杜淑珍
- 作品数：9 被引量：21H指数：2
- 供职机构：遵义医学院第一附属医院儿科更多>>
- 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CT-1对癫痫持续状态大鼠海马神经元缺失及苔状纤维发芽的影响
- 2009年
- 目的:观察重组腺病毒心肌营养素1(Adv-CT1)对癫痫持续状态(SE)大鼠海马神经元缺失及苔状纤维发芽的影响,探讨CT-1对SE后脑损伤的修复作用.方法:建立氯化锂-匹罗卡品大鼠SE模型,随机将SE成功模型分为CT-1组(n=6,海马区注射Adv-CT1)及模型对照组(n=6,海马区注射生理盐水),另设正常对照组(n=6,腹腔注射生理盐水).各组动物于SE后14 d进行检测:①Nissl染色观察海马神经元形态学变化,并计数海马CA1区细胞数;②Timm染色检测苔状纤维发芽(MFS)程度;③免疫组化检测Caspase-3表达,结果用积分吸光度(IOD)值表示.结果:模型对照组可见海马区神经元变性、坏死,CT-1组病变较轻,正常对照组未见类似改变.模型对照组及CT-1组CA1区细胞数较正常对照组明显减少,但CT-1组细胞数明显多于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).模型对照组可见致密MFS染色颗粒;CT-1组虽也见MFS染色,但评分明显低于模型对照组(P<0.05).模型组Caspase-3的表达明显高于CT-1组(P<0.05).结论:CT-1可减轻SE后的神经细胞损伤,抑制MFS,其保护机制可能与抑制神经元凋亡,增加神经细胞存活有关.
- 杜淑珍束晓梅李振宏陈雪梅
- 关键词：癫痫持续状态心肌营养素-1
- 心肌营养素1修饰的神经干细胞移植对癫癎持续状态大鼠海马损伤及苔藓纤维发芽的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察心肌营养素1（CT1）修饰的神经干细胞（NSCs）移植到癫癎持续状态（SE）大鼠海马后的存活、迁移和分化情况，探讨CT1-NSCs移植对海马神经元损伤及苔状纤维发芽（MFS）的影响。方法建立氯化锂一匹罗卡品致sE大鼠模型，随机分为CT1-NSCs移植组、单纯NSCs移植组、模型组和正常对照组，每组18只。各组再分为移植后1、4、8周3个时间点，每个时间点6只。共聚焦免疫荧光显微镜下观察移植的NSCs在脑内存活、分化及迁移情况；Nissl染色观察海马神经元形态并计数CA，区神经细胞数；Timm染色检测海马齿状回MFS形成。结果（1）移植后4周及8周，CT1-NSCs移植组双标阳性细胞数量明显多于单纯NSCs移植组，前者可见神经细胞向周围迁移，后者未见明显迁移现象。（2）SE后大鼠CA。区神经细胞数随时间推移进行性减少，CT1-NSCs移植组细胞数（移植后1、4、8周分别为68．85±11．49、60．89±12．17和51．51±13．34）多于单纯NSCs移植组（67．92±10．78、42．56±11．47和30．49±10．12），4、8周时差异有统计学意义（t=4．650、5．334，P〈0．05）。（3）sE后大鼠齿状回内分子层可见MFS形成，且MFS评分随时问推移进行性增高；移植后1、4．8周时CT1-NSCs移植组MFS分值（0．77±0．04、2．48±0．89和2．39±0．82）明显低于单纯NSCs移植组（1．12±0．62、3．17±0．64和3．88±0．51，t=6．059、9．511、9．728，P〈0．05）。结论CT1能够促进NSCs在SE大鼠脑内存活、迁移和分化，CT1-NSCs移植对SE大鼠海马损伤有修复作用，并可抑制海马MFS形成。
- 束晓梅杜淑珍陈雪梅李振宏
- 关键词：细胞因子类干细胞移植
- 心肌营养素1对谷氨酸诱导神经干细胞凋亡的作用
