蔡伟刚
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪链球菌2型溶血素重组亚单位疫苗的研制
- 根据已报道的猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)重要毒力因子溶血素的基因序列，利用DNAstar软件选择抗原性好的一段基因序列，设计并合成该段序列的1对特异性引物。以四川强毒株ZY05...
- 吉利伟蔡伟刚刘民星杨秋实孔建涛范红结
- 关键词：猪链球菌2型亚单位疫苗免疫效果特异性引物
- 文献传递
- 稳定表达马TRIM5α蛋白的HEK293细胞系的建立及其抗病毒活性初步研究
- 2016年
- 为建立稳定表达马TRIM5α(eqTRIM5α)的HEK293细胞系,并检测马TRIM5α(eqTRIM5α)的抗病毒功能,本研究将eqTRIM5α克隆于慢病毒表达载体pLPCX中,构建重组质粒pLPCX-eqTRIM5α-HA,同时构建恒河猴的pLPCX-Rh TRIM5α-HA作为阳性对照。利用VSV-G包装慢病毒,感染HEK293细胞,并利用嘌呤霉素筛选、纯化,建立了稳定表达eqTRIM5α和Rh TRIM5α的HEK293细胞系。经western blot和流式细胞术鉴定,该细胞系传代至20代后,仍然能够检测到eqTRIM5α和RhTRIM5α的稳定表达。将该细胞系应用于抗马传染性贫血病毒(EIAV)活性研究中,结果显示eqTRIM5α同RhTRIM5α一样均能够抑制病毒复制,表明eqTRIM5α是一种对EIAV具有较强限制作用的宿主蛋白。该细胞系的建立为进一步评价和研究eqTRIM5α的抗病毒作用和机制奠定了基础。
- 王翠辉那雷苏朝姚秋成蔡伟刚王晓钧
- 关键词：抗病毒作用马传染性贫血病毒
- 猪链球菌2型溶血素重组亚单位疫苗的研制被引量：4
- 2009年
- 根据已报道的猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)重要毒力因子溶血素的基因序列,利用DNAstar软件选择抗原性好的一段基因序列,设计并合成该段序列的1对特异性引物。以四川强毒株ZY05719的基因组为模板,PCR扩增后定向克隆至pET-32 a表达载体中;重组质粒转化至原核系统大肠杆菌B21中,经诱导表达目的蛋白后,利用小鼠进行免疫效果的测定和佐剂筛选,结果使用ISA206佐剂的溶血素(Hly)蛋白亚单位疫苗保护率高。
- 吉利伟蔡伟刚刘民星杨秋实孔建涛范红结
- 关键词：猪链球菌2型溶血素克隆原核表达免疫效果
- 马TRIM5α基因的扩增及抗EIAV作用评价被引量：2
- 2014年
- TRIM5α是一种重要的天然免疫因子,能够限制多种逆转录病毒的跨种感染。为研究马的TRIM5α是否具有抗病毒作用,本实验采用RT-PCR技术从马外周血液细胞的总RNA中扩增TRIM5α基因。测序结果表明,与GenBank中唯一的马TRIM5α(eqTRIM5α)基因序列相比马基因组预测的TRIM5α(eqTRIM5α-predicted)基因在其C末端部位有208 bp片段的插入,该插入造成TRIM5α的截短突变(eqTRIM5α-S)。通过删除插入片段后得到与eqTRIM5α-predicted基因相同的全长马的TRIM5α(eqTRIM5α-F)基因。同时将eqTRIM5α-S基因和eqTRIM5α-F基因分别插入pLPCX-HA真核表达载体中构建重组质粒,并分别转染293T细胞,转染24 h后感染马传染性贫血(EIAV)假病毒。通过检测荧光素酶活性,实验结果表明相对于阴性对照组eqTRIM5α-S可以有效地降低EIAV假病毒的复制,而eqTRIM5α-F则无该生物学功能。但通过将两种eqTRIM5α重组质粒与EIAV-gag表达重组质粒共转染293T细胞,结果表明eqTRIM5α-S和eqTRIM5α-F均不能降解Gag蛋白,这表明eqTRIM5α-S可能存在另一种机制限制EIAV的复制。
- 蔡伟刚那雷刘荻萩马建尹鑫张泽力艾有为王晓钧
- 关键词：马传染性贫血病毒抗病毒作用衣壳蛋白降解作用
- 马传染性贫血病毒疫苗株EIAVFDDV13及其感染性克隆激活宿主细胞固有免疫应答的比较研究
- 马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus, EIAV）是严重危害马属动物的慢病毒。上世纪七十至八十年代,哈尔滨兽医研究所沈荣显院士等通过独特的EIAV强毒致弱技术路线,对EIAV的强...
- 蔡伟刚
- 关键词：马传染性贫血病毒弱毒疫苗感染性克隆
- 文献传递
