佟艳华
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:军事医学科学院更多>>
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- PC12细胞-大鼠μ阿片受体稳定表达系的建立与胍丁胺调节阿片功能分子机制研究
- 药物成瘾已成为严重的全球性公共卫生问题和突出的社会问题。根本原因在于药物成瘾的分子生物学机制尚未阐明,缺乏理想的药物靶标和医学生物学干预手段。 本实验室前期研究发现胍丁胺自身不成瘾,通过激活I1咪唑啉受体(I1-imi...
- 佟艳华
- 关键词:Μ阿片受体PC12细胞胍丁胺药物成瘾分子机制
- 文献传递
- 慢病毒介导的大鼠μ阿片受体在PC12细胞的稳定表达和功能
- 2014年
- 目的建立具有神经元特性的稳定表达大鼠μ阿片受体(rat mu-opioid receptor,rMOR)的PC12细胞模型。方法构建慢病毒表达载体pBPLV-rMOR-eGFP,包装病毒,并将包装好的慢病毒感染PC12细胞,流式细胞分选术结合有限稀释法筛选稳定表达rMOR的PC12细胞。以放射性配体受体结合实验检测表达受体的亲和力及表达水平,用cAMP超射分析在PC12细胞中表达的rMOR的功能特征及胍丁胺抗吗啡依赖的检测。结果病毒感染细胞后,可见明显的荧光蛋白表达。单克隆扩大培养后,细胞生长正常。3H-二丙诺啡与PC12-rMOR细胞中的rMOR蛋白有较好的亲和力,Kd值为(0.51±0.07)nmol/L,Bmax值为(1.58±0.15)pmol/mg;吗啡20μmol/L慢性处理24 h,纳洛酮10μmol/L急性催促15 min引起cAMP升高(255±25.2)%,这一效应能被外源性胍丁胺剂量依赖性逆转。结论成功建立了无α2肾上腺受体干扰、具有神经元特征、MOR与Ⅰ型咪唑啉受体稳定共表达的细胞模型,为吗啡成瘾神经分子机制及胍丁胺激活Ⅰ型咪唑啉受体抗阿片成瘾的神经分子机制研究提供良好的体外细胞研究模型。
- 佟艳华赵太云吴宁李锦
- 关键词:Μ阿片受体PC12细胞阿片成瘾