- 2011年
- 背景:心肌营养素1属于白细胞介素6细胞因子家族,近年发现其可能对中枢神经系统有重要保护作用。目的:探索重组腺病毒心肌营养素1对谷氨酸诱导神经干细胞凋亡的保护作用,为脑损伤提供新的治疗措施。方法:取新生Wistar大鼠海马神经干细胞,第2代培养第5天用于实验,神经干细胞分为3组:谷氨酸组、重组腺病毒心肌营养素1组及对照组,利用四唑蓝比色了解细胞存活情况及原位缺口末端标记技术检测细胞凋亡。结果与结论:谷氨酸组神经干细胞呈现明显形态改变,重组腺病毒心肌营养素1组未见类似改变,在谷氨酸暴露后12,24,48及72hMTT吸光度值均低于心肌营养素1组,而细胞凋亡率均高于心肌营养素1组。与其他两组比较,对照组相同时间点A值增高,细胞凋亡率降低。提示,心肌营养素1对谷氨酸损伤的神经干细胞具有保护作用,可以抑制神经干细胞凋亡,促进其存活和增殖。
- 沈栋林束晓梅李振宏陈雪梅杜淑珍
- 关键词：心肌营养素1神经干细胞凋亡谷氨酸增殖
- CT1修饰的神经干细胞移植癫痫持续状态大鼠海马后的迁移、分化及对空间记忆的影响
- 2010年
- 目的观察心肌营养素1（CT1）修饰的神经干细胞（NSCs）移植癫痫持续状态（SE）大鼠海马后的存活、迁移和分化情况，观察对大鼠空间记忆功能的影响。方法（1）将携带CT1基因的重组腺病毒（Adv—CT1）转染NSCs，并用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记。（2）随机将54只SE大鼠分为联合移植组、单纯移植组及模型对照组（各18只），分移植后1、4及8周3个时间点（各6只）。（3）共聚焦荧光显微镜下观察NSCs存活、分化及迁移；水迷宫试验观察空间记忆功能。结果移植后4及8周，联合移植组双标阳性细胞数明显多于单纯移植组，并见细胞迁移，单纯移植组未见细胞迁移；联合移植组大鼠逃避潜伏期短于单纯移植组（P〈0．05）。结论CT1能促进NSCs在sE大鼠脑内的存活、迁移和分化，NSCs—CT1联合移植可改善大鼠SE后空间记忆功能障碍。
- 束晓梅杜淑珍李振宏陈雪梅
- 关键词：心肌营养素1神经干细胞癫痫持续状态
- 心肌营养素-1对谷氨酸诱导神经元凋亡的抑制作用及机制被引量：5
- 2008年
- 目的:探索重组腺病毒心肌营养素-1(Adv-CT-1)对谷氨酸(Glu)诱导神经元凋亡的保护作用及相关机制,为脑损伤提供新的治疗措施.方法:海马神经元分为3组:单纯Glu组、CT-1干预组(Adv-CT-1转染)及对照组;利用相差显微镜检查、DNA片段检测、乳酸脱氢酶(LDH)活性及流式细胞技术,对各组神经元进行凋亡检测;WesternBlot检测Caspase-3活性变化及线粒体内和胞浆内细胞色素C(CytC)水平变化.结果:Glu组神经元呈现明显形态改变,并见DNA梯状条带形成,CT-1组未见类似改变;Glu组神经元在Glu暴露后6,9及18h,LDH释放量(14.3%,24.6%及28.4%)及凋亡率(6.2%,18.8%及26.4%)均高于CT-1组(分别为9.2%,16.1%,19.7%及3.6%,11.3%,16.1%);Glu组Caspase-3活性3h即增加(25.6%),6及9h达到62.4%及46.1%,CT-1组3h时的Caspase-3表达分别为13.6%,45.2%及17.1%,均低于Glu组(P<0.05);Glu暴露30min,神经元胞质内CytC水平增加,之后进行性增高,线粒体内CytC进行性减少;Glu暴露后6h,CT-1组神经元胞质内CytC较Glu组减少了55.7%(P<0.05).结论:Glu诱导海马神经元凋亡的机制涉及线粒体CytC释放,激活Caspase级联反应;CT-1对损伤神经元的保护作用可能是经由线粒体信号转导途径、通过减少线粒体CytC释放而实现的.
