于峰祥
- 作品数:14 被引量:21H指数:3
- 供职机构:南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项江苏省农业科技自主创新基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 猪miR-146b前体序列SNP位点在不同猪群中的分析
- 引言 MicroRNAs (miRNAs)是一类长度约为22nt的非编码RNA,它主要通过与靶基因的3'UTR结合从而调控靶基因.miR-146b在细胞的增殖、迁移及脂肪的沉积中有着非常重要的作用.之前有研究报道了miR...
- 李伯江翁茜楠于峰祥宁彩波刘京鸽陈杰吴望军刘红林
- 关键词:SNP
- 硫化物醌氧化还原酶定向表达载体的构建及细胞转染表达检测
- 2015年
- 为建立硫化物醌氧化还原酶(SQR)的肠道定向表达载体,同时通过转染小鼠肠道上皮细胞确定载体的有效性,本试验采用重叠PCR、中间载体法、酶切连接法获得重组载体,通过脂质体转染法将重组载体转入小鼠肠道上皮细胞,并鉴定重组载体的特异性表达。结果显示,成功构建了以肠脂肪酸结合蛋白质(IFABP)为启动子的SQR肠道定向表达载体pc DNA3.1(-)-IFABP-SQR-GFP,并在小鼠肠道上皮细胞中检测到表达的融合绿色荧光蛋白质(GFP)。表明IFABP启动子能够在肠道细胞中定向启动SQR的表达。
- 于建宁杨燕燕于峰祥时小艳徐小波王公金
- 关键词:肠上皮细胞
- FoxO1参与氧化应激引起的猪卵巢颗粒细胞凋亡
- 引言 卵泡在发育的过程中,大多数的卵泡发生闭锁,仅有少数的卵泡发育成熟并最终排卵.而卵泡闭锁主要是由于颗粒细胞的凋亡引起的.研究表明,氧化应激可通过许多细胞信号通路引起细胞的凋亡.FoxO1是Forkhead box t...
- 翁茜楠李伯江于峰祥刘凯清李荣阳申明吴望军刘红林
- 关键词:FOXO1氧化应激颗粒细胞凋亡
- 硫化物醌氧化还原酶基因载体构建及其转基因工程乳酸菌菌株
- 本发明涉及硫化物醌氧化还原酶基因载体(pMG36e-SQR-Myc)构建及其转基因工程乳酸菌菌株,属于生物技术领域。选用pcDNA3.1-SQR-Myc真核表达质粒为最初原材料,将SQR-Myc基因片段,连接于pMG36...
- 于建宁王公金徐小波潘伟芹于峰祥李燕陈哲
- 文献传递
- 猪UCP3基因第4内含子BccⅠ多态性检测及其与胴体和肉质性状的关联分析被引量:5
- 2012年
- 为研究UCP3基因与猪胴体和肉质性状的相关性,采用测序结合PCR-RFLP技术检测UCP3基因内含子4内单核苷酸多态性(SNP),并分析SNP在6个国内外猪种内的多态性分布。结果表明,首次发现一处由A→G突变导致的BccⅠ多态位点。该多态位点基因频率和基因型频率在国内外猪种的分布存在较大差异,在国外猪种中,G等位基因频率较高,地方猪种的A等位基因频率较高。相关性分析结果表明,在长白猪群中,UCP3基因与6~7肋背膘厚有极显著相关性(P<0.01)。在商品猪群内,UCP3基因与6~7肋背膘厚和肌内脂肪含量极显著相关(P<0.01),而且在腰荐结合处,AG基因型个体背膘厚显著高于GG型个体(P<0.05)。因此推测,UCP3基因可能是影响猪脂肪性状的分子育种标记。
- 陈哲于峰祥于建宁徐小波王公金徐宁迎
- 关键词:多态性胴体性状肉质性状
- 硫化物醌氧化还原酶肠道定向表达载体及其细胞系
- 本发明涉及硫化物醌氧化还原酶肠道定向表达载体及其细胞系,属于生物技术领域。将SQR基因插入真核表达载体pcDNA3.1(-),构建慢病毒重组载体Lanti4-blockit-IFABP-SQR-GFP,将其感染原代培养的...
