刘园园
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学政治法律医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合症病毒诱导NLRP3炎症小体形成的分子机制
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)是危害养猪业的重要病毒性传染病, PRRSV感染后常常引起猪的间质性肺炎,提示炎症因子在PRRSV的感染与致病中有十分重要的作用.最新的研究发现PRRSV感染能够诱导IL-1 β的产生,但...
- 李江南刘园园翁长江
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒IL-1Β
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒激活NLRP3炎症小体的研究
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）是由PRRS病毒（PRRSV）引起猪的以繁殖障碍、呼吸道疾病、哺乳仔猪的高死亡率、免疫抑制和...
- 刘园园
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒HUN4RNA
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究
- 2016年
- NLRP3蛋白为核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体(NLRs)家族中含有脓素(Pyrin)结构域3的蛋白,它能够与调亡相关斑点样蛋白(ASC)以及半胱氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)组成炎性小体复合物,切割pro-IL-1β和pro-IL-18使其成为成熟的IL-1β和IL-18参与炎性反应。猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的RNA能够被DDX19A解旋酶识别并激活NLRP3炎性小体,诱导炎症反应。为研究PRRSV RNA激活NLRP3炎症小体后DDX19A与NLRP3的亚细胞定位情况,本研究以PRRSV Hu N4株感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的总RNA制备的c DNA为模板,扩增了猪nlrp3基因。将其在原核细胞中表达,并采用表达的NLRP3免疫BALB/c小鼠制备了鼠源抗NLRP3多克隆抗体。此外,提取PRRSV的RNA,转染于PAMs中,36 h后分别采用抗DDX19A和抗NLRP3的多克隆抗体进行检测,激光共聚焦试验结果显示:未转染PRRSV RNA的细胞中,DDX19A和NLRP3在PAMs中呈弥散表达,无共定位现象出现,而在转染PRRSV RNA的PAMs中DDX19A和NLRP3在细胞质中呈点状分布并出现共定位现象。本研究为阐明PRRSV感染激活NLRP3炎性小体的分子机制奠定了基础。
- 王胜男刘园园胡亮李江南翁长江
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒多克隆抗体
- 生物固氮细菌的应用被引量：2
- 2010年
- 分类论述了生物固氮细菌在农业作物上、生态环境的保护上、动物消化道的固氮作用,同时分析和评价了生物固氮的研究和应用前景。
- 张苏艳刘园园李慧敏张耀相
- 关键词：生物固氮植物生态环境动物
- 关中黑猪IL-5 cDNA的克隆表达与多克隆抗体制备被引量：1
- 2013年
- 目的克隆关中黑猪IL-5 cDNA,构建该基因的不同表达质粒,获得表达的IL-5并制备其多克隆抗体。方法提取佛波酯(PHA)刺激的关中黑猪外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR克隆猪IL-5基因(sIL-5),鉴定后将sIL-5基因分别克隆到pQE30、pET-32a和pEGFP-N1中,构建重组表达质粒pQE-sIL-5和pET-sIL-5及pEGFP-sIL-5,将pEGFP-sIL-5瞬时转染PK-15细胞,将pQE-sIL-5和pET-sIL-5分别转化JM109和BL21,用1 mmol/L IPTG诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot法鉴定表达蛋白后,通过镍柱纯化目的蛋白。用纯化的BL21表达的IL-5免疫小鼠,制备其多克隆抗体,用纯化的JM109表达的IL-5通过优化的间接ELISA检测抗体效价。结果成功获得关中黑猪的IL-5基因(登录号KC660157),大小405 bp,与GenBank中猪IL-5参考序列同源性99.75%,仅25位的T变成C,但编码的氨基酸完全相同;荧光显微镜观察发现pEGFP-sIL-5在PK-15细胞中得到表达;SDS-PAGE结果显示JM109表达的目的蛋白的相对分子质量(M_r)约15 000,而BL21表达的目的蛋白M_r约30000,Western blot法检测结果表明,表达的目的蛋白均具有良好的反应原性;免疫小鼠后获得了IL-5的多克隆抗体,抗体效价最高可达1:12 800。结论克隆了关中黑猪IL-5基因片段并成功表达,获得了IL-5的多克隆抗体。
