章晓栋
- 作品数：14 被引量：21H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 红色荧光特异性标记线粒体细胞系的建立及应用
- 本发明提供一种红色荧光特异性标记线粒体的Vero细胞系V-Mito，通过在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2-Mito转染Vero细胞，经含G418的培养基进行阳性克隆筛选，挑取阳...
- 于涟魏永伟章晓栋侯贤宏
- 文献传递
- 人纤维蛋白原α、β、γ基因的克隆和表达研究被引量：3
- 2011年
- 纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)是凝血因子I,在体内经凝血酶(thrombin)作用下转变为纤维蛋白,发挥其凝血和止血功能。本研究通过反转录的方法,从杭州人肝脏中成功克隆到人纤维蛋白原α、β、γ基因,并将其定向插入原核表达载体中,人纤维蛋白原α、β、γ基因经成功诱导获得表达,进一步纯化获得人纤维蛋白原α、β、γ蛋白。序列经比对,与Genbank上公布的序列同源性达97%～99%,这项研究为我国汉族人群纤维蛋白原基因核苷酸多态性和单倍型研究发挥一定作用,并且对纤维蛋白封闭剂的开发,提供了重要的产业化实验依据和技术基础。
- 黄星许健魏永伟章晓栋邓同乐孙静于涟
- 关键词：纤维蛋白原基因序列纤维蛋白封闭剂
- 杭州梅苑宾馆市场竞争力提升战略研究
- 章晓栋
- 关键词：差异化硬件改造
- 猪圆环病毒Ⅰ型全基因组的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2008年
- 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是引起临床断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的主要病原之一,而与之遗传相关的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)无致病性。本研究从病猪的脾脏通过PCR扩增并成功克隆了PCV1的全基因组,在此基础上,对GenBank中发表的所有31株PCV1以及部分PCV2(60株)进行了生物信息学分析。PCV1株间遗传与分子进化分析结果表明:PCV1可分为基因Ⅰ型与基因Ⅱ型两种基因型。PCV1与PCV2之间基因组结构和功能区分析结果表明:PCV1和PCV2基因组之间在复制起始区等功能区高度保守,在主要的编码区,尤其是编码Cap蛋白的ORF2,存在着许多差异。
- 徐弘魏永伟谢荣辉吕冬梅章晓栋于涟
- 关键词：断奶仔猪多系统衰竭综合症
- IBDV VP2/4/3、ChIL-18共表达载体的构建及在Vero细胞上的表达被引量：3
- 2010年
- 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗的免疫效果,应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension)将IBDV VP2/4/3基因与鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3-ChIL-18和ChIL-18-VP2/4/3,将融合基因片段定向插入真核表达载体pCI中,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18和pCI-ChIL-18-VP2/4/3;应用PCR法,在本实验室已成功构建的重组真核表达载体pCI-VP2/4/3和pCI-ChIL-18的基础上,构建VP2/4/3基因和ChIL-18基因的共表达载体co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18。在脂质体介导下将上述重组真核表达载体转染Vero细胞,间接免疫荧光证实重组质粒能正常表达目的蛋白,表达的蛋白具有免疫反应性。这为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDV DNA疫苗提供了实验依据。
- 侯贤宏魏永伟章晓栋于涟
- 关键词：IBDV基因融合共表达间接免疫荧光
- 红色荧光特异性标记线粒体细胞系的建立及应用
- 本发明提供一种红色荧光特异性标记线粒体的Vero细胞系V－Mito，通过在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2－Mito转染Vero细胞，经含G418的培养基进行阳性克隆筛选，挑取阳...
- 于涟魏永伟章晓栋侯贤宏
- 文献传递
- 水疱性口炎病毒甲基转移酶功能位点研究
- 水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus，VSV)能够对mRNA进行加工，包括加帽、甲基化和聚腺苷酸化。病毒mRNA的甲基化对于mRNA的稳定和病毒蛋白的翻译十分重要。单节段负链RNA病毒具有...
- 章晓栋
- 关键词：水疱性口炎病毒甲基转移酶定点突变
- 文献传递
- 鸡IL-18对IBDV多聚蛋白DNA疫苗的免疫增强作用研究被引量：11
- 2008年
- 为进一步评价鸡IL-18的免疫增强作用,用鸡白细胞介素18(IL-18)的真核表达质粒(pCI-IL-18)与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫SPF鸡,14日龄时首免,2周后二免,二免后5周用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.研究发现,鸡IL-18能显著促进T、B淋巴细胞的增殖反应,增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗诱导的中和抗体水平及其对强毒攻击的保护力.结果提示,鸡IL-18(200μg)对IBDV多聚蛋白DNA疫苗具有显著的免疫增强作用(P<0.05).
- 余夏萌寿春波章晓栋徐根亮于涟
- 关键词：鸡IL-18传染性法氏囊病病毒DNA疫苗免疫增强
- 重组鸡白介素18真核表达质粒(pCI-ChIL-18)胚胎接种的研究被引量：4
- 2008年
- 通过对孵化率、平均囊指数、脾指数、外周血淋巴细胞增殖反应和白介素18(IL-18)蛋白水平表达的检测,评定了重组鸡真核表达质粒(pCI-ChIL-18)胚胎接种的不同接种剂量和接种方法的效果。结果表明,pCI-ChIL-18质粒接种18日龄鸡胚不影响孵化率,对鸡的生长发育无影响,不同的接种途径和接种剂量对鸡体内IL-18的表达有影响。与1日龄雏鸡肌肉接种比较,胚胎接种可明显促进外周血淋巴细胞的早期增殖,而且呈剂量依赖性,但相同接种途径的200μg接种组与300μg接种组间无统计学差异(P>0.05)。
- 吕冬梅章晓栋徐弘魏永伟于涟
- 关键词：鸡IL-18接种剂量
- IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合基因真核表达质粒和基因共表达质粒的免疫原性比较被引量：3
- 2010年
- 为比较已构建的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组质粒的免疫原性、进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用,本研究将2周龄SPF鸡随机分为6组,以200μg/羽剂量首免:A组免疫重组真核表达重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18,B组免疫pCI-ChIL-18-VP2/4/3,C组免疫pCI-co-VP2/4/3-ChIL-18,D组免疫pCI-VP2/4/3,E组免疫pCI-ChIL-18和pCI-VP2/4/3,F组为空白对照,2周后以相同剂量二免,通过观察外周血淋巴细胞增殖效果,测定血清IBDV中和抗体水平、血清ELISA抗体水平和攻毒保护试验等,比较各试验组IBDV DNA疫苗的免疫原性。试验发现:重组质粒pCI-co-VP2/4/3-ChIL-18的保护效果最好,保护率达93.3%;pCI-VP2/4/3-ChIL-18免疫效果次之,保护率达80.0%;pCI-ChIL-18-VP2/4/3与pCI-ChIL-18和pCI-VP2/4/3的免疫效果无显著差异,保护率均为73.3%;但均优于单独使用重组质粒pCI-VP2/4/3组,保护率为60.0%。本实验为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDV DNA疫苗提供了实验依据。
- 侯贤宏魏永伟章晓栋于涟
- 关键词：真核表达载体DNA疫苗免疫原性
