王大庆 作品数:16 被引量:61 H指数:5 供职机构: 川北医学院眼视光学系 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
成纤维活化蛋白在眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞中的表达研究 被引量:3 2021年 目的:通过培养、分离、纯化、鉴定眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞(CAFs)及正常眼睑皮肤成纤维细胞(NFs),将两种成纤维细胞的生物学特性和成纤维活化蛋白(FAP)表达情况进行对比研究,以进一步探究FAP以及CAFs在眼睑基底细胞癌发病及其发展中的作用及意义。方法:将眼睑基底细胞癌及眼睑正常皮肤组织块贴壁培养获得原代CAFs及NFs,于倒置相差显微镜下观察纯化的两种细胞第3代的细胞形态并用细胞免疫化学染色(SP法)鉴定两种细胞;MTT法检测细胞生长增殖活力;通过RT-qPCR、Western Blot分别检测其FAP mRNA、蛋白在两种细胞中的表达差异。结果:眼睑CAFs呈长梭形或纺锤形,胞质突明显减少,而胞浆内具有较多颗粒,细胞体积差异明显,排列紊乱且密集,丧失接触抑制,存在明显的重叠生长现象;NFs呈长梭形,但胞浆内颗粒少见,细胞体积较均一,放射状排列,存在接触抑制,未见重叠生长。眼睑CAFs的增殖速度明显快于NFs。RT-qPCR法检测眼睑CAFs中FAP mRNA相对于内参的表达量为3.672±0.221,明显高于眼睑NFs中的含量1.034±0.024(P<0.05)。Western Blot法检测两种细胞中FAP蛋白表达水平发现,FAP在眼睑CAFs中高表达,而眼睑NFs中几乎不表达(P<0.05)。结论:眼睑CAFs与眼睑NFs在形态结构、生长增殖、生长因子表达等生物学特征方面发生了显著改变,提示肿瘤微环境随眼睑基底细胞癌的发生发展相应地发生了一些变化,进而诱导NFs生物学特性和功能发生改变,最终转变为CAFs。此外,眼睑CAFs较NFs高表达分泌FAP,表明肿瘤细胞微环境中FAP可能参与肿瘤的发生发展,与眼睑基底细胞癌浸润性生长有一定关系。 周金蕙 王宁 母强元 刘朱 王大庆关键词:眼睑基底细胞癌 癌相关成纤维细胞 基于PI3K/AKT信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞的保护作用 被引量:3 2021年 目的基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障(DC)大鼠晶状体上皮细胞(LEC)的保护作用。方法将80只大鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Vehicle组)、治疗组(Netrin-1组)、PI3K/AKT信号通路干预组(LY294002组)。采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ)制作大鼠DC模型,Netrin-1组玻璃体腔注射Netrin-1,LY294002组注射Netrin-1+LY294002,Control组、Vehicle组注射等体积PBS,干预1个月。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠晶状体组织病理学改变;免疫组化染色观察晶状体组织E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达;检测晶状体组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;MTT法检测LEC增殖活性;Hochest 33258染色检测LEC凋亡情况;透射电镜观察各组LEC超微结构的变化;Western blot检测晶状体组织p-PI3K、p-AKT、caspase-3蛋白表达。结果与Control组相比,Vehicle组大鼠晶状体变浑浊,条索状、片状的LEC向晶状体成纤维细胞聚集,LEC增殖活力明显降低,凋亡能力明显增加,超微结构损伤明显,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达减少,MMP-2、MDA、caspase-3表达增多(P<0.05);与Vehicle组相比,Netrin-1组大鼠晶状体浑浊程度得到明显改善,可见少量LEC向晶状体纤维细胞迁移,增殖活力改善,凋亡细胞减少,细胞形态逐渐改善,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达增多,MMP-2、MDA、caspase-3表达减少(P<0.05)。LY294002组晶状体损伤程度明显增加,与Vehicle组差异无统计学意义(P>0.05)。结论Netrin-1通过激活PI3K/AKT信号通路,保护晶状体组织免受高血糖诱导的氧化应激和细胞凋亡,抑制LEC的迁移和EMT,从而起到延缓糖尿病大鼠白内障进展的作用。 