王朝阳
- 作品数：17 被引量：40H指数：3
- 供职机构：内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区高等学校科学研究项目国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- STAT3基因沉默对结肠癌细胞SW480凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨转染信号传导和转录激活子3(STAT3)的短发夹RNA(shRNA)对结肠癌细胞SW480凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法:设计、构建针对STAT3的shRNA真核表达载体,脂质体法转染SW 480细胞,MTT法观察细胞增殖情况,流式细胞仪检测检凋亡,QRT-PCR检测STAT3、Bcl-2、Caspase-3mRNA的变化。结果:成功构建了携带STAT3基因的shRNA的重组质粒,PCR和测序证实重组质粒构建正确。重组质粒转染结肠癌细胞后,细胞增值活性明显减弱,细胞阻滞于G1→S期,并出现早期凋亡。重组质粒转染组STAT3 mRNA的表达与对照组相比明显减弱(P<0.01),同时Bcl-2表达增强、Caspase-3mRNA表达减弱(P<0.05)。结论:STAT3 shRNA能抑制结肠癌细胞的增值,促进其凋亡,其促凋亡机制可能与STAT3基因沉默后影响Bcl-2、Caspase-3凋亡基因的表达有关。
- 刘芳王朝阳
- 关键词：SHRNASTAT3结肠癌
- KDR启动子驱动的双自杀基因对人结肠癌细胞的特异性杀伤作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基因系统CDglyTK对人结肠癌细胞SW480的特异性杀伤作用。方法用腺病毒AdKDR-CDglyTK感染表达KDR的SW480细胞和不表达KDR的LS174T细胞,观察其感染效率并以RT-PCR方法检测重组腺病毒及转基因细胞CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药5-FC及GCV处理,MTT法检测该系统对不同细胞株的杀伤效应和旁观者效应;用流式细胞术观察细胞内DNA含量和细胞周期的变化。结果携带双自杀基因和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95%以上的受感染SW480和LS174T细胞中有GFP表达。RT-PCR检测发现SW480细胞有目的基因的表达,而LS174T细胞无表达。在前药应用下,已转染腺病毒的SW480和LS174T细胞表现出对前药不同的敏感性:表达KDR的SW480细胞对前药具有较高的敏感性,而不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P<0.01)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该系统有明显的旁观者效应。用流式细胞仪测定给药组出现典型的凋亡峰,细胞周期显示治疗组细胞G0-G1期比率增多,S期细胞减少。结论KDR启动子可调控双自杀基因体系选择性杀伤人结肠癌SW480细胞,抑制其增殖并诱导细胞凋亡。
- 王朝阳黄宗海李强姚晓军俞金龙历周
- 关键词：人结肠癌细胞KDR启动子自杀基因
- STAT3靶向短发夹RNA干扰重组载体对结肠癌SW480细胞的沉默作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨STAT3基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对结肠癌SW480细胞STAT3基因的干扰作用。方法根据siRNA设计原则,构建靶向STAT3基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/STAT3),使用脂质体法转染人结肠癌细胞系(SW480),通过RT-PCR和Western印迹检测结肠癌SW480细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平。结果pGPU6/GFP/STAT3重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确。质粒成功转染SW480细胞后,该细胞的STAT3mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论成功构建靶向STAT3基因的shRNA表达载体,转染SW480细胞,能有效抑制细胞的STAT3mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供前期的实验依据。
