李珊
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划无锡市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程更多>>
- 哈茨木霉产水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化被引量:5
- 2014年
- 结合多种分离方法,从哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai ACCC30371)的发酵产物中分离得到一种对不溶性多糖热凝胶具有较高水解活性的内切β-1,3-葡聚糖酶。结果表明,哈茨木霉发酵液经50%饱和度硫酸铵沉淀预处理后,依次经过HiPrep 26/10 desalting层析柱脱盐、QFF阴离子交换层析柱去除杂质蛋白,最终经Superdex 75凝胶柱纯化获得纯度较高的内切β-1,3-葡聚糖酶。最终酶活回收率为6.63%,内切酶比酶活由6.86U/mg提高到133.01U/mg,纯化倍数达到19.39倍。MALDI-TOF-TOF鉴定结果表明,该内切酶与产自绿色木霉的endoglucanase存在较高的同源性。
- 徐敏李晶郑志永朱莉詹晓北李珊张洪涛
- 关键词:哈茨木霉热凝胶分离纯化
- 两阶段pH和搅拌控制策略提高哈茨木霉产β-1,3-葡聚糖内切酶被引量:1
- 2015年
- 为提高哈茨木霉(Trichoderma harzianum GIM 3.442)发酵生产β-1,3-葡聚糖内切酶的酶活Eendo及其内切酶酶活在总酶活中所占的比例Eendo/Etotal,在7 L发酵罐水平考察了不同pH和搅拌转速对菌体和产酶的影响。结果表明,单一pH或搅拌转速的优化不能使菌体生长和产物合成同时达到最优效果。通过分析不同pH和转速下发酵曲线和动力学参数,提出了两阶段pH和搅拌转速控制策略:在发酵前期(0-24 h)控制pH 7.0,搅拌转速100 r/min,发酵后期(24-168 h)控制pH 5.0,搅拌转速200 r/min。β-1,3-葡聚糖内切酶(Eendo)、酶合成生产强度(QE,endo)和Eendo/Etotal分别达到了407.8 U/mL、3.09 U/(m L·h)和0.71,比优化前分别提高了320.0%、398.4%和65.1%。
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- 关键词:哈茨木霉PH搅拌转速
- 哈茨木霉产β-1,3-葡聚糖内切酶的发酵工艺条件研究被引量:2
- 2015年
- 对哈茨木霉(Trichoderma harzianum GIM 3.442)产β-1,3-葡聚糖内切酶的液体发酵条件进行了单因素优化实验,确定了最佳培养基成分和培养条件,在此基础上通过正交试验设计对复合碳源(葡萄糖、茯苓多糖)、胰蛋白胨、Na NO3和磷酸盐进行了L9(34)试验,研究了4种因素对哈茨木霉产酶的影响,确定了最佳培养条件:葡萄糖42.0 g/L,茯苓多糖18.0 g/L,胰蛋白胨15.0 g/L,Na NO35.0 g/L,初始p H 6.0,接种量8%,28℃,110 r/min培养6 d。优化后总酶活Etotal和β-1,3-葡聚糖内切酶Eendo活力达到了471.6 U/m L和327.4 U/m L,比优化前分别提高了7.3倍和23倍,且内切酶占总酶活的比例Eendo/Etotal由0.24增加到0.71,效果显著。
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- 关键词:哈茨木霉发酵优化正交试验