马铈委
- 作品数:8 被引量:4H指数:1
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 抗口蹄疫转基因动物模型的研究
- 陈创夫王鹏雁乔军张然哈孜赛务加甫郭志儒胡文革胡圣伟马铈委
- 该项目选择7个不同血清型口蹄疫病毒共有的保守序列,构建了FMDVsiRNA表达载体,在细胞水平和乳鼠攻毒实验中验证了表达的siRNAs具有较好的抗病毒感染的能力;利用显微注射技术在国内外首次获得了抗口蹄疫的转基因小鼠模型...
- 关键词:
- 关键词:口蹄疫病毒基因表达抗病育种
- 抗猪O型口蹄疫病毒病shRNA设计及载体的构建方法
- 本发明涉及一种抗猪O型口蹄疫病毒病shRNA及载体的构建方法,其特征在于根据GenBank中公布的O型口蹄疫基因组序列,选择VP<Sub>1</Sub>和3D基因中的保守区段,选取一段19bp长的核酸序列;19bp核酸序...
- 陈创夫马铈委乔军赛务加甫哈孜王鹏雁
- O型口蹄疫病毒间接免疫荧光检测方法的建立被引量:4
- 2012年
- 为建立猪O型口蹄疫病毒(FMDV)间接免疫荧光(IFA)检测方法,以猪抗O型口蹄疫病毒阳性血清为一抗、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的SPA蛋白(葡萄球菌蛋白A)为二抗,通过反应条件的优化,建立检测方法。结果表明,IFA最佳工作条件为,一抗最适稀释度为1∶50,FITC标记的二抗的最适稀释度为1∶800,最适孵育时间均为1h。特异性试验表明,用建立的IFA检测方法只能检测O型FMDV,而A型、AsiaⅠFMDV型和猪水疱病病毒(SVDV)检测结果均为阴性。建立的检测O型FMDV抗原的IFA检测方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,可用于FMDV感染的实验室诊断及其在感染机体中的定位和动态分布研究。
- 蔡扩军乔军孟庆玲陈创夫马铈委黄炯魏婕
- 关键词:O型口蹄疫病毒间接免疫荧光
- 抗猪O型口蹄疫病毒病shRNA设计及载体的构建方法
- 本发明涉及一种抗猪O型口蹄疫病毒病shRNA及载体的构建方法,其特征在于根据GenBank中公布的O型口蹄疫基因组序列,选择VP<Sub>1</Sub>和3D基因中的保守区段,选取一段19bp长的核酸序列;19bp核酸序...
- 陈创夫马铈委乔军赛务加甫哈孜王鹏雁
- 文献传递
- 整合O型口蹄疫病毒shRNA转基因克隆猪的制备方法
- 本发明涉及一种整合O型口蹄疫病毒shRNA转基因克隆猪的制备方法,其特征在于:利用RNA干扰和转基因克隆技术制备抗O型口蹄疫病毒复制转基因克隆猪的方法,针对O型口蹄疫病毒VP1和3D基因共设计了16对shRNA,构建干扰...
- 陈创夫欧阳红生乔军赛务加甫马铈委王鹏燕
- 文献传递
- 高效抑制O型口蹄疫病毒shRNA分子的筛选与验证
- 2012年
- 针对O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease veirus,FMDV)基因组高度保守的VP1和3D区段,选取了120个干扰靶位,根据RNAi技术原理,构建了包括对照在内的82个shRNA表达质粒;通过细胞攻毒试验,提取细胞毒液RNA,然后RT-PCR,最后real-time PCR检测病毒和shRNA的表达量。结果显示,干扰质粒组基因表达抑制率为63%~96.8%,其中pSiRe-Zs-VP1-54和pSiRe-Zs-3D-12等2个表达质粒抑制效率最好,分别为96.8%和87%,表明这2个表达质粒能够明显抑制FMDV的复制。
- 马铈委陈创夫乔军
- 关键词:口蹄疫病毒RNAI
- 抗口蹄疫病毒转基因猪育种新材料的研究
- 口蹄疫(Foot-and-mouth disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdisease virus, FMDV)引起的一种严重危害偶蹄动物的高度接触性、热性、急性传染病。FMDV有7个...
- 马铈委
- 关键词:口蹄疫病毒RNA干扰体细胞克隆技术转基因克隆猪
- 文献传递
- 靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究
- 2013年
- 为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。
- 蔡扩军马铈委乔军孟庆玲陈创夫黄炯张再超杨海波
- 关键词:SHRNA转基因克隆猪体细胞抗病毒活性