王娟
- 作品数：12 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛞蝓提取物抗肺癌的作用机制研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨蛞蝓提取物(EL-3)抗肺癌的作用机制。方法 (1)溴化尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法观察EL-3对人源性肺癌A549细胞的掺入抑制率;(2)吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色荧光显微镜,观察EL-3诱发A549凋亡细胞的形态,计数凋亡细胞;PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞周期和凋亡率。(3)DNA琼脂糖凝胶电泳法,观察凋亡细胞"梯形"DNA条带;(4)免疫组化DAB染色法观察EL-3对PCNA、VEGF、CD31的蛋白表达的影响。结果 (1)单用蛞蝓提取物100μg/mL浓度的EL-3对人肺癌细胞A549核酸合成抑制率(IR)高达63.59%;与空白对照组(0)和溶媒对照组(7.54%)比较差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为28.53μg/mL;(2)与化疗药合用有增效作用:EL-3与顺铂合用能显著提高顺铂对A549细胞的核酸合成抑制率:EL-3低、中、高剂量组,使单用DDP的IR由14.01%分别提高到44.5%、48.96%和67.05%(P<0.01);IC50为20.62μg/mL;EL-3与紫杉醇合用能显著提高紫杉醇对A549细胞的核酸合成抑制率。EL-3低、中、高剂量组使单用TAX对A549细胞的IR由21.79%,分别提高到58.35%、66.13%和73.67%,差异有统计学意义(P<0.05),IC50值为7.41μg/mL;(3)EL-3能有效地诱导A549细胞凋亡;(4)EL-3具有抑制裸鼠移植瘤细胞PCNA和VEGF及CD31蛋白表达作用。结论 EL-3抗肺癌的作用机制是多靶点复合性的有:(1)抑制肺癌细胞核酸合成;(2)诱导肺癌细胞凋亡;(3)抑制癌灶的血管生成和癌细胞对血管壁的黏附。
- 谢金魁曹建国张安强王娟
- 关键词：蛞蝓肺癌细胞凋亡裸鼠
- DJ-1在肿瘤中作用的研究进展被引量：6
- 2011年
- DJ-1基因是一种新的线粒体依赖癌基因。当前在帕金森病领域,对DJ-1基因的研究较多,认为其与人类家族性早发型帕金森病相关。近来研究发现DJ-1基因与人类多种恶性肿瘤的发生、进展及预后等密切相关,可作为癌症发生的预警标志物,但也有DJ-1在肿瘤中低表达的报道。
- 王娟谭晖苏琦
- 关键词：DJ-1肿瘤自体吞噬
- DADS通过MAPK和PI3K/Akt信号通路下调Mcl-1诱导白血病细胞凋亡被引量：3
- 2011年
- 目的:二烯丙基二硫(DADS)为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,本文探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)、3-磷酸肌醇激酶(PI3K/Akt)信号通路和Bcl-2家族成员在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:利用流式细胞术检测DADS诱导的白血病细胞凋亡,Western blot研究MAPKs和PI3K/Akt信号通路在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的变化及对Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达的影响。结果:DADS呈浓度和时间依赖性地诱导人白血病HL-60细胞凋亡,在此过程中ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路被抑制,而p38MAPK信号通路被激活,ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路通过降低Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)和升高Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,而p38MAPK则不是通过调控Mcl-1和Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,进一步利用RNA干扰技术沉默Mcl-1基因可增加DADS对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。结论:MAPK和PI3K/Akt信号通路通过下调Mcl-1的表达参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡作用。
- 谭晖吉晓霞易岚夏红王娟何洁凌晖苏琦
- 二烯丙基二硫对K562细胞生长抑制和促凋亡的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对人白血病K562细胞增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响。方法采用CCK-8技术检测细胞存活率,进行细胞形态学观察,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测DADS对细胞凋亡及周期的影响。结果 DADS能有效地抑制人白血病K562细胞增殖,15、30、60、120和240μmol/L DADS作用于K562细胞48h后,抑制率分别为26.3%、58.2%、44.7%、62.6%和75.6%。Hoechst形态学观察呈现典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳上呈现出凋亡特征性的梯状条带,流式细胞仪检测可见亚二倍体峰并阻滞细胞于G2/M期,30、60和120μmol/L DADS作用于K562细胞12h后,Annexin V/PI双标记法检测早期凋亡细胞率分别为18.59%±0.81%、20.85%±0.65%、23.5%±1.1%(P<0.05)。结论 DADS呈浓度依赖性抑制K562细胞生长,其机制与诱导细胞凋亡并阻滞细胞于G2/M期有关。
- 谭晖吉晓霞王娟何洁彭娟苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫K562细胞凋亡细胞周期阻滞
- 6,8-二-三氟甲基-5-羟基-7-乙酰氧基白杨素的抗胃癌作用被引量：1
- 2011年
