陈亚波
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
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- 新城疫病毒HN蛋白与F蛋白结构域共表达对细胞融合的影响
- 新城疫(Newcastledisease，ND)是危害养禽业最严重的急性传染病之一，该病病原新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)属于副粘病毒科腮腺炎病毒属，是一种有囊膜的负链RNA病毒，在其囊...
- 陈亚波
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白F蛋白结构域细胞融合
- 文献传递
- 新城疫病毒HN蛋白抗原表位分析及结构域基因原核表达被引量：10
- 2007年
- 以本实验室构建的含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组质粒为模板,设计引物通过PCR和重叠-延伸PCR扩增,获得HNa、HNb和HNa-L-b三种抗原结构域基因片段,BamHⅠ/HindⅢ双酶切定向克隆到原核表达载体pET32c,获得重组质粒分别命名为pET32c-HNa、pET32c-HNb和pET32c-HNa-L-b。重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21,筛选出阳性克隆,诱导表达并取产物进行分析。结果表明,HNa、HNb、HNa-L-b结构域基因片段均获得了融合表达。Western-blotting分析证实表达产物HNa和HNb与NDV阳性血清具有免疫反应性。本试验结果为进一步研究HN蛋白抗原结构域的免疫原性以及HN蛋白与F蛋白在细胞融合中的相互作用奠定了基础。
- 陈亚波徐程张桂芝方维焕
- 关键词：新城疫病毒结构域抗原表位原核表达
- O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达与抗原性分析被引量：3
- 2007年
- 研究分析了O型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1与当前猪FMDV疫苗血清的免疫反应性。将VP1基因克隆至原核表达载体pET32c,并在大肠埃希菌BL21中得到了表达,Western blot分析表明该重组蛋白与豚鼠O型FMDV标准阳性血清具有良好免疫反应性。目的蛋白经纯化后用ELISA分析其与猪疫苗血清的免疫反应性,结果显示该重组VP1蛋白(rVP1)只能与部分O型FMDV疫苗血清反应。推测当前使用的不同O型FMDV疫苗毒株在VP1重要中和抗原位点G-H环(134 aa^158 aa)与C末端(200 aa^213 aa)存在较大差异。
- 徐程陈亚波方维焕
- 关键词：O型口蹄疫病毒免疫反应性疫苗毒株
- 新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析被引量：7
- 2006年
- 以含新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因的重组质粒为模板,设计特异引物进行重叠-延伸PCR扩增获得F基因的抗原结构域基因片段Fa、Fb和Fa-l-Fb,经SalⅠ和NotⅠ酶切后,定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,获得重组质粒pGEX-Fa、pGEX-Fb和pGEX-Fa-l-Fb;用定点突变方法获得重组质粒pGEX-Fa-mut.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,转化菌经IPTG诱导、提取表达产物进行蛋白电泳和免疫印迹分析.结果表明:Fa-mut、Fb和Fa-l-Fb结构域基因均获得了融合表达,表达产物与NDV阳性血清具有免疫反应性;与pGEX-Fa-mut不同,pGEX-Fa重组质粒在大肠杆菌中未能表达,且转化菌在IPTG诱导过程中未见生长,提示未经突变的Fa片段可能为毒性蛋白.三维结构预测结果显示,目的蛋白片段中均保留F蛋白中原有相应的抗原表位.
- 张桂芝陈亚波徐程张朝政方维焕
- 关键词：新城疫病毒融合蛋白结构域抗原表位原核表达
