赖永长
- 作品数：8 被引量：33H指数：3
- 供职机构：中山大学中山眼科中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大黄酸对体外大鼠皮质神经元突起长度及微管相关蛋白2mRNA表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究大黄酸(RH)对大鼠皮质神经元的营养作用,并初步探讨其相关机制。方法体外DMEM/F12+0.4%B27培养新生大鼠皮质神经元,应用神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白2(MAP2)免疫细胞化学染色法鉴定神经元。神经元细胞加入RH 2,4和8μmol·L-1作用72 h,计算神经元平均突起长度;或分别同时加入Trk受体拮抗剂K252a 50 nmol·L-1和PI3K抑制剂LY294002 10μmol·L-1测量神经元平均突起长度。MTT法检测细胞存活,并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测MAP2 mRNA表达。结果 NSE及MAP2免疫荧光染色结果显示,绝大多数细胞呈阳性反应,所培养的细胞90%以上为神经元。MTT和LDH检测结果表明,与溶媒对照组相比,RH2,4和8μmol·L-1能明显提高神经元存活率(P<0.01);平均突起长度明显增加(P<0.01)。与RH8μmol·L-1组相比,同时加入K252a 50 nmol·L-1或LY294002 10μmol·L-1,平均突起长度明显缩短(P<0.01)。与溶媒对照组相比,RH 2,4和8μmol·L-1组MAP2 mRNA表达量明显增加(P<0.01)。结论 RH对新生大鼠皮质神经元具有神经营养作用,能促进神经元突起的生长和提高神经元的存活率。RH神经营养作用可能部分通过激活Trk受体,继而激活Ras/PI3K/PKB通路而发挥的。
- 鄢黎周晓雯周星赖永长罗焕敏
- 关键词：大黄酸神经营养碱性成纤维细胞生长因子磷脂酰肌醇3激酶
- 青蒿素在制备防治神经性疾病药物中的应用
- 本发明公开了青蒿素及其衍生物在制备防治神经性疾病药物中的应用。本发明以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12 神经细胞株、视网膜神经细胞株 RGC‑5和原代皮质神经元为代表作为实验对象，以硝普钠、双氧水摸拟诱导神经细胞的氧化应激和...
- 郑文华周旋和孟茜王曰康汪海涛张浪闫凤侠赖永长
- 文献传递
- 青蒿素在制备防治神经性疾病药物中的应用
- 本发明公开了青蒿素及其衍生物在制备防治神经性疾病药物中的应用。本发明以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12神经细胞株、视网膜神经细胞株RGC-5和原代皮质神经元为代表作为实验对象，以硝普钠、双氧水摸拟诱导神经细胞的氧化应激和细胞...
- 郑文华周旋和孟茜王曰康汪海涛张浪闫凤侠赖永长
- 阿魏酸对bFGF诱导PC12细胞分化的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨阿魏酸在低浓度碱性成纤维生长因子(bFGF)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12细胞)分化的作用及其初步机制。方法:在0 ng/mL或1 ng/mL bFGF条件下培养PC12细胞,以PC12细胞的突起长度及诱导率确定药效。结果:阿魏酸在无bFGF的情况下不能诱导PC12分化,但在低浓度bFGF(1 ng/mL)情况下,与bFGF(1 ng/mL)对照组比较可明显诱导PC12细胞分化(P<0.01),这种作用能被有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD98059所抑制。结论:阿魏酸可增强bFGF诱导PC12细胞分化,其机制可能与MAPK信号通路有关。
- 林炼峰肖飞赖永长苏锯年罗焕敏
- 关键词：阿魏酸PC12细胞突起生长BFGF
- 大黄素甲醚对体外新生大鼠皮质神经元的营养作用被引量：8
- 2011年