- 王朝阳崔春晖姚晓军黄宗海
- 关键词：结肠癌STAT3RNA干扰
- 十二指肠损伤19例诊治体会
- 2013年
- 目的总结十二指肠损伤19例诊疗体会。方法回顾性分析内蒙古医科大学附属医院5年内19例十二指肠损伤患者的临床资料。结果19例患者均行手术治疗，治愈14例，死亡5例。结论上腹部外伤后特别是腹痛程度与腹部体征不相吻合时应考虑是否存在十二指肠损伤。CT扫描确诊，尽早施行手术治疗能显著降低发病率和病死率。
- 王朝阳戴朝六金山
- 关键词：十二指肠
- Ad-VEGF-GFP-CD/TK双自杀基因系统对大肠癌的生长抑制作用及微环境中细胞因子活性的影响被引量：3
- 2010年
- 目的评价重组腺病毒介导的Ad-VEGF-GFP-CD/TK双自杀基因系统对大肠癌Balb/c小鼠移植瘤的治疗作用及其引起的相关细胞因子的变化。方法Balb/c小鼠皮下接种CT26细胞,成瘤后给予双自杀基因系统治疗,计算肿瘤体积抑瘤率的动态变化,治疗结束后检测IL-2、IL-10、TNFα、IFNγ这4种细胞因子的表达水平。结果CD/TK双自杀基因系统对大肠癌的生长抑制作用明显;治疗后小鼠4种细胞因子水平均有升高,与对照组有显著差异(P<0.05)。结论重组腺病毒介导的CD/TK双自杀基因系统对荷大肠癌Balb/c小鼠的移植瘤有明显的抑瘤作用,其所导致的细胞因子的变化可能有助于加强其抗肿瘤效应。
- 姚晓军黄宗海李强王朝阳
- 关键词：自杀基因疗法大肠癌细胞因子
- 不同腹腔镜下手术治疗肥胖合并2型糖尿病患者的临床疗效比较被引量：2
- 2016年
- 目的比较腹腔镜胃旁路术(LRYGB)和腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗肥胖合并2型糖尿病患者的临床疗效。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月内蒙古医科大学附属医院收治的腹腔镜下手术治疗的78例肥胖合并2型糖尿病患者的临床资料,根据不同手术方法分为LRYGB组(n=42)和LSG组(n=36)。观察两组患者手术前后体质指数(BMI)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素功能指数(HOMA-β)、空腹血糖、餐后2 h血糖、总胆固醇和空腹C肽以及并发症发生情况。结果术后12个月,LRYGB组BMI、Hb A1c、HOMA-IR、空腹血糖和餐后2 h血糖低于LSG组[(25.43±2.53)kg/m^2比(27.58±2.14)kg/m^2,(7.46±0.92)%比(7.98±0.78)%,(3.56±1.05)比(4.56±0.98),(7.65±1.48)mmol/L比(8.23±1.06)mmol/L,(13.25±2.65)mmol/L比(14.82±3.12)mmol/L],HOMA-β高于LSG组[(89.47±8.42)比(81.58±10.47)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与LSG相比,LRYGB可降低肥胖合并2型糖尿病患者的体质量,改善胰岛功能并降低血糖水平。
- 王玉杰王朝阳
- 关键词：肥胖
- CD/TK双自杀基因系统对Balb/c小鼠大肠癌的杀伤作用被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨腺病毒介导的以血管内皮生长因子(VEGF)启动的CD/TK双自杀基因对Balb/c小鼠大肠癌的杀伤作用。方法:将Ad-VEGF-CD/TK在293细胞中包装、扩增、纯化、鉴定,用CT26细胞通过皮下注射法建立荷大肠癌Balb/c小鼠模型,随机选取30只荷瘤小鼠分为治疗组和对照组,每组15只小鼠。治疗组小鼠使用重组腺病毒和5-FC、GCV两种前药治疗,对照组注射生理盐水。记录两组小鼠不同时间点肿瘤生长体积,计算抑瘤率,3周后处死小鼠,取瘤,切片行TUNEL原位凋亡检测。结果:治疗组与对照组相比,治疗前肿瘤体积差异无统计学意义,第7、14、21天肿瘤体积差异有统计学意义(P<0.05),治疗组肿瘤体积较对照组明显变小,生长受抑制,第7、14、21天的抑瘤率分别为69.5%、75.1%、84.3%,TUNEL原位凋亡检测显示治疗组肿瘤细胞凋亡率较对照组明显增高,分别为(43.2±6.67)%和(2.4±0.91)%。结论:VEGF启动的CD/TK双自杀基因系统对Balb/c小鼠大肠癌具有明显的杀伤作用。
- 姚晓军黄宗海李强王朝阳
- 关键词：肠肿瘤自杀基因系统
