单曙光
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 番茄LeDREB1转录因子基因RNAi载体的构建和鉴定被引量:1
- 2010年
- 利用rd29A基因启动子的DRE元件从番茄(丽春)cDNA文库中通过酵母单杂交技术筛选得到转录因子基因LeDREB1。核苷酸序列测定结果表明,该基因片段全长1 782 bp,具有900 bp的cDNA开放阅读框序列,编码300个氨基酸。该基因属于AP2/EREBP家族[1],可能调控许多逆境应答基因的表达。运用RNA干扰的思路,设计特异性引物,扩增正向和反向基因片段。将LeDREB1正向+反向基因片段插入到pCAMBIA2300-OCS的35s启动子下游,构建干扰载体pCAM-RNAi-LeDREB1,通过酶切和测序鉴定证明目的片段与载体片段连接正确。这一载体的成功构建为进一步研究LeDREB1的功能和调控作用机制提供有效的材料与技术支撑。
- 王迎波单曙光王贺王磊白由路程宪国
- 关键词:转录因子SIRNA番茄
- 大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析被引量:4
- 2011年
- GmC2H2转录因子基因是本实验室获得的一个编码172个氨基酸携带516 bp核苷酸的转录因子,属于经典C2H2型锌指蛋白。通过构建植物表达载体GmC2H2-pCAMBIA1304,借助优化的Floral-dip法转化模式植物拟南芥,经潮霉素Hygromycine(45-50 mg/L)抗性筛选获得转基因拟南芥植株。GUS组织染色分析表明,GmC2H2基因在生长12 d的转基因拟南芥幼苗中,表达部位主要集中在根部。对转基因拟南芥进行了低温(1℃)和脱落酸(200μmol/L)胁迫处理,测定其生理生化指标,通过real-time qPCR确定目的基因在转基因拟南芥中的表达情况。结果表明,携带GmC2H2目的基因的转基因拟南芥中脯氨酸和可溶性糖水平要高于野生型植株,而丙二醛水平要低于野生型,在抗逆性方面明显优于野生型拟南芥植株;并且胁迫处理下的转基因拟南芥中GmC2H2基因的表达量要高于未胁迫处理的转基因植株,说明GmC2H2基因的表达受低温和ABA的诱导,初步明确了该转录因子基因的功能。
- 单曙光于国红徐娜程宪国
- 关键词:锌指蛋白转基因拟南芥REAL-TIME
- 大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析
- 锌指蛋白(zinc finger protein)是一类具有“指状”结构域的转录因子,主要功能是调控基因的表达,锌指蛋白种类较多,但以C2H2型最多。C2H2型锌指蛋白基因最早在非洲爪蟾中发现,植物中发现的第一个C2H2...
- 单曙光
- 关键词:大豆锌指蛋白转录因子转基因拟南芥
- 文献传递