- 目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10 ng/mL)组。显微镜观察各组皮质神经元的形态,利用软件统计神经元平均突起长度;MTT法检测神经元的存活情况;RT-PCR检测MAP-2表达量。加入Trk受体抑制剂或腺苷受体抑制剂单独作用或与大黄素甲醚相互作用,检测突起长度变化。结果与溶媒对照组相比,培养3d后的大黄素甲醚1、2、4μmol/L剂量组均可延长神经元的存活时间,促进神经元突起生长,增加MAP-2 mRNA的表达量。加入Trk受体抑制剂能抑制大黄素甲醚对神经元的影响,而加入腺苷受体抑制剂则无影响。结论大黄素甲醚对新生大鼠皮层神经元具有神经营养作用。
- 苏钜年赖永长皮婷薛小燕林炼峰罗焕敏
- 关键词：大黄素甲醚皮质神经元神经营养突起生长
- 芦丁对神经细胞氧化损伤的保护作用被引量：11
- 2014年
- 目的:考察芦丁(RUT)对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)致神经细胞损伤的保护作用,并探讨其作用的信号通路。方法:通过不同剂量SNP处理PC12细胞,建立细胞损伤模型;采用噻唑蓝(MTT)法考察RUT对细胞存活的影响;以Hoechst Stain、PI Stain观察细胞形态;以蛋白印迹(Western blot)检测细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化水平;在原代皮质神经元上验证RUT的神经保护作用。结果:MTT结果显示SNP能剂量依赖性地降低PC12细胞的存活,25μg/mL的RUT能显著增加SNP(800μmol/L)处理后PC12细胞的存活率(P<0.05)。Hoechst Stain、PI Stain证实RUT能显著减少PC12细胞的死亡。Western blot结果显示RUT能显著促进ERK1/2的磷酸化,在皮质神经元上也证实了RUT的保护作用。结论:RUT对SNP诱导神经细胞损伤具有显著的保护作用,其神经保护作用可能是通过ERK1/2信号通路介导的。
- 张浪赖永长汪海涛王日康孟茜郑文华
- 关键词：芦丁氧化应激神经元损伤神经退行性疾病
- 去痴灵对阿尔茨海默病模型动物的预防性作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨去痴灵(广东海风藤、五味子、石菖蒲等)对阿尔茨海默病(AD)动物模型的预防作用。方法昆明种小鼠经皮下注射D-半乳糖120 mg/(kg·d)和灌胃三氯化铝20 mg/(kg·d)联合造模10周;造模第7周开始,试药组同时给予低、中、高剂量去痴灵分别为2.3 g/(kg·d)、4.6 g/(kg·d)、9.2 g/(kg·d)至第10周;通过Morris水迷宫和跳台测试小鼠学习记忆,RT-PCR测定β-淀粉样蛋白前体(APP)mRNA表达;采用HE染色、Bielschowsky改良法染色及Aβ免疫组化染色观察小鼠脑组织形态学变化。结果与模型对照组比较,去痴灵各剂量组小鼠逃避潜伏期缩短、平台所在象限时间百分比和穿越平台次数增加(P<0.05),跳台错误次数明显减少、APP mRNA相对含量明显降低(P<0.01),海马神经元排列整齐,结构完整,染色均匀,胞质与胞核清晰可辨,神经原纤维缠结和老年斑数目明显减少,无变性样斑块。结论去痴灵对D-半乳糖和三氯化铝联合制备的AD模型具有一定的预防作用。
- 赖永长侯军代张晓裕罗焕敏
- 关键词：阿尔茨海默病学习记忆Β-淀粉样蛋白小鼠
- 原儿茶酸对新生大鼠皮质神经元存活及突起生长的影响被引量：11
- 2011年
- 目的:研究原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)对新生大鼠皮质神经元存活及突起生长的影响。方法:体外培养新生大鼠皮质神经元,通过细胞形态学观察、神经元细胞活力检测、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)渗漏量的测定和有突起神经元数目及平均突起长度定量分析,观察不同剂量的原儿茶酸对神经元的营养作用。结果:与溶媒对照组比较,原儿茶酸低、中、高剂量(16、32、64μmol/L)组神经元活力增强,LDH渗漏量减少,有突起的神经元数目增多,神经元突起增长,神经网络更发达,并有一定的量效关系。结论:原儿茶酸能促进大鼠皮质神经元的存活及突起生长。
- 薛小燕林炼峰肖飞皮婷赖永长罗焕敏
- 关键词：原儿茶酸大鼠皮质神经元神经营养作用
