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杨丹燕

作品数：11 被引量：15H指数：2
供职机构：浙江工业大学更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇专利
  • 3篇期刊文章

领域

  • 3篇生物学

主题

  • 9篇T载体
  • 6篇限制性内切酶
  • 6篇内切
  • 6篇内切酶
  • 5篇克隆
  • 5篇活性
  • 4篇线形
  • 4篇快速克隆
  • 4篇活性肽
  • 4篇基因工程
  • 4篇基因工程菌
  • 4篇工程菌
  • 2篇阳性
  • 2篇阳性克隆
  • 2篇阴性
  • 2篇阴性率
  • 2篇酸酶
  • 2篇青霉
  • 2篇青霉素
  • 2篇转化子

机构

  • 11篇浙江工业大学
  • 1篇新余学院

作者

  • 11篇林陈水
  • 11篇杨丹燕
  • 9篇任慧颖
  • 8篇许明
  • 8篇于真真
  • 1篇黎小军
  • 1篇武胜伟

传媒

  • 2篇浙江工业大学...
  • 1篇氨基酸和生物...

年份

  • 3篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 4篇2009
  • 2篇2008
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
一种表达型前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种可用于快速克隆和表达目的基因PCR产物的一种表达型前T载体，及其制备与应用。本发明的有益效果主要体现在：一步法使目的基因克隆并得到表达，省略复杂的重组过程；在构建过程中无需对PCR产物进行纯化、酶切，前T...
林陈水许明于真真任慧颖杨丹燕
文献传递
一种前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种前T载体，由以下方法制备得到：(1)以含有氨苄青霉素除外的大肠杆菌敏感的抗生素的抗性基因的质粒为模板进行PCR扩增，在引物的5’末端引入XcmI酶切位点，扩增得到含有所述抗生素的抗性基因及其上下游表达调控...
林陈水于真真许明任慧颖杨丹燕
文献传递
一种胞内融合表达型前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种胞内融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI-GSGSG-HHHHHH-XcmI-Amp<Sup>r</Sup>-XcmI-HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET39质...
林陈水于真真杨丹燕许明任慧颖
文献传递
一种前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种前T载体，由以下方法制备得到：(1)以含有氨苄青霉素除外的大肠杆菌敏感的抗生素的抗性基因的质粒为模板进行PCR扩增，在引物的5’末端引入Xcm I酶切位点，扩增得到含有所述抗生素的抗性基因及其上下游表达调...
林陈水于真真许明任慧颖杨丹燕
文献传递
一种周质分泌融合表达型前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种周质分泌融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI－GSGSG－HHHHHH－XcmI－Amp<Sup>r</Sup>－XcmI－HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET3...
林陈水于真真杨丹燕许明任慧颖
文献传递
T载体研究进展被引量：10
2009年
T载体是直接克隆或表达PCR产物的新型载体,重组过程无需酶切和纯化,简便高效.在总结国内外研究的基础上,概述了构建T载体的方法,其中内切酶法是T载体制备方法中最先进的方式.阐述了T载体在抗体库构建、目的基因克隆、某些蛋白的融合表达方面的应用以及目前T载体的商业化.对表达型T载体与克隆型T载体进行了比较,其中表达型T载体可以同时满足基因克隆和表达的需要,还具有其他独特的优势.介绍了表达型T载体的构建难点,探讨了今后T载体的研究发展方向.
林陈水武胜伟杨丹燕
关键词：T载体克隆
一种胞内融合表达型前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种胞内融合表达型前T载体，由如下方法制备得到：(1)构建编码BspTI－GSGSG－HHHHHH－XcmI－Amp<Sup>r</Sup>－XcmI－HindIII的DNA1片段；(2)定点突变pET39质...
林陈水于真真杨丹燕许明任慧颖
文献传递
提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性被引量：2
2009年
以E.coliDH5α基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T载体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coliBL21(DE3)和E.coliorigami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coliorigami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coliBL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coliorigami(DE3)中蛋白活性比E.coliBL21(DE3)中明显提高,达到1 614.3U/mg蛋白.
杨丹燕林陈水
关键词：碱性磷酸酶E.COLIBL21(DE3)可溶性活性
天冬氨酸酶E.coli融合表达研究被引量：3
2012年
以大肠杆菌基因组DNA为模板,设计引物扩增得到天冬氨酸酶基因,将其重组于胞内融合表达型T载体中,重组质粒转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)。SDS-PAGE分析表明,工程菌经IPTG诱导,表达大量表观分子量约75kD的融合蛋白。经试验,工程菌细胞具有较高的天冬氨酸酶活性,融合形式的酶最适温度37℃,最适pH8.5,融合伴侣DsbA的存在对酶活没有影响。
任慧颖黎小军杨丹燕林陈水
关键词：天冬氨酸酶融合蛋白DSBA
一种表达型前T载体及其制备与应用
本发明提供了一种可用于快速克隆和表达目的基因PCR产物的一种表达型前T载体，及其制备与应用。本发明的有益效果主要体现在：一步法使目的基因克隆并得到表达，省略复杂的重组过程；在构建过程中无需对PCR产物进行纯化、酶切，前T...
林陈水许明于真真任慧颖杨丹燕
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