- 藤黄微球菌过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的重组与表达被引量：1
- 2012年
- 目的应用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达藤黄微球菌过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从藤黄微球菌DNA中获得CAT编码基因,并应用pProEx-HTa质粒构建融合表达载体并表达和检测活性。结果通过融合表达获得可溶性带6×His标签重组蛋白,该蛋白经过Ni-NTA纯化后可获得活性物质。结论从大肠杆菌表达体系中表达了具有生物活性的CAT。
- 尚柯郑宪友陈婷疏翠曹张军张兴群
- 关键词：克隆
- 表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化被引量：3
- 2012年
- 目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件。方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件。结果最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5 h。蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg.protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/(mg.protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%。结论工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高。
- 张兴群郑慧琳疏翠陈婷曹张军
- 关键词：过氧化氢酶发酵工艺
- 藤黄微球菌过氧化氢酶发酵条件优化、诱变育种及其基因的克隆、表达与纯化
- 目的:
对藤黄微球菌/(Micrococcus luteus/)过氧化氢酶/(catalase A,CAT/)发酵条件进行优化,优化catalase A的产酶条件。对M.luteus进行物理诱变和化学诱变,筛...
- 疏翠
- 关键词：藤黄微球菌过氧化氢酶诱变基因克隆
- 文献传递
