王钰
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
- 供职机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域重庆市研究生教育教学改革研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 家蚕卵蛋白的SDS-PAGE分析被引量：1
- 2012年
- 本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响。分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6%～12%、6%～15%两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果。结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9 mol.L-1尿素、4%CHAPS、1%DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取;6%～12%梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜。利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础。
- 姜春宝王林玲王钰王丽君
- 关键词：家蚕卵微孢子虫蛋白质提取
- 感染家蚕微孢子虫后家蚕中肠cDNA消减文库的构建及差异表达基因的功能分析
- 家蚕微粒子病（Pebrine disease）又称为胡椒病、锈病、班病等,是由家蚕微孢子虫（Microsporidia）寄生引发的一种毁灭性的传染性蚕病。家蚕微孢子虫是专性细胞内寄生的单细胞真核生物,可通过食下水平传染和...
- 王钰
- 关键词：家蚕家蚕微孢子虫CDNA消减文库差异基因丝氨酸蛋白酶实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 基于修正二次模型和三次正则化模型的近似最优梯度法
- 众所周知,梯度法具有迭代格式简单、所需存储量小、数值性能好等优点,已经成为求解大规模无约束优化问题的主要方法,并且在地质勘察、天气预报、人工智能、文本处理等领域得到了充分的应用.由于梯度法的搜索方向已固定为负梯度方向,其...
- 王钰
- 家蚕热休克蛋白70家族基因的染色体定位及表达特征被引量：6
- 2012年
- 热休克蛋白70家族(Hsp70)是非常保守的蛋白家族,每个物种的Hsp70家族都有多个成员,每个成员都可能具有特殊的功能。为了能够对家蚕Hsp70家族各成员进行科学命名和了解其特有的功能,分析家蚕Hsp70家族成员的编码基因及其在染色体上的定位,并通过实时荧光定量PCR方法检测这些基因在5龄第3天幼虫中肠、脂肪体和丝腺组织中的转录表达情况。家蚕诱导型Hsp70家族成员Bmhsp70A和Bmhsp70B的编码基因集中分布在第27号染色体上,有多个拷贝;组成型Bmhsp70家族成员的编码基因则分布在不同的染色体上,一般仅有1个拷贝。家蚕Hsp70家族基因中有10个能转录并翻译蛋白质产物的成员,还有1个能正常转录但不能正确翻译的假基因。实时荧光定量PCR结果表明:在常温(25℃)条件下,组成型Bmhsp70家族基因Bmhsc70-4和Bmhsc70-3的表达水平较高,而其它基因成员的表达水平则相对较低,诱导型Bmhsp70家族基因成员在常温下也有一定程度的基础表达;40℃热激2 h后,Bmhsp70家族所有基因的表达水平都有所升高,其中诱导型Bmhsp70家族基因Bmhsp70B和Bmhsp68的转录表达上升水平远高于组成型Bmhsp70家族基因Bmhsc70-3和Bmhsc70-4。不同表达类型的家蚕Hsp70家族基因成员在5龄幼虫中肠、丝腺和脂肪体中的表达情况不同,热激2 h后的表达变化规律也不完全相同,提示家蚕Hsp70家族成员具有各自特殊的功能。
- 王林玲林海静王钰李治周泽扬
- 关键词：家蚕
- 家蚕中肠丝氨酸蛋白酶基因对家蚕微孢子虫入侵的响应模式被引量：1
- 2013年
- 为探究接种家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)24与48 h后,家蚕中肠6种丝氨酸蛋白酶基因(serineprotease gene,sps)的表达变化趋势,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法对正常组和微孢子虫感染试验组的6个家蚕中肠丝氨酸蛋白酶基因(编号分别为sp1、sp3、sp5、sp8、sp11和sp12)进行定量分析。结果显示,与正常家蚕中肠内丝氨酸蛋白酶基因的转录水平相比,sp1、sp3、sp5和sp12在接种家蚕微孢子虫24与48 h后均上调表达,其中sp5上调最明显,接种家蚕微孢子虫24与48 h的表达量分别是对照的1.9和1.2倍;sp8和sp11在受微孢子虫感染24 h后表达上调,而48 h后表达量下降。结果表明,丝氨酸蛋白酶(serineprotease,SP)参与了家蚕中肠对微孢子虫入侵的免疫反应;不同丝氨酸蛋白酶上调倍数不同,说明不同丝氨酸蛋白酶参与家蚕免疫反应的程度不同;家蚕微孢子虫侵染48 h后,sp8和sp11出现了下调,推测微孢子虫的成功入侵抑制了sp8和sp11的表达。家蚕中肠不同丝氨酸蛋白酶在微孢子虫感染的不同时间的表达变化趋势为进一步研究丝氨酸蛋白酶家族在家蚕微孢子虫与宿主家蚕互作中的作用奠定了基础。
- 王钰党晓群李治庞敏周泽扬王林玲
- 关键词：家蚕微孢子虫丝氨酸蛋白酶实时荧光定量PCR