- 束晓梅李振宏陈雪梅杜淑珍
- 关键词：心肌营养素-1神经保护凋亡谷氨酸细胞色素C
- CT1重组腺病毒转染神经元的培养及鉴定
- 2010年
- 目的培养、鉴定转染重组腺病毒心肌营养素1(recombinant adenovirus cardiotrophin-1,Adv-CT1)的神经元细胞。方法分离、培养新生Wistar大鼠神经元细胞,将细胞分为Adv-CT1转染组和正常对照组;利用细胞免疫组化技术鉴定CT1基因转染神经元细胞的转染率;利用台盼蓝染色技术检测神经元细胞死亡率。结果 Adv-CT1转染神经元细胞后12、24、36、48及60h转染率分别为43%、75%、90%、95%及97%,相同时间点的死亡率分别为0.12%、0.31%、0.45%、0.48%及0.52%,明显低于正常对照组(0.20%、0.52%、0.83%、1.14%及1.32%)。结论 CT1基因可在体外培养的神经元细胞内持续稳定表达,在转染后48h达到理想转染率,并可降低神经元死亡率,对神经元具有保护作用。
- 李同欢程兴东杜淑珍束晓梅
- 关键词：神经元细胞
- 谷氨酸诱导海马神经元凋亡涉及线粒体释放细胞色素C被引量：16
- 2008年
- 目的:建立体外谷氨酸诱导神经元兴奋损伤模型,探索其凋亡发生是否通过线粒体信号转导途径介导的细胞色素C(CytC)释放而实现,为今后干预性使用神经保护剂提供依据。方法:分离及培养新生Wistar大鼠海马神经元,选用合适谷氨酸浓度建立神经元损伤模型;利用LDH测定及流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测谷氨酸暴露后不同时点神经元凋亡及坏死的动态改变;采用Western blotting法检测caspase-3活性及线粒体内和胞浆内CytC水平动态变化。结果:谷氨酸诱导神经元损伤呈明显浓度及时间依赖性,50μmol/L浓度可使LDH释放量明显增加(18.4%,P<0.05),暴露后6h凋亡率显著增加;凋亡发生前,神经元caspase-3活性已明显增高(3h),6h达高峰;线粒体CytC释放发生在caspase-3增高前,30min时胞浆内CytC水平即明显增加(P<0.05),3h胞浆内CytC水平超过线粒体内,而线粒体内CytC水平进行性减少。结论:50μmol/L谷氨酸可诱导海马神经元凋亡,凋亡机制可能是通过损伤线粒体膜,使CytC易位释放入胞浆激活caspase级联反应而致。
- 束晓梅李振宏陈雪梅杜淑珍
- 关键词：神经元凋亡谷氨酸半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3细胞色素C
- Adv-CT1转染对神经元的作用被引量：1
- 2010年
- 目的观察重组腺病毒心肌营养素1(recombinant adenovirus cardiotrophin-1,Adv-CT1)对谷氨酸(glutamate,Glu)诱导损伤神经元的保护作用。方法分离、培养新生Wistar大鼠神经元细胞,将细胞分为单纯谷氨酸损伤组、Adv-CT1转染组及正常对照组;利用台盼蓝染色技术检测神经元细胞存活率;采用TUNEL原位细胞凋亡检测技术检测神经元细胞凋亡率。结果谷氨酸损伤第1、2及3天,单纯谷氨酸损伤组细胞存活率(77.4%、72.7%、67.0%)较Adv-CT1转染组(84.8%、78.5%、74.0%)明显降低(P<0.05);单纯谷氨酸损伤组细胞凋亡率(2.7%、5.5%、6.8%)较Adv-CT1转染组(1.5%、2.0%、3.2%)明显增高(P<0.05)。结论 CT1转染可减少谷氨酸损伤诱导的神经元细胞凋亡发生,促进损伤神经元细胞存活,对损伤的神经元细胞具有保护作用。
- 李同欢李振宏杜淑珍束晓梅
- 关键词：神经元细胞心肌营养素1凋亡
- CT-1基因修饰的NSCs移植对SE后脑损伤修复的研究
- 目的：本实验目的是观察心肌营养素1(CT1)修饰的神经干细胞(NSCs)脑内移植后在宿主体内存活、迁移和分化情况，及对癫痫持续状态(SE)后脑损伤的修复作用。
方法：1．原代培养NSCs，将重组腺病毒心肌营养素...
- 杜淑珍
- 关键词：脑损伤修复神经干细胞脑内移植神经细胞凋亡海马神经元
- 文献传递
