丁祝进
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家科技支撑计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 团头鲂白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及活性分析被引量:2
- 2016年
- 为了解鱼类白细胞介素6(IL-6)基因的转录调控原理及其免疫作用机制,构建5个团头鲂il-6基因启动子的荧光素酶报告质粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic质粒作为阴性对照,将它们分别与内参质粒pRL-TK共转染进鲤EPC细胞,并用100ng/mL的LPS诱导转染过重组载体的细胞,24h后检测荧光素酶的活性。结果显示:与阴性对照组相比,质粒转染组PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3与PGL3-IL-6P-4的荧光素酶活性均明显升高,其中PGL3-IL-6P-4组的荧光素酶活性最高,表明该启动子缺失体(-379至+34)包含il-6的核心启动子。用LPS刺激转染过重组载体的细胞后发现,与未经LPS刺激的对照组相比,仅PGL3-IL-6P-4组的活性明显增强,而其余缺失体的活性则没有显著变化,这进一步表明PGL3-IL-6P-4缺失体包含核心启动子区,并推测该核心启动子区域存在的潜在转录因子NF-κB与C/EBPβ等可能是响应LPS刺激的重要作用元件。
- 扶晓琴丁祝进饶友亮王卫民刘红
- 关键词:团头鲂白细胞介素6启动子活性LPS
- 团头鲂转铁蛋白基因SNP分子标记及其应用
- 本发明属于鱼类分子标记筛选技术领域,具体涉及团头鲂转铁蛋白基因SNP分子标记及应用。所述的分子标记由团头鲂转铁蛋白基因中克隆得到,其中分子标记1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,在该序列的128位碱基处存在一个等...
- 刘红胡晓坤丁祝进崔蕾王焕岭王卫民
- 文献传递
- 团头鲂转铁蛋白基因SNP分子标记及其应用
- 本发明属于鱼类分子标记筛选技术领域,具体涉及团头鲂转铁蛋白基因SNP分子标记及应用。所述的分子标记由团头鲂转铁蛋白基因中克隆得到,其中分子标记1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,在该序列的128位碱基处存在一个等...
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- 一种团头鲂转铁蛋白受体基因SNP分子标记及其应用
- 本发明属于鱼类分子标记筛选与应用技术领域,具体涉及一种团头鲂转铁蛋白受体基因SNP分子标记及其应用,该分子标记可应用于辅助团头鲂抗病品种的选育。本发明的分子标记从转铁蛋白受体基因(GenBank accession No...
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- 文献传递
- 团头鲂Dmrt4基因的克隆与表达分析被引量:4
- 2013年
- 为研究团头鲂Dmrt4基因的可能作用,采用RACE-PCR技术克隆了团头鲂卵巢Dmrt4基因的cDNA全长序列,采用实时荧光定量PCR技术对其胚胎及出膜后30d内各期、成鱼不同组织、雌雄性腺各分期的表达进行研究。结果表明,团头鲂Dmrt4基因至少存在2种不同的剪接形式,分别命名为Dmrt4a和Dmrt4b。其中,Dmrt4acDNA全长1 265bp,编码352个氨基酸,含DM和DMA 2个结构域;Dmrt4b cDNA全长1 081bp,编码281个氨基酸,仅含DMA结构域。氨基酸序列同源性分析显示,团头鲂Dmrt4与牙鲆、奥利亚罗非鱼的同源性最高。实时荧光定量PCR结果表明,Dmrt4基因在团头鲂胚胎期至出膜后30d内均有表达,且在受精后32h的表达量最高;成鱼卵巢的表达量显著高于其他组织(P<0.01);Ⅱ期卵巢的表达量显著高于其他时期,也显著高于精巢各分期(P<0.01)。上述结果表明,Dmrt4基因可能对团头鲂卵母细胞初期的生长起到重要作用,在雌鱼性腺发育过程中亦发挥一定的作用。
- 苏利娜丁祝进李鸿周凤娟王卫民刘红
- 关键词:团头鲂分子克隆基因差异表达胚胎发育性别决定与分化
- 团头鲂NK-lysin基因鉴定和表达分析被引量:4
- 2016年
- 为研究抗菌肽NK-LYSIN在团头鲂免疫系统中的可能功能,本实验从团头鲂转录组中钓取到2个NK-lysin基因(nkla和nklb),通过PCR扩增并测序验证其ORF序列。通过荧光定量PCR检测其在健康组织和嗜水气单胞菌感染后免疫组织中的表达,并构建其原核表达体系。结果显示,团头鲂nkla和nklb分别编码122和136个氨基酸,NKLA和NKLB均属于鞘脂激活蛋白样蛋白家族成员,各含有6个高度保守的半胱氨酸及1个Sap B结构域。在健康团头鲂各组织中,nkla在脾脏中表达量极高,在肌肉和血液中表达量极低;而nklb则在肠中表达量较高,在头肾中表达量较低,在其他组织均有表达。nkla和nklb不同的表达模式暗示它们可能存在功能上的分化。经嗜水气单胞菌感染后,团头鲂nkla与nklb表达变化模式相似,头肾中,表达量在4 h时显著下降;肝脏中,表达量在4 h达到最高,而后回落到正常水平;在脾脏和肠中4 h时开始下降,72 h时达到峰值,暗示NK-lysin可能在团头鲂抗嗜水气单胞菌感染过程中发挥重要作用。另外,本实验对nkla和nklb进行了原核表达,为进一步研究NK-lysin的功能奠定了基础。
- 詹柒凤丁祝进崔蕾范君王卫民刘红
- 关键词:团头鲂嗜水气单胞菌抗菌肽荧光定量原核表达
- 团头鲂铁蛋白和转铁蛋白基因在嗜水气单胞菌感染过程中的免疫功能研究
- 铁是生物体不可缺少的微量元素,在多种生理活动中都发挥着重要作用,然而铁过剩不仅会刺激机体产生有害的自由基,还会利于体内病原微生物的增殖。因此,维持机体铁稳态至关重要,其中铁蛋白(Ferritin,FT)和转铁蛋白(Tra...
- 丁祝进
- 关键词:团头鲂铁蛋白转铁蛋白基因克隆细菌粘附
- 文献传递
- 一种团头鲂转铁蛋白受体基因SNP分子标记及其应用
- 本发明属于鱼类分子标记筛选与应用技术领域,具体涉及一种团头鲂转铁蛋白受体基因SNP分子标记及其应用,该分子标记可应用于辅助团头鲂抗病品种的选育。本发明的分子标记从转铁蛋白受体基因(GenBank accession No...
- 刘红胡晓坤崔蕾丁祝进王焕岭王卫民
- 文献传递