- 穆杨刘园园李亮亮刘阳尚川川周恩民
- 关键词：IL-5多克隆抗体
- PRRSV感染对猪肺泡巨噬细胞Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响被引量：3
- 2013年
- 凋亡过程的启动直接决定了细胞的"命运"。在细胞凋亡的线粒体和死亡受体信号转导途径中,Bcl-2家族成员的构成比例是凋亡调控的关键因素,尤其是Bcl-2/Bax比率是启动细胞凋亡的"分子开关"。为研究Bcl-2和Bax在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中的表达情况,为PRRSV的发病机制研究积累资料,本试验以PRRSV的易感细胞—猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)为试验材料,应用SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法检测了PRRSV感染PAM后不同时间Bcl-2和Bax的表达变化。结果表明,与对照组相比,PRRSV感染PAM后6、12h,Bax的表达下降,而Bcl-2的表达升高;且12h时与对照组相比均差异显著(P<0.05);感染后24h,与对照组相比,Bax的表达基本无变化,而Bcl-2的表达降低且与对照组存在显著差异;感染后48h,Bax的表达升高而Bcl-2的表达降低,且与对照组均差异显著。提示感染初期,PRRSV为了自身的复制使细胞处于抑凋亡状态,而病毒感染的后期增加了细胞凋亡。
- 穆杨李亮亮刘园园张冲周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒肺泡巨噬细胞BCL-2BAX
- 奶牛乳房炎的微生物学诊断及药物敏感性试验
- 2012年
- 调查陕西规模化牛场奶牛乳房炎常见病原微生物及其对药物的敏感性,为防治耐久性乳房炎提供参考。从陕西某牛场发病症状典型的乳房炎牛中,无菌操作采乳样20份,经细菌的生物学特性检验和生理生化试验,3份乳样中分离鉴定出大肠埃希菌(3/20),7份乳样中分离鉴定出金黄色葡萄球菌(7/20),14份乳样中分离鉴定出酵母菌(14/20),2份乳样中未分离出任何细菌和真菌,且6份乳样中同时分离鉴定出酵母菌和细菌(6/20)。分离细菌经抗生素敏感性试验,共同高度敏感抗生素为氯霉素、先锋噻肟、氧氟沙星等;共同耐药抗生素为环丙沙星、万古霉素、氧哌嗪霉素等,酵母菌菌对环丙沙星、万古霉素、氯霉素、先锋噻肟等抗生素均不敏感。检测确定引起该地区奶牛乳房炎的病原种类,同时筛选出这些病原敏感药物。
- 张振仓刘园园蒋朋飞陈晓霖方艳琴张会军
- 关键词：乳房炎微生物学药敏试验
- 我国农村面源污染防治法律制度研究
- 中国的农村环境保护工作起步于20世纪80年代，近年来农村环境保护取得了一定进展，但是中国农村生态状态依然严峻，农村环境污染问题普遍存在，农业生产和农村生活污染叠加，工业污染和国外废弃物纷纷转移，致使农村各种新老污染相互交...
- 刘园园
- 关键词：农村面源污染法律规制环境监管
- 文献传递
- 猪caspase-1 p20多克隆抗体制备及其在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染中的初步应用被引量：4
- 2014年
- 为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)在感染细胞中对半胱氨酸蛋白水解酶Ⅰ(caspase-1)的激活作用,本研究以PRRSV HuN4株感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)的cDNA为模板,构建caspase-1 p20蛋白的重组表达质粒,以表达的重组蛋白p20为抗原制备了兔抗猪p20的多克隆抗体。利用制备的多抗对PRRSV HuN4株(0.1 MOI)感染的PAM进行western blot检测,结果表明在PRRSV感染PAM 24 h后胞内caspase-1被大量诱导表达,同时caspase-1被水解激活并释放出p20。该研究结果为进一步阐明PRRSV感染细胞后引起IL-1β升高的分子机制研究奠定了基础。
- 刘园园李江南刘琴芳张枫张利杰黄丽穆杨翁长江
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒肺泡巨噬细胞
- PRRSV感染对猪肺泡巨噬细胞Bax和Bcl-2mRNA表达的影响
- 目的 凋亡过程的启动直接决定了细胞的'命运'.在细胞凋亡的线粒体和死亡受体信号转导途径中,Bcl-2家族成员的构成比例是凋亡调控的关键因素,尤其是Bcl-2/Bax比率是启动细胞凋亡的'分子开关'.研究发现,以ATCC ...
- 穆杨李亮亮刘园园张冲周恩民