- 目的研究6,8-二-三氟甲基-5-羟基-7-乙酰氧基白杨素(dFMAChR)的体外抗胃癌作用。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞。MTT比色法测定细胞活性。PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率。WesternBlot检测细胞NF-κB、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 dFMAChR显著抑制体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞活性,呈剂量依赖性;dFMAChR有效诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡;dFMAChR下调NF-κB(p65)、Bcl-2蛋白表达,同时,上调Bax蛋白表达,呈浓度依赖性。结论 6,8-二-三氟甲基-5-羟基-7-乙酰氧基白杨素具有抗胃癌作用,其机制可能与其抑制NF-κB活化、下调Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达相关。
- 秦勇张海涛王娟
- 关键词：胃肿瘤白杨素
- 重组血管基膜衍生多功能肽抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成
- 2008年
- 目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽rVBMDMP对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞和人胚肝L-02细胞,MTT法测定不同浓度的rVBMDMP对HepG2细胞的选择性抑制增殖作用;人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治疗实验评价rVBMDMP体内抗人肝癌作用;CD31免疫组化方法分析rVBMDMP处理的HepG2裸鼠移植瘤组织微血管面积(MVA)的比例。结果:rVBMDMP具有选择性抑制体外培养人肝癌HepG2细胞增殖作用,呈剂量依赖性,而对L-02细胞的增殖活性无明显的影响。rVBMDMP对HepG2裸鼠移植瘤生长具有显著抑制作用,呈剂量依赖性。1.0 mg/kg、3.0 mg/kg和10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率分别为:12.4%,55.8%和79.7%。其中10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率近似于20.0 mg/kg的5-氟尿嘧啶(5-FU,80.1%)。rVBMDMP处理的人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织的CD31染色阳性区域面积百分比随着rVBMDMP浓度的增加明显降低。结论:rVBMDMP对人肝癌HepG2细胞增殖和裸鼠移植瘤生长具有显著抑制作用,同时具有抗肿瘤血管生成效应。
- 刘丽华王娟郑兴曹建国
- 关键词：肝癌血管生成抑制剂
- 蛞蝓有效提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:筛选蛞蝓有效提取物,并观察蛞蝓有效提取物EL-3对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养人肺癌A549细胞和中国仓鼠肺上皮CHL细胞;MTT比色法测定细胞活性;软琼脂集落形成法检测细胞锚定非依赖性生长能力。结果:以不同提取方式获得的6种蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞增殖活性具有抑制作用,其中以EL-3抑制作用最强,其IC50值为9.4μg/mL,可作为蛞蝓有效提取物;EL-3选择性抑制A549细胞活性,其选择指数是43.6;EL-3能有效抑制A549细胞锚定非依赖性生长,呈浓度依赖性。结论:EL-3具有选择性抑制A549细胞增殖作用。
- 王娟刘丽华郑兴
- 关键词：肺癌蛞蝓
- 重组血管基膜衍生多功能肽对内皮细胞信号蛋白磷酸化水平的影响
- 2008年
- 目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽(rVMBDMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)信号蛋白磷酸化水平的影响。方法:体外培养HUVE-12细胞,C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法观察HUVE-12细胞体内管状结构形成;高通量蛋白磷酸化芯片研究rVBMDMP对HUVE-12细胞信号蛋白磷酸化水平改变。结果:C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法证实:rVBMDMP(1.0,10.0μmol/L)能有效抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞体内管状结构形成。蛋白磷酸化芯片检测结果显示:rVBM-DMP(1.0μmol/L)处理HUVE-12细胞后,死亡信号蛋白(caspase-3,death receptor 3,4,5)和整合素亚单位(integrinαv,β1,β3)磷酸化蛋白较对照组增高2倍以上,而EGFR,pEGFR,VEGFR-1和Survivin磷酸化蛋白较对照组降低50%以下。结论:rVBMDMP可能通过抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞生长和诱导凋亡发挥抗血管生成效应。
- 瞿家权王成昆刘丽华王娟童平珍封萍曹建国
- 关键词：血管生成抑制剂内皮细胞蛋白芯片
- 黄荆子乙酸乙酯提取物诱导HL-60细胞分化被引量：3
- 2008年
- 目的:观察黄荆子乙酸乙酯提出物(EVn-50)诱导人急性髓性白血病HL-60细胞分化作用。方法:体外培养HL-60细胞,MTT法测定细胞活性;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞分化形态学变化,间接免疫荧光显微镜观察细胞表面分化抗原CD11b表达。结果:EVn-50抑制HL-60细胞活性,其IC50值为6.29μg/mL,与全反式维甲酸(ATRA)10.35μg/mL相比较强;EVn-50具有诱导HL-60细胞向粒细胞系分化并表达分化抗原CD11b的作用,其阳性表达率呈剂量依赖性升高。结论:EVn-50具有诱导HL-60细胞分化的作用。
- 童平珍田英刘丽华王娟罗招阳
- 关键词：分化
- 二烯丙基二硫下调DJ-1抑制人白血病HL-60细胞增殖及诱导分化被引量：1
- 2015年
- 目的研究二烯丙基二硫(DADS)通过下调DJ-1对人白血病细胞系HL-60增殖抑制及诱导分化的影响。方法通过细胞形态法观察细胞分化;Western blot及免疫细胞化学检测DADS对HL-60细胞DJ-1表达的影响;针对DJ-1mRNA序列设计合成siRNA转染人白血病细胞HL-60,Western blot检测基因干扰效果;利用MTT法及间接免疫荧光检测DADS及DJ-1沉默对HL-60细胞的生长及细胞分化的影响。结果 DADS可以诱导HL-60细胞向成熟粒细胞系样分化。DADS呈时间依赖性抑制DJ-1的表达(P<0.05),DJ-1干扰组细胞生长减慢(P<0.05),与DADS共同作用后可诱导HL-60细胞分化。检测细胞生长情况发现干扰组细胞生长减慢(P<0.05)。结论 DADS通过下调DJ-1抑制细胞增殖并诱导HL-60细胞分化;干扰DJ-1基因可以增强DADS对HL-60细胞的增殖抑制诱导分化作用。
- 王娟杨叶宁秦晶唐玉娴李清叶苏琦谭晖
- 关键词：DJ-1DADS诱导分化基因沉默增殖
