高静
- 作品数：10 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津农学院动物科学与动物医学学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- TRAIL和HN基因融合表达重组腺病毒的构建及其对DT40细胞的抑瘤作用
- 2012年
- 分析携TRAIL和HN基因的重组腺病毒在DT40细胞中的表达规律及杀伤肿瘤细胞的生物学效应。通过RT-PCR分别从鸡外周血淋巴细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中扩增出TRAIL和HN基因,通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因的2A连接,将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中,与pAdeasy-1载体在BJ5183细菌内同源重组,构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-2A-HN,将质粒线性化后转染AD293细胞,包装后的重组腺病毒,经RT-PCR检测、荧光显微镜观察和病毒滴度测定后,将获得的重组腺病毒体外转染禽淋巴白血病DT40细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒的感染性和外源基因的表达情况,采用流式细胞仪检测重组腺病毒对DT40细胞生长的影响以及Ad-TRAIL和Ad-TRAIL-2A-HN对DT40细胞的凋亡作用。PacⅠ酶切证实同源重组成功;RT-PCR、荧光显微镜检测证实重组腺病毒质粒成功导入AD293细胞中且具有良好的感染性,滴度为1.9×1010PFU/mL;Western blot检测结果显示,TRAIL-linker-HN基因能够在DT40细胞中稳定表达并对DT40细胞产生细胞毒作用,且诱导细胞的凋亡率为29.52%,表明TRAIL-linker-HN具有双基因抑瘤的协同效应。
- 高静孙颖金天明
- 关键词：重组腺病毒抑瘤作用
- 一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法
- 本发明公开了一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法，采用可控双裂解技术制备重组猪胸膜肺炎放线杆菌APP菌影，将巴氏杆菌保护基因导入APP菌影载体，制成猪胸膜肺炎和巴氏杆菌二联基因疫苗。用...
- 金天明孙颖刘田生高静
- 文献传递
- 温控双基因裂解法制备App菌影的研究
- 胸膜肺炎放线杆菌(App)是猪传染性胸膜肺炎的病原，接触性传播，使用疫苗进行预防是最佳手段。常用灭活苗无法抵御菌体定，无法阻止其他血清型菌株感染。菌影疫苗制备简单，生产成本低，可有效诱发体液免疫与细胞免疫。菌影由G-在噬...
- 孙颖高静金天明
- 关键词：猪疾病胸膜肺炎放线杆菌
- 利用TRAIL和HN基因构建溶瘤重组腺病毒的策略研究
- 本实验首次利用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对肿瘤细胞的靶向性、HN基因的细胞凋亡作用和腺病毒载体系统高效稳定表达外源基因的特性,成功构建出能够融合表达上述基因的Ad-TRAIL-2A-HN,将为下一步利...
- 高静金天明
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体重组腺病毒疫苗开发
- 利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
- 本发明公开了一种利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用，使双基因在抑制肿瘤细胞生长方面发挥协同作用。采用从鸡脾细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出TRAIL和HN基因序列，通过定点...
- 金天明孙颖高静徐良董东晓秦云倩
- 文献传递
- 一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法
- 本发明公开了一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法，采用可控双裂解技术制备重组猪胸膜肺炎放线杆菌APP菌影，将巴氏杆菌保护基因导入APP菌影载体，制成猪胸膜肺炎和巴氏杆菌二联基因疫苗。用...
- 金天明孙颖刘田生高静
- 利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
- 本发明公开了一种利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用，使双基因在抑制肿瘤细胞生长方面发挥协同作用。采用从鸡脾细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出TRAIL和HN基因序列，通过定点...
- 金天明孙颖高静徐良董东晓秦云倩
- 文献传递
- 新城疫病毒HN蛋白的抑瘤机制及其研究进展
- 2014年
- 新城疫病毒囊膜上较大的纤突样糖蛋白由新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(HN)基因编码。HN蛋白即血凝素-神经氨酸酶蛋白,它不仅介导病毒吸附于肿瘤细胞,而且与融合蛋白一起帮助病毒侵入肿瘤细胞,其神经氨酸酶活性能水解宿主细胞表面的唾液酸,暴露宿主细胞的生物识别位点。它还能够水解病毒粒子表面糖链末端的唾液酸,防止病毒粒子在宿主表面簇集,并且能够引入新的粘附因子和免疫原性分子,诱导机体免疫系统识别。
- 高静董东晓龙雨清李萌李留安金天明
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白抑瘤机制
- TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展被引量：1
- 2012年
- TRAIL具有选择性杀伤肿瘤细胞而对大多数正常细胞没有明显毒性,可通过TRAIL胞外及胞内凋亡通路发挥诱导肿瘤细胞凋亡作用,而正常细胞则通过NF-κB介导、诱骗受体及c-FLIP调节来逃逸TRAIL诱导的凋亡。TRAIL与基因治疗、抗死亡受体的单克隆抗体、化疗、放疗药物及蛋白酶体抑制因子的联合使用能明显提高肿瘤治疗的敏感性,同时还可以逆转肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象。因此TRAIL作为新一代抗肿瘤药物有望应用于临床治疗。
- 高静金天明
- 关键词：TRAIL细胞凋亡肿瘤
- 温控双基因裂解法制备App菌影的研究
- 胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)是猪传染性胸膜肺炎的病原,接触性传播,使用疫苗进行预防是最佳手段。常用灭活苗无法抵御菌体定殖,无法阻止其他血清型菌株感染。菌影疫苗...
- 孙颖高静金天明
- 文献传递