- shRNA干扰MDR1基因逆转胃癌细胞多药耐药性的研究被引量：3
- 2015年
- 目的利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术沉默多药耐药基因1(multidrug resistance,MDR1),探讨其对SGC7901/L-OHP细胞株多药耐药性的逆转作用。方法采用逐步增加药物浓度法建立耐奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)的胃癌细胞株SGC7901/L-OHP,用shRNA技术沉默MDR1基因在SGC7901/L-OHP细胞中的表达,以real-time PCR检测细胞中MDR1mRNA的表达,Western blot检测细胞中P糖蛋白(P-glycopmtein,P-gp)的表达,MTT法检测转染后SGC7901/L-OHP细胞对L-OHP和5-FU的敏感性。结果shRNA沉默SGC7901/L-OHP细胞株MDR1基因后,与空白组和阴性质粒组比较,MDR1mRNA表达抑制(P<0.01),且P-gp表达下调(P<0.05)。干扰后的SGC7901/L-OHP细胞对L-OHP和5-FU的敏感性显著升高(P<0.05)。结论shRNA可有效沉默SGC7901/L-OHP胃癌耐药细胞株MDR1基因的表达,提高耐药的胃癌细胞对化疗药的敏感性。
- 王晓鑫王朝阳周静
- 关键词：胃癌多药耐药SHRNA
- 袖状胃切除术对肥胖合并2型糖尿病病人糖代谢和胃肠激素的影响被引量：8
- 2017年
- 目的探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)对肥胖合并2型糖尿病病人糖代谢和胃肠激素的影响。方法前瞻性收集2012年1月—2015年1月肥胖合并2型糖尿病病人80例,将病人按完全随机数字表原则随机分为LSG组和对照组,每组40例。主要观察指标为体质量指数(BMI)、血清糖化血红蛋白(Hb A1C)、胰岛素、胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)、肠抑胃肽(GIP)和胃泌素。结果两组病人入院时BMI、Hb A1C、胰岛素水平、GLP-1和胃泌素水平差异无统计学意义(P>0.05)。但与对照组相比,治疗12个月后LSG组病人BMI显著降低[(25.48±2.49)kg·m-2vs(29.49±2.48)kg·m-2,P<0.001)];Hb A1C水平显著降低[(7.26±0.73)%vs(7.99±0.89)%,P<0.001)];胰岛素水平显著降低[(1.32±0.31)μg·L^(-1)vs(3.13±0.98)μg·L^(-1),P<0.001)];GLP-1水平显著升高[(39.85±13.56)μg·L^(-1)vs(12.58±5.32)μg·L^(-1),P<0.001];胃泌素水平显著降低[(17.46±7.46)μg·L^(-1)vs(34.73±11.49)μg·L^(-1),P<0.001]。两组病人术前术后GIP水平均差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LSG对肥胖合并2型糖尿病病人糖代谢水平和胃肠激素影响显著。
- 刘璟霞王朝阳
- 关键词：肥胖糖代谢
- shRNA沉默STAT3基因对结肠癌细胞增殖及顺铂敏感性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建携带信号转导与转录激活子3(STAT3)基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,观察pGPU6/GFP/NeoSTAT3重组质粒对HCT116细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法设计并构建稳定转录shRNA STAT3的质粒,采用脂质体法转染结肠癌HCT116细胞,Western blot法检测转染后STAT3蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖变化。重组质粒联合顺铂作用于HCT116细胞后,MTT法检测细胞存活率。结果成功构建了pGPU6/GFP/Neo-STAT3重组质粒,测序证实重组质粒构建正确。重组质粒转染HCT116细胞后,细胞增殖明显受抑制,STAT3蛋白表达降低。重组质粒联合顺铂治疗后,细胞增殖活性显著降低。结论 shRNA STAT3重组质粒能明显降低HCT116细胞中STAT3蛋白的表达,抑制细胞增殖,提高结肠癌细胞对顺铂的敏感性。
- 王朝阳王莹丁丽宏周静
- 关键词：RNA干扰结肠癌顺铂
