意义。
- 王春晖刘露吴学朕廖惠贞
- 关键词：感染性疾病血清淀粉样蛋白A降钙素原LOGISTIC回归
- 肠出血型大肠埃希菌O157∶H7 EspF蛋白诱导细胞凋亡的研究
- 周莹王春晖张其威万成松
- 胰腺癌患者血浆miR-744表达及临床意义被引量：2
- 2016年
- 目的探讨胰腺癌患者血浆中mi R-744表达水平与临床特征的关系及其作为胰腺癌肿瘤标志物的可行性。方法采用实时荧光定量PCR检测50例胰腺癌患者、50例慢性胰腺炎患者及50名健康对照组中血浆mi R-744的表达水平,分析mi R-744与胰腺癌临床特征间的关系。并绘制ROC曲线,以判定血浆mi R-744是否能作为胰腺癌早期诊断的标志物。结果 mi R-744在胰腺癌患者血浆中的相对表达量显著高于慢性胰腺炎患者（12.5±6.3 vs1.4±2.6,P〈0.01）及正常对照组（12.5±6.3 vs 1.0±1.7,P〈0.01）,胰腺癌患者血浆mi R-744水平与肿瘤TNM分期等临床特征无显著相关性。ROC曲线分析显示,血浆mi R-744水平可有效地从胰腺癌患者、慢性胰腺炎患者和健康对照组中诊断出胰腺癌患者（AUC=0.8,95%CI：0.7~0.8）,敏感性和特异性分别为80.1%和62.2%。mi R-744、CA199、CEA联合诊断（AUC=0.9,95%CI：0.7~0.8）敏感性和特异性分别为83.4%和93.3%。结论胰腺癌患者血浆中mi R-744表达明显上调,表明mi R-744有望成为胰腺癌早期诊断标志物。
- 吴学朕刘露王春晖罗程
- 关键词：胰腺癌肿瘤标志物
- 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 espF基因缺陷突变株的构建及其特性初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的为研究肠出血性大肠埃希菌O157∶H7效应分子EspF功能,构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,并对其生物学特性进行初步研究。方法采用OL-PCR和自杀性质粒pCVD442介导的同源重组方法构建中间缺失162bp的espF基因缺陷突变株,并比较突变株与野生株对结肠癌细胞Lovo的黏附性。结果 PCR及序列分析证实,缺陷突变株的espF基因缺失了162bp碱基,野生株对Lovo细胞的黏附率明显高于突变株(P<0.001)。结论成功构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,突变株黏附Lovo细胞能力减弱,表明EspF促进细菌的粘附,为进一步研究其在EHECO157∶H7的A/E损伤中的作用奠定基础。
- 杨瑜王春晖周莹万成松
- 关键词：同源重组
