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陈勇军

作品数:6 被引量:34H指数:3
供职机构:南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇农业科学

主题

  • 5篇病毒
  • 3篇猪繁殖
  • 3篇繁殖
  • 2篇原核表达
  • 2篇猪繁殖与呼吸...
  • 2篇猪繁殖与呼吸...
  • 2篇繁殖与呼吸综...
  • 2篇GP5蛋白
  • 1篇鸭瘟
  • 1篇鸭瘟病
  • 1篇鸭瘟病毒
  • 1篇增殖
  • 1篇犬病
  • 1篇重组酶
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇主要抗原域
  • 1篇疱疹病毒
  • 1篇疱疹病毒科
  • 1篇伪狂犬病

机构

  • 5篇南京农业大学
  • 1篇甘肃农业大学

作者

  • 5篇陈勇军
  • 4篇陈溥言
  • 3篇曹瑞兵
  • 2篇高晓飞
  • 2篇周斌
  • 2篇于春梅
  • 2篇苏鑫铭
  • 1篇王敏秀
  • 1篇郑其升
  • 1篇刘磊
  • 1篇姬向波
  • 1篇潘华奇
  • 1篇包晶晶
  • 1篇孙海亮

传媒

  • 2篇中国病毒学
  • 1篇微生物学报
  • 1篇病毒学报

年份

  • 1篇2008
  • 3篇2006
  • 1篇2005
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
从伪狂犬病病毒中删除Cre/LoxP介导的报告基因被引量:3
2006年
根据pEGFP-C1序列,设计并合成一对引物,通过PCR扩增出两端各含一个同向LoxP位点的GFP表达盒,克隆于转移载体pSKLR获得pSKLR-G-LoxP。通过经典同源重组方法,得到表达GFP的TK基因缺失伪狂犬病毒重组毒株S03109。该重组病毒在转染了pOG231(表达Cre重组酶)的293T细胞上连续传代,筛选得到重组病毒株S0419。荧光显微镜观察、Western blot及PCR检测结果表明,S03109感染细胞后持续表达GFP,而S0419不表达GFP。PCR证实S0419为含单个LoxP位点的TK基因缺失病毒,并且在细胞培养上遗传稳定,测序结果(GenBank登录号AY822465)表明,在Cre重组酶的作用下,两个同向LoxP序列之间的GFP表达盒被正确除去。对BALB/c小鼠的半数致死量(LD50)及免疫保护实验结果表明,S03109和S0419对BALB/c小鼠的LD50值均大于3×105PFU,免疫BALB/c小鼠,攻毒后平均存活率分别为67.5%与70%。以上结果表明,利用Cre/LoxP位点特异性重组系统,成功去除了插入重组伪狂犬病病毒基因组中的GFP报告基因。
苏鑫铭于春梅王敏秀陈勇军曹瑞兵周斌陈溥言
关键词:疱疹病毒科伪狂犬病病毒TK基因CRE重组酶GFP
猪繁殖与呼吸综合症病毒GP5蛋白原核表达初步研究
2005年
The envelope glycoprotein (GP5) is one of the major structural proteins of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). In this report, the N-terminal hydrophobic sequence of envelope glycoprotein gene (orf5) was deleted by PCR. The gene was subcloned into prokaryotic expressing vector pET-28 a(+) , the recombinant plasmid named pET-GP5 was transformed into E.coli cell BL21. SDS-PAGE and Western-blot indicated that the orf5 gene was expressed successfully and the recombinant fusion protein, which was about 20.8kDa, had immunologically reactive activity. The studies lay foundations for further study on the development of vaccines for PRRSV.
陈勇军苏鑫铭高晓飞郑其升于春梅曹瑞兵周斌陈溥言
关键词:猪繁殖与呼吸综合症病毒GP5蛋白原核表达
利用RNA干扰机制抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的增殖被引量:6
2006年
本文探讨依靠RNAi技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的干扰作用。筛选到针对编码PRRS病毒核衣壳蛋白的N基因的两处靶序列作为候选片段,在MARC-145细胞上进行基因干扰实验研究。成功观测到由载体表达的小干扰RNA(siRNA)在MARC-145细胞中对PRRS病毒增殖的抑制现象。通过选取不同时间段对病毒进行TCID50检测,以及对CPE出现时间进行观察和免疫荧光技术,得到RNA干扰对PRRS病毒增殖抑制作用的动态数据。证实在真核细胞水平上,RNA干扰机制可以抑制PRRS病毒的增殖。实验结果表明,依靠载体表达的RNA干扰技术将会对今后针对PRRS病毒的新型疫苗开发提供一个新思路。
高晓飞包晶晶陈勇军陈溥言
关键词:猪繁殖与呼吸综合征TCID50N基因CPE
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白跨膜区删除对小鼠免疫效果的影响
根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合症病毒/(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV/)ORF5基因的核苷酸序列设计3对特异性引物,从重组...
陈勇军
关键词:猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因跨膜区免疫效果
文献传递
鸭瘟病毒gB蛋白N端主要抗原域的表达及间接ELISA检测被引量:19
2008年
在分析鸭瘟病毒gB蛋白抗原性的基础上,设计一对引物克隆gB蛋白N端抗原性较好的抗原域编码基因。将克隆的基因定向插入pET-32a的EcoRⅠ和HindⅢ之间,构建了gB蛋白主要抗原域原核表达载体pET-gB1。将pET-gB1质粒转化BL(21)宿主菌后,对培养和表达条件进行了优化,实现了DPVgB蛋白主要抗原域的高效表达。免疫印迹试验表明获得的表达产物具有良好的反应原性。应用His·Bind亲和层析柱纯化重组DPVgB蛋白,以纯化的重组gB1蛋白作为检测抗原,初步建立了检测鸭瘟病毒抗体的igB1-ELISA。结果表明,抗原的最佳包被浓度为6.5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:待检血清OD490>0.4,且待检血清OD490/阴性血清OD490>2。应用igB1-ELISA对鸭血清样品进行检测,结果表明igB1-ELISA与全病毒包被的iDPV-ELISA符合率达到95.6%。
潘华奇曹瑞兵刘磊孙海亮姬向波陈勇军陈溥言
关键词:鸭瘟病毒原核表达间接ELISA
共1页<1>
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