武刚
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- Asia1型口蹄疫病毒P1基因的原核表达及其抗血清的制备
- 2011年
- [目的]研究Asial型口蹄疫病毒P1基因原核表达及其抗血清的制备。[方法]利用基因克隆技术获得Asia1型口蹄疫病毒(FM-DV)的P1基因,然后将P1基因重组到pET-32a(+)质粒中;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导及蛋白纯化后,进行SDS-PAGE分析;将重组菌BL21培养物用超声波裂解,对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。[结果]获得了重组性阳性克隆;SDS-PAGE结果表明在105 kD处出现了目的条带;Western-blot分析表明,抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶5 120,[结论]为建立FMDV的血清学诊断方法及其基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 武刚王洪梅刘晓王立群于力仲跻峰何洪彬
- 关键词：P1基因原核表达抗血清
- 口蹄疫诊断技术研究进展被引量：6
- 2011年
- 口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,及时准确的诊断是防制口蹄疫的重要环节。诊断口蹄疫的方法可分为临床诊断、生物学实验、血清学诊断、分子生物学检测技术及环介导等五类技术,每类技术中又包括数个具体技术。论文对其优缺点进行比较,并对口蹄疫诊断技术研究进行了展望。
- 武刚王洪梅刘晓宋玲玲陈莉莉仲跻峰何洪彬
- 关键词：口蹄疫
- 抗口蹄疫病毒RNAi转基因家畜的制备方法
- 本发明公开了一种通过表达抗口蹄疫病毒RNAi获得抗口蹄疫转基因家畜的方法：是将携带shRNA碱基序列及GFP报告基因的抗口蹄疫病毒RNAi重组Lenti-virus载体线性化并转染正常家畜的胎儿成纤维细胞，利用报告基因G...
- 何洪彬王洪梅刘晓武建明杨宏军宋玲玲高运东侯明海武刚仲跻峰
- 文献传递
- 抗口蹄疫病毒RNAi转基因家畜的制备方法
- 本发明公开了一种通过表达抗口蹄疫病毒RNAi获得抗口蹄疫转基因家畜的方法：是将携带shRNA碱基序列及GFP报告基因的抗口蹄疫病毒RNAi重组Lenti-virus载体线性化并转染正常家畜的胎儿成纤维细胞，利用报告基因G...
- 何洪彬王洪梅刘晓武建明杨宏军宋玲玲高运东侯明海武刚仲跻峰
- 文献传递
- Asia1型口蹄疫病毒P1基因的原核表达及其抗血清的制备(英文)
- 2010年
- [目的]研究Asial型口蹄疫病毒P1基因原核表达及其抗血清的制备。[方法]利用基因克隆技术获得Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)的P1基因,然后将P1基因重组到pET-32a(+)质粒中;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导及蛋白纯化后,进行SDS-PAGE;将重组菌BL21培养物用超声波裂解,对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。[结果]获得了重组性阳性克隆;SDS-PAGE结果表明在105kD处出现了目的条带;Western-blot分析表明,抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶5120。[结论]该研究结果为建立FMDV的血清学诊断方法及其基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 武刚王洪梅刘晓王立群于力仲跻峰何洪彬
- 关键词：ASIA1型口蹄疫病毒P1基因原核表达抗血清
