苗银萍
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达
- 本研究对鸡源志贺菌IpaC基因进行了克隆、重组表达与鉴定及蛋白纯化。首先,应用PCR方法从志贺菌毒力大质粒中扩增出大小为1092 bp的目的基因,与国内外发表的10株人源志贺菌IpaC序列进行同源性分析、结果表明鸡源志贺...
- 苗银萍蒋大伟许兰菊王川庆尤晓楠李克宇
- 关键词：克隆蛋白纯化
- 文献传递
- 不同鸡源志贺菌分离菌株药敏试验研究
- 对河南省不同地区的鸡源志贺菌进行耐药性测定,本研究采用K-B纸片扩散法对34株不同的鸡源志贺菌进行药敏试验.结果显示:所有分离菌对每种抗生素的耐药率在1.76％(4/34) 97.06％(33/34)之间,平均耐药率为5...
- 蒋大伟苗银萍李克宇许兰菊
- 关键词：菌株分离纸片扩散法
- 鸡腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验研究被引量：2
- 2012年
- 为了对来自河南省部分地区的腹泻病(死)鸡进行病原确诊及了解病原对药物的敏感性,恰当采集动物病料进行细菌常规分离鉴定和药敏试验。结果共鉴定出5株鸡白痢沙门氏菌和17株鸡源志贺氏菌。分离的志贺氏菌中,痢疾Ⅰ型5株,痢疾Ⅱ型3株,鲍氏多价1株,福氏多价1株,其余7株尚未定型。每株沙门氏菌和志贺氏菌对试验鸡的致病性不同,沙门氏菌发病率为40%～80%,死亡率为10%～20%;志贺氏菌发病率为30%～100%,死亡率为0～90%。药敏试验结果显示:5株鸡白痢沙门氏菌对阿莫西林、氨苄西林、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星的耐药率均为80%(4/5),对罗红霉素、甲氧苄啶和四环素的耐药率高达100%(5/5);但对头孢唑啉、头孢曲松、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星较为敏感,敏感率分别为80%(4/5)、80%(4/5)、80%(4/5)、100%(5/5)、100%(5/5)。多数志贺氏菌对四环素、甲氧苄啶、罗红霉素耐药,耐药率分别为82.35%(14/17)、88.24%(15/17)、100%(17/17);而对头孢唑啉、头孢曲松、阿米卡星较为敏感,敏感率分别为88.24%(15/17)、94.12%(16/17)、94.12%(16/17)。由此可见,在临床上可选取庆大霉素、头孢曲松和阿米卡星作为防治鸡腹泻病的首选药物。
- 苗银萍蒋大伟许兰菊张光辉尤晓楠李克宇
- 关键词：腹泻志贺氏菌沙门氏菌药敏试验
- 鸡源志贺氏菌IpaC基因新型表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达
- 2016年
- 为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种真核信号肽,分别构建真核表达载体pGAPZA-Inu/Inv/Kil/Lys/Mat/Amy/Glu/Ser-IpaC#,然后将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行表达,并用SDS-PAGE及Western-blot检测其表达产物。结果表明:在8种重组菌表达产物的菌体沉淀中检测到大小约为60 ku的目的蛋白。说明鸡源志贺氏菌IpaC基因成功实现了在毕赤酵母的胞内表达。
- 马金玉韩志霞蒋大伟王亚宾许兰菊苗银萍孔江南
- 关键词：毕赤酵母
- 包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立
- 2011年
- 以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏菌LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1 h;最适封闭条件为37℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点.
- 邓久虎许兰菊杨永珍张丹鹤苗银萍李炜
- 关键词：LPS抗体间接ELISA
- 鸡源福氏志贺氏菌的分离鉴定及药敏试验被引量：3
- 2011年
- 为了对新郑某养鸡场鸡群严重腹泻进行病原确切诊断并提供防治依据,采集病料进行了细菌分离鉴定和药敏试验.经细菌分离培养、抹片染色镜检、生化试验,初步鉴定出5株鸡源志贺氏菌.用分离菌株攻毒后的发病比例为2/5～4/5,死亡比例为1/5～3/5.由此表明5个分离菌株均具有一定的毒力.血清学试验鉴定结果表明,5个分离菌株均为鸡源福氏志贺氏菌.药敏试验结果显示,5个分离菌株对阿莫西林等12种药物具有多重耐药性,其中4个菌株对阿米卡星和氨苄/舒巴坦较敏感.
- 张丹鹤蒋媛媛许兰菊杨永珍邓久虎苗银萍
- 关键词：福氏志贺氏菌药敏试验
- 鸡源志贺菌的分离鉴定、IpaC基因的克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备
- 志贺菌是人类感染性腹泻的主要病原体之一，也可感染人以外的灵长类动物。以往人们认为志贺菌不感染畜禽，事实上，国内外大量的资料表明志贺菌可感染猪、牛、兔、鸭、鸡等畜禽，并可引起它们发病甚至死亡。鸡志贺菌病是近些年发现的急性传...
- 苗银萍
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 文献传递
- 鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达
- 本研究对鸡源志贺氏菌IpaC片段进行了基因克隆、重组表达和蛋白纯化.应用PCR方法从志贺氏菌毒力大质粒中扩增出大小1092bp的lpaC基因.与国内外发表的10株人源志贺氏菡IpaC序列的同源性分析表明,其核苷酸序列的同...
- 苗银萍蒋大伟许兰菊王川庆李克宇尤晓楠
- 关键词：克隆蛋白纯化
- 鸡源志贺菌IpaC蛋白单抗制备及其受体的初步鉴定
- 2016年
- 为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。经过杂交瘤细胞阳性孔的筛选、单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亚型鉴定、单克隆抗体Western blot鉴定后,获得1株杂交瘤阳性细胞5A12B5。同时,通过鸡胚肠组织提取总蛋白,利用铺覆蛋白印迹技术,初步测定IpaC蛋白受体相对分子质量约为55 000。试验为IpaC蛋白检测和该蛋白与鸡肠上皮细胞之间的相互作用研究奠定基础,同时也为评估鸡源志贺菌在公共卫生等方面的重要性提供参考依据。
- 蒋大伟张彬马金玉韩志霞王亚宾许兰菊苗银萍
- 关键词：单克隆抗体受体
- 鸡源志贺菌不同分离株的血清型鉴定
- 蒋大伟苗银萍李克宇张彬王雪云许兰菊
- 关键词：细菌抗原凝集试验血清型