周米露 赵锐 王大庆 曾晓莉关键词:糖尿病性白内障 NETRIN-1 晶状体上皮细胞 Sox2基因在眼部疾病中的研究进展 2022年 Sox2基因是SRY(sex determination region of Y chromosome)相关基因家族中的一员,是维持胚胎干细胞多能性和自我更新特性的关键转录因子之一。Sox2参与多种生物学过程,如调节细胞增殖和凋亡、参与肿瘤的形成和发展等。但关于Sox2基因在眼部疾病中作用研究的综述较少,为此,本文从Sox2基因的表达水平、相关信号通路及临床应用潜能等方面进行综述,以便于读者对Sox2基因在眼部疾病中的作用有更全面的认识和了解,开展更深入的研究。 刘朱 周金蕙 母强元 刘蓓蓓 刘捷 王大庆关键词:SOX2 翼状胬肉 眼部疾病 41例眼眶肿瘤的影像诊断和治疗分析 1998年 对41例眼眶肿瘤的影像学检查作出定性和定位诊断、结合手术和病理检查进行分析;指出三种影像学检查(x光、B超和CT)均能对眼眶肿瘤作出定性和定位诊断,但各有其优缺点,可以互补; 彭远光 何旭红 李晋平 肖立春 王大庆 邱明清关键词:眼眶肿瘤 X光 B超 CT 病理学 外科手术 双语教学在《角膜接触镜学》教学中的应用探索 2011年 依据眼视光学教育的全球化趋势,从眼视光学专业课程角膜接触镜学教学课件制作,课堂讲授方法以及教学效果评价机制等方面进行探索,同时对双语教学在角膜接触镜学教学应用中存在的主要问题进行分析,以期双语教学在对眼视光学教学中的推广产生积极的作用,从而使得培养的眼视光学学生具备国际竞争力。 邹云春 兰长骏 王大庆 蔡运林关键词:双语教学 眼视光学 眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞的分离培养及鉴定 目的 对眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)及眼睑正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)进行分离、培养、纯化、鉴定,初步研究C... 赵佐芳 王大庆 王宁 兰长骏关键词:眼睑基底细胞癌 成纤维细胞 原代培养 生物学特性 增殖和凋亡因子失衡在翼状胬肉发病机制中的研究进展 被引量:1 2021年 翼状胬肉是一种我国常见的、多发眼部疾病,其确切发病机制尚不明确。有学者发现,其侵袭性生长和高复发率的生物学行为与细胞增殖和凋亡的失衡密切相关。经大量基础研究,目前越来越多学者认为,翼状胬肉的发生是由于细胞增殖和细胞凋亡的失衡所致。本文综述增殖和凋亡因子失衡在翼状胬肉发病机制中的研究进展。 周金蕙 徐小凤 刘又言 王大庆关键词:翼状胬肉 凋亡相关因子 眼视光学专业本科培养模式比较与思考 被引量:5 2007年 对眼视光学本科培养模式进行比较,参照国际眼视光学教育基本状况,并分析我国目前眼视光学人才需求情况,提出一些对眼视光学教育本科培养模式的个人思考与建议。 邹云春 蔡运林 王大庆 兰长骏关键词:眼视光学 本科 骨膜蛋白在眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞与眼睑正常成纤维细胞中的表达差异 被引量:4 2018年 目的比较对已分离、培养、纯化、鉴定的眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞(basal cell carcinoma associated fibroblasts,BCAFs)与眼睑正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)中骨膜蛋白(periostein,PN)表达差异。方法取生长良好的第3代纯化的BCAFs和NFs,用胰蛋白酶调制细胞悬液的浓度均为20×103个·m L^(-1),按每孔2 m L细胞悬液接种六孔板。以无血清培养基培养48 h后收集上清液,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BCAFs与NFs上清液中PN的含量;以盖玻片置于六孔板底制作细胞爬片,应用免疫荧光细胞化学染色技术检测BCAFs与NFs中PN的表达。结果眼睑BCAFs与NFs上清液中PN的含量分别为(9.26±2.35)μg·L^(-1)和(2.57±0.41)μg·L^(-1);细胞免疫荧光化学染色检测PN表达显示,眼睑BCAFs中强于NFs,差异有统计学意义(P<0.05)。结论眼睑BCAFs较NFs高表达分泌PN,提示PN在眼睑基底细胞癌的局部侵袭生长中起着一定作用。 赵佐芳 王大庆 王宁 雷小平 朱大勇 张艳红 税民鸿 贾前伟 程阳 马善春 田翠玲 连刚 涂静 王定松 李维关键词:眼睑基底细胞癌 癌相关成纤维细胞 谈新形势下医学生社会责任感的培养 被引量:18 2006年 我国高等教育的重要社会责任就在于培养大学生的社会责任感。当代医学生是建设和发展社会主义医疗事业的主力军,如何使他们树立正确的价值观、人生观,为将来服务于社会,在社会上树立良好形象,尽职尽责的担负起新时期社会赋予的历史重任,培养医学生强烈的社会责任感,就显得极为迫切和重要。大学生社会责任感的培养是我国高等教育所面临的一个紧迫而又重大的课题。 刘英 米方林 王大庆 李天江关键词:高等教育 医学生 社会责任感