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抗锌细菌的筛选与其相关基因的克隆: 随着工业时代的发展,人源性排放已成为环境锌污染的主要来源。这不但破坏了生态系统的稳定,更经食物链富集,对人类健康造成了严重的威胁。　　从株洲冶炼集团有限责任公司厂区内部根际土壤筛选到了3株抗Zn细菌编号分别为2-69...; 刘义; 关键词：铜绿假单胞菌 16SRDNA序列

我国重金属污染现状与生物修复: 综述了我国重金属污染的现状、特点、污染物的主要来源、污染的分布规律,以及重金属污染对人类健康、土壤和作物的影响。并就目前应用生物方法治理重金属污染的提出了相应的对策,以期为重金属污染治理研究、环境决策和环境管理在宏观上提...; 何钢周再魁陈介南刘义; 关键词：重金属污染治理方法生物修复; 文献传递

铜绿假单胞菌czcCBA基因与生物修复被引量：1: 2010年; 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugionsa)的外排泵系统RND是它产生耐重金属离子胁迫的一个重要原因。阐述了编码RND外排泵czcCBA基因的作用机制,以期为下一步工作奠定基础。; 李樊刘义孙伟峰何钢; 关键词：铜绿假单胞菌 RND

恶臭假单胞菌腈水合酶βAla97影响催化己二腈的区域选择性被引量：2: 2015年; 对恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)腈水合酶(Pp NHase)催化己二腈进行研究,发现Pp NHase只能催化己二腈中1个氰基生成单酰胺产物5-氰基戊酰胺,具有区域选择性;睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)腈水合酶(Ct NHase)能催化己二腈直接生成己二酰二胺,不具有催化区域选择性。为了阐明这一区域选择性差异的机制,对Ct NHase和Pp NHaseβ亚基的氨基酸序列进行比对,结果显示同源性为94.1%,Ct NHase存在βAla97缺失。基于此分析,构建了Pp NHaseβ97位Ala的缺失突变体(ΔAla97)。利用高效液相色谱检测ΔAla97催化己二腈的产物,发现ΔAla97能将底物完全催化为己二酰二胺,表明βAla97是影响催化己二腈由5-氰基戊酰胺向己二酰二胺转化的关键氨基酸。; 张君崔文璟刘义崔幼恬周哲敏; 关键词：腈水合酶己二腈生物催化

Rhodococcus rhodochrous J1腈水合酶在大肠杆菌中的表达策略被引量：5: 2014年; 针对红球茵低分子量腈水合酶(L-NHase)在重组茵中难以表达这一问题,通过对其α亚基及调控蛋白NhlE基因的核糖体结合位点和α,β亚基间隔序列的长度进行改造,构建了重组表达栽体,实现了L-NHase及其调控蛋白NhlE在E.COli BL21(DE3)中过量表达。通过培养条件优化,得到最佳表达条件为:37℃培养茵体浓度(DD_600)到1.0时,加入终浓度为0.1 g/L的COCl_2·6H_2O,0.6 mmol/,L的IPTG,然后在24℃下诱导表达24 h。最终得到的重组蛋白粗酶液的活性为(109.9±5.5)U/mg。采用Strep-tag/Strep-Tactin亲和层析简化了L-NHase的纯化方法,本研究结果为一些难于异源重组表达的多亚基蛋白质的表达具有一定的借鉴意义。; 余越春崔文璟刘义周哲敏; 关键词：腈水合酶调控蛋白蛋白质纯化

细菌的锌抗性基因及其在生物修复中的应用被引量：6: 2008年; 随着工业时代的发展,人源性排放已成为环境锌污染的主要来源。这不但破坏了生态系统的稳定,更经食物链富集,对人类健康造成严重威胁。利用含锌抗性基因的(重组)细菌等进行锌治理是生物修复的途径之一。阐述了细菌锌抗性基因的结构、表达产物和一些相关的作用机制,展望其在生物修复方面的应用。; 刘义何钢陈介南周再魁王义强; 关键词：细菌生物修复

融合双亲短肽提高腈水合酶的热稳定性研究: 2015年; 腈水合酶（Nitirle hydratase,NHase）催化腈类物质转化为酰胺类物质,目前用于工业生产丙烯酰胺。但在催化过程中释放的热量易导致酶分子失活。研究通过蛋白质融合技术对腈水合酶进行分子改造,提高热稳定性。将2种双亲自组装肽（self-assembling peptides,SAPs）EAK16和ELK16分别融合至恶臭假单胞菌Pseudomonas putida NRRL-18668来源NHase非催化亚基β的N末端,构建出2种融合型NHase：EAK16-NHase和ELK16-NHase。经过表达、纯化后测定酶活力,发现EAK16-NHase和ELK16-NHase的酶活力分别为（426±14）U/mg和（372±12）U/mg,保留野生型酶活力的97%和85%。在50℃条件下孵育0~60 min,每5 min取样后测定残存酶活力,EAK16-NHase和ELK16-NHase酶活力半衰期（T50）分别为35 min和40 min,野生型NHase为20 min。说明融合EAK16和ELK16均能提高NHase的热稳定性。研究表明融合SAPs能在不显著影响酶活力的条件下提高酶的热稳定性。; 房月芹崔文璟刘义周丽刘中美周哲敏; 关键词：融合蛋白腈水合酶酶催化热稳定性

基因敲除技术研究进展被引量：17: 2008年; 基因中断技术是研究基因功能和实现基因的精确缺失重要手段。原核中断系统最近发展较快的是利用λ噬菌体的Red系统在细菌中进行的基因敲除技术,但多在大肠杆菌中进行;真核中断系统属PCR介导的酵母基因中断技术和RNAi干涉技术发展最快。这几种中断技术都大大简化了实验操作,缩短了实验时间,在研究生物基因组中未知基因及蛋白质的功能等领域具有诱人的应用前景。; 李樊刘义何钢; 关键词：基因敲除酵母

利用微生物治理重金属污染的几种途径被引量：4: 2010年; 综述了当前利用微生物治理重金属污染的几种途径,重点突出了利用植物内生菌途径以及尝试应用生物代谢网络手段的间接途径,同时也涉及了利用微生物基因构建转基因植物途径、植物微生物联合修复途径,以期为从事微生物环境治理、微生物冶金的科研工作者提供思路。; 李樊刘义孙伟峰何钢; 关键词：重金属污染内生菌代谢网络

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刘义