- 王公金于建宁徐小波于峰祥陈哲
- SQR基因在大肠杆菌和乳酸菌中的表达被引量:2
- 2012年
- 为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pMG36e-SQR-Myc的构建及其在大肠杆菌DH5a和乳酸菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pMG36e与目的片段SQR-Myc,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过KCM法转化到大肠杆菌DH5a中,提取所得到阳性大肠杆菌菌株质粒pMG36e-SQR-Myc进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸菌MG1363中,采用SDS-PAGE电泳和Western-blotting检测SQR蛋白质在其中的表达情况。结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pMG36e-SQR-Myc被成功构建,目的蛋白质SQR在大肠杆菌和乳酸菌MG1363中被成功检测到。因此,乳酸菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)。
- 潘伟芹于建宁王公金徐小波于峰祥李燕
- 关键词:乳酸菌
- SQR基因在Nisin抗性乳酸乳球菌中的表达
- 2014年
- 为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pLEB590-SQR的构建及其在乳酸乳球菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切载体pLEB590与目的片段SQR,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过电转化法转化到乳酸菌中,提取所得到的乳酸乳球菌质粒pLEB590-SQR进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸乳球菌MG1363中,在含有Nisin(乳酸链球菌素)的选择培养基中筛选阳性克隆,采用SDS-PAGE电泳和Western杂交检测SQR蛋白质的表达情况。最后检测重组质粒在MG1363中的遗传稳定性。结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pLEB590-SQR构建成功,从MG1363中成功检测到目的蛋白质SQR的表达,携带pLEB590-SQR的MG1363遗传稳定性达90%以上。乳酸乳球菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)。
- 于建宁潘伟芹王公金徐小波李燕于峰祥
- 关键词:乳酸菌
- 硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 探讨SQR基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc的构建及其在真核细胞中的表达。根据已知荚膜红杆菌SQR基因序列设计5'端和3'端引物,采用PCR方法获得SQR基因,通过pMD-18T载体构建得到中间质粒pMD-18T-SQR-Myc;采用限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ双酶切该中间质粒,将SQR基因插入真核表达载体pcD-NA3.1(-)相应酶切位点,获得重组质粒pcDNA3.1(-)-SQR-Myc;采用脂质体法瞬时转染HEK293细胞并进行West-ern blot蛋白鉴定。结果显示:该研究已成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc,质粒测序及酶切结果完全正确,并且SQR能够在HEK293细胞系中正常表达。
- 于峰祥于建宁王公金潘伟芹徐小波徐志伟花卫华刘泉
- 关键词:重组质粒真核表达
- 两种猪肌内脂肪含量测定方法的比较及其与胴体和肉质性状的相关性分析被引量:8
- 2017年
- [目的]比较分析甲醇-氯仿法(JL法)和索氏抽提法(SS法)提取肌内脂肪的效果,研究猪肌内脂肪含量与胴体质量、背膘厚、嫩度的相关与回归关系。[方法]屠宰测定了279头四元(皮杜长大)商品猪的胴体质量、背膘厚和肉嫩度,并利用索氏抽提法测定肌内脂肪含量,对肌内脂肪含量与其他性状指标进行相关性、回归及通径分析。随机挑选92份肉样,采用甲醇-氯仿法重新测定肌内脂肪含量,并与相应样本的索氏抽提法所得数据进行相关性与差异显著性分析。[结果]索氏抽提法测得的肌内脂肪湿含量和干含量之间极显著相关(r=0.996,P<0.01);甲醇-氯仿法和索氏抽提法测得的肌内脂肪湿含量之间也极显著相关(r=0.909,P<0.01),但索氏抽提法测得的肌内脂肪含量极显著高于甲醇-氯仿法(P<0.01)。相关性分析结果显示,肌内脂肪含量与胴体质量、背膘厚及嫩度均存在极显著相关性(P<0.01),背膘厚与胴体质量也存在极显著相关性(r=0.629,P<0.01),但肌肉嫩度与胴体质量、背膘厚无显著相关性(P>0.05)。回归分析结果表明:背膘厚和肉嫩度与肌内脂肪含量存在极显著的回归关系(P<0.01),而胴体质量与肌内脂肪含量不存在显著的回归关系(P>0.05)。[结论]索氏抽提法和甲醇-氯仿法均可作为有效测定肌内脂肪含量的方法,但在比较品种或个体间肌内脂肪含量差异时,需要使用同一种测定方法获得的数据;肌内脂肪含量与背膘厚、嫩度均存在显著相关和回归关系。
- 姜爱文晁哲翁茜楠李伯江于峰祥宁彩波曹言赵铭伟韦伟刘红林吴望军
- 关键词:肌内脂肪索氏抽提法