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高山绚孔菌化学成分研究被引量：1: 2014年; 目的：研究高山绚孔菌子实体化学成分。方法：采用柱色谱手段，结合波谱方法（MS，NMR）分离鉴定高山绚孑L菌子实体的化学成分。结果：从高山绚孔菌的氯仿提取物和醋酸乙酯提取物中分离得到11个单体化合物，分别为麦角甾醇过氧化物（1），麦角甾．7，22-二烯-3β-醇（2），啤酒甾醇（3），麦角甾醇（4），麦角甾-7，22-二烯-3-酮（5），阿里红酸A（6），硫色多孔菌酸（7）（4E，8E）-N-D-2’-羟基棕榈酰-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-9-甲基-4，8-sphingadienine（8），N-（2＇-羟基二十四碳酰基）-1，3，4-三羟基-2-氨基-十八烷（9），烟酸（10）和齿孔酸（11）。结论：化合物3，5，6，8—10首次从该真菌中分离得到。; 李巍包海鹰图力古尔; 关键词：化学成分麦角甾醇

利用植物系统表达重组蛋白的研究进展被引量：3: 2010年; 植物是可以生产不同生物药剂品的成本低廉的生物反应器,综述了稳定转化系统、瞬时表达系统以及叶绿体基因组转化方法,这三种不同的植物表达系统的特点和研究现状,并对其存在的问题及未来的前景进行了分析。; 江莺刘秀明杜美丽朱海林李巍李海燕李校堃; 关键词：叶绿体转化重组蛋白

食用菌生物反应器的研究进展被引量：5: 2010年; 食用菌生物反应器生产外源蛋白质是近年来新兴的研究热点。本文综述了以食用菌作为生物反应器表达生产外源蛋白的特点及其遗传转化系统的研究现状和存在问题;最后结合本实验室在该领域的研究情况阐述了食用菌遗传转化系统的应用前景。; 李巍刘秀明江莺杜美丽朱海林李洪志于勤明李海燕李校堃; 关键词：食用菌生物反应器外源蛋白

VEGF基因油体表达系统构建及对拟南芥的遗传转化: 2010年; 为研究油体系统在植物中表达外源蛋白的优势,以油菜总DNA为模板,通过PCR得到油菜油体(Ycoil)及启动子序列(Ycprm)。同时,将多对合成的寡核苷酸链,通过PCR方法拼接得到血管内皮生长因子全长基因(VEGF)。以此为基础,构建Ycoil、Ycprm、VEGF融合表达载体p1390Ycprm-Ycoil-VEGF。将重组质粒转入农杆菌GV3101,并用花浸染法对拟南芥进行浸染。在含潮霉素(20mg/L)的1/2MS培养基上筛选转基因拟南芥种子(T0),获得了T1代抗性植株,通过PCR检测、SDS-PAGE检测和Western blotting检测,结果表明油菜油体及血管内皮生长因子的融合基因已经转入拟南芥中,并成功得到表达,转化率约为0.1%。; 李洪志庞实锋李海燕薛萍刘秀明李营李巍肖艳双李校堃; 关键词：油体拟南芥植物生物反应器

乳孔硫磺菌的化学成分和抗氧化活性被引量：6: 2014年; 对乳孔硫磺菌子实体不同极性提取物进行了DPPH和ABTS自由基清除能力的测定,并对氯仿和乙酸乙酯提取物进行了分离纯化。结果表明,乳孔硫磺菌的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物均有一定的抗氧化活性,各提取物对两种自由基的清除能力均表现为甲醇提取物>乙酸乙酯提取物>氯仿提取物>石油醚提取物,甲醇提取物对DPPH自由基的清除率最高可达到93.78%;对ABTS自由基的清除率最高可达到62.06%;从氯仿和乙酸乙酯提取物中分离得到10个化合物,分别是:(22E,24R)‐5α,8α‐过氧麦角甾‐6,22‐二烯‐3β‐醇(1),阿里红酸A(2),麦角甾‐7,22‐二烯‐3β‐醇(3),啤酒甾醇(4),硫色多孔菌酸(5),(4E,8E)‐N‐D‐2′‐hydroxypalmitoyl‐1‐O‐β‐D‐glycopyranosyl‐9‐methyl‐4,8‐sphingadienine(6),麦角甾醇(7),N‐(2′‐羟基二十四碳酰基)‐1,3,4‐三羟基‐2‐氨基‐十八烷(8),烟酸(9)和齿孔酸(10)。其中,化合物2、6、8和9为首次从硫磺菌属真菌中分离得到。; 李巍包海鹰图力古尔; 关键词：自由基清除能力清除率

农杆菌介导的角质细胞生长因子-1转化油菜的研究被引量：1: 2011年; 构建植物表达载体pCAMBIA139035S-KGF1,并将重组质粒转入到根瘤农杆菌EHA105中.以甘蓝型油菜‘沪油15’为受体材料,用农杆菌介导法转入角质细胞生长因子(KGF)-1.通过PCR、Southern blot杂交和Western blot检测,表明KGF-1已经在油菜中成功表达,相对分子质量为19 000.; 杜美丽刘秀明江莺李巍朱海林李海燕李校堃; 关键词：油菜角质细胞生长因子

柔嫩艾美耳球虫子孢子抗原的制备被引量：1: 2011年; [目的]为进一步研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的单克隆抗体奠定基础。[方法]给肉鸡雏接种E.tenella纯种孢子化卵囊,第5～10天收集鸡的粪便并标记、粗提,经卵囊孢子化、纯化孢子化的卵囊、计数卵囊后,最终制备出子孢子抗原。[结果]该方法制备E.tenella子孢子抗原较其他方法简单易行,不需太多专门仪器和培养液,一般实验室均可进行,效果良好。但所用时间较长。[结论]该试验成功分离提纯出了鸡的E.tenella卵囊,并获得了蛋白浓度较高的抗原,为单克隆抗体的制备提供了有力保障。; 李巍王丹王哲凡敏张颖赵权; 关键词：柔嫩艾美耳球虫

叶绿体表达系统的研究进展被引量：1: 2011年; 综述了叶绿体表达系统的特点及其转化方法,重点阐述了其研究现状及应用。针对本实验室的研究情况对其存在的问题进行了分析,并提出展望。; 杜美丽刘秀明江莺李巍朱海林李海燕李校堃; 关键词：重组蛋白

转基因红花中角质细胞生长因子KGF-1的表达被引量：6: 2011年; 通过构建重组表达质粒载体p139035S-KGF1和根癌农杆菌介导在红花(Carthamus tinctorius)中表达角质细胞生长因子(KGF-1)。从侵染到诱导生根共需要14周,转化率达0.1%。红花子叶在潮霉素筛选培养基上培养4-5周后便可获得丛生芽,再生芽移入含潮霉素的伸长生根培养基,培养4-8周可诱导生根。通过PCR、Southern blot、RT-PCR及Western blot检测证明目的基因KGF-1已经整合到红花细胞的染色体中,实现了KGF-1外源蛋白在红花中的成功表达,为开发KGF-1蛋白新的生产途径奠定了基础。; 江莺刘秀明马吉胜李巍朱海林杜美丽李海燕李校堃; 关键词：根癌农杆菌角质细胞生长因子

苜蓿叶绿体DNA的提取及其Rbcl基因片段的克隆被引量：6: 2011年; [目的]获得高纯度的苜蓿叶绿体DNA(cpDNA)和Rbcl基因片段。[方法]采用改进的高盐低pH法分离和纯化苜蓿叶绿体DNA;利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,设计引物,从苜蓿叶绿体基因组中扩增Rbcl基因,利用生物学软件对测序结果进行分析。[结果]经检测分析,获得了产率较高和纯度较好的苜蓿叶绿体DNA,并用PCR方法扩增获得了1 130 bp的Rbcl基因片段。该基因片段有17个常用的限制性内切酶酶切位点,与烟草、水稻、菜豆、玉米、甘薯和甜菜中Rbcl基因核苷酸的同源性为85.6%～90.6%。[结论]为构建苜蓿叶绿体表达载体和通过叶绿体生物反应器生产药用蛋白等奠定了基础。; 朱海林刘秀明江莺杜美丽李巍李海燕李校堃; 关键词：苜蓿叶绿体DNA RBCL基因克隆

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李巍