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陈思

作品数：14 被引量：29H指数：3
供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 4篇专利
  • 1篇学位论文

领域

  • 9篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 7篇布鲁氏菌
  • 4篇布鲁菌
  • 3篇毒性
  • 3篇疫苗
  • 3篇诱饵
  • 3篇牛羊
  • 3篇自激活
  • 3篇自激活作用
  • 3篇酵母
  • 3篇酵母双杂交
  • 2篇代谢
  • 2篇代谢控制
  • 2篇蛋白
  • 2篇蛋白A
  • 2篇血清
  • 2篇血清学
  • 2篇血清学方法
  • 2篇疫苗株
  • 2篇原核表达
  • 2篇质控

机构

  • 14篇军事医学科学...
  • 4篇吉林农业大学
  • 2篇北京奶牛中心
  • 1篇吉林大学
  • 1篇吉林大学第一...

作者

  • 14篇陈思
  • 13篇王秀然
  • 12篇钱晶
  • 12篇王兴龙
  • 8篇郎需龙
  • 6篇张瑞
  • 4篇卜昭阳
  • 4篇屈海龙
  • 4篇王晓旭
  • 3篇李晓燕
  • 2篇王景龙
  • 2篇冉会玲
  • 2篇王海浪
  • 1篇卢天成
  • 1篇王凯
  • 1篇万家余
  • 1篇许春晓
  • 1篇郝芳芳
  • 1篇尹秋丹
  • 1篇周晓丽

传媒

  • 4篇中国畜牧兽医
  • 3篇中国兽医学报
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇东北师大学报...

年份

  • 1篇2016
  • 6篇2014
  • 5篇2013
  • 2篇2012
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A的克隆和原核表达被引量：7
2013年
原核表达猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。采用PCR方法,扩增ccpA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌BL21中进行诱导、表达和亲和层析纯化;经Western blotting初步评价ccpA的抗原性。重组原核表达质粒pET-28a-ccpA经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约38000,能被相关抗体所识别。因此,能成功在大肠杆菌中表达猪链球菌2型ccpA,为猪链球菌2型相关调节蛋白的免疫学研究奠定基础。
冉会玲郎需龙王兴龙张瑞钱晶陈思王秀然
关键词：猪链球菌2型原核表达
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
2013年
利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明,经序列测定证实重组诱饵质粒pSos-VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后,经检测其表达产物对cdc25H(α)酵母细胞无毒性作用,对报告基因亦无自激活作用。可以利用SRS研究与羊布鲁菌16M VjbR蛋白相互作用的蛋白,为进一步研究羊布鲁菌致病机制奠定了基础。
屈海龙王景龙李晓燕张瑞王秀然陈思钱晶王兴龙
关键词：自激活作用酵母双杂交
羊布鲁菌16M Omp25真核表达载体的构建被引量：2
2013年
利用聚合酶链式反应(PCR),以羊布鲁菌16M基因组为模板克隆Omp25基因,设计含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物序列,定向克隆到真核表达载体pCMV-HA上,构建真核表达重组质粒pCMV-HA-Omp25。经测序及双酶切验证正确,证明成功构建了pCMV-HA-Omp25真核表达质粒,为表达纯化外膜蛋白Omp25,研究其功能奠定基础。
屈海龙王海浪陈思张瑞王秀然钱晶王兴龙
关键词：真核表达
牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病多重PCR方法的建立被引量：9
2014年
试验旨在建立一种快速检测牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的多重PCR方法。根据布鲁氏菌IS711拷贝数的差异和基因序列上的缺失序列设计4对引物,优化多重PCR反应体系和反应条件,分析了PCR的特异性、灵敏度、稳定性。建立的多重PCR方法对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌均能扩增出预期片段,扩增片段大小分别为494、732、591、272bp。牛、羊、猪、犬布鲁氏菌的灵敏度分别为1.1×102、5.1×102、3.5×102、2.5×102 CFU/mL。初步应用该方法检测人工模拟的牛奶样品,灵敏度能达到1.0×103 CFU/mL。本试验建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景,对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的鉴定具有重要意义。
陈思王秀然钱晶王晓旭郎需龙王兴龙
关键词：布鲁氏菌多重PCR
布鲁菌wzt基因的原核表达及生物信息学分析
2014年
利用PCR技术克隆wzt基因并对其进行了原核表达,采用SDS-PAGE和Western Blotting进行了检验,运用Clustalx1.83和Mega5.0进行了同源性分析,在此基础上,利用Discovery Studio 2.5软件进行了结构预测,探讨了wzt基因表达产物的分子基本特征.结果表明:本研究克隆了756bp的目的片段,经原核表达得到了相对分子质量约28 000的目的蛋白,该蛋白经HisTrapTMFF亲和层析柱纯化以及Western Blotting鉴定,证明为具有His标签的外源蛋白;系统树分析表明,布鲁菌wzt蛋白属内高度保守;结构分析表明,其具有8个α螺旋、7个β折叠片层结构域.
王秀然康立恒安伟郝芳芳陈思许春晓卢天成周晓丽
关键词：布鲁菌脂多糖结构域
猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A经NF-κB/MAPK通路对巨噬细胞RAW264.7影响的研究被引量：3
2013年
通过猪链球菌2型分解代谢控制蛋白A(catabolite control protein A,ccpA)原核表达蛋白对巨噬细胞RAW264.7进行刺激,结果发现,猪链球菌2型ccpA蛋白可以调节巨噬细胞NO产生,另外该蛋白质可通过对iNOS、NF-κB、p38和ERK1/2MAPK等的调节,从而影响巨噬细胞RAW264.7对细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌。该研究为类似蛋白质对免疫细胞NF-κB/MAPK等通路调节影响及细胞因子产生条件探索建立了基础。
郎需龙冉会玲王秀然王凯卜昭阳张瑞钱晶陈思万家余王兴龙
关键词：猪链球菌2型MAPK
同时检测牛羊猪犬四种布鲁氏菌的PCR试剂盒及其制备方法和使用方法
同时检测牛羊猪犬四种布鲁氏菌的PCR试剂盒及其制备方法和使用方法，属于人畜共患传染病病原体的基因检测领域，该PCR试剂盒由PCR反应液、DNA聚合酶、阳性质控标准品和阴性质控标准品组成；PCR反应液包括鉴定牛种、羊种、猪...
王兴龙陈思王秀然钱晶郎需龙王晓旭
牛羊猪犬种布鲁氏菌多重PCR方法的建立及试剂盒研制
布鲁氏菌病（brucellosis，简称布病）是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患病。该病广泛分布于世界各地，有170多个国家存在人畜布病。2000年以后，我国人畜布病的发病率呈逐年上升的趋势，给人类健康和畜牧业发展带来了巨大...
陈思
关键词：布鲁氏菌试剂盒人兽共患病
犬布鲁氏菌菌壳疫苗的制备被引量：3
2014年
菌壳技术是一种新型的灭活疫苗制备方法,通过非变性的灭活方式保存细菌表面多个抗原表位,所制备的菌壳可作为预防细菌病的理想疫苗。本试验从噬菌体PhiX174DNA钓取裂解E基因,连接至温控原核表达载体pBV220,通过PCR在所构建的pBV220+E上扩增出蛋白裂解部件(protein lysis component,PLC),该部件包含阻遏蛋白cI857、溶菌E基因及终止序列rrnbT1T2,然后将其克隆至广宿主表达载体pBBR1MCS-2中,最终将构建的广宿主裂解质粒pBBR+PLC电转入犬布鲁氏菌RM6/66中。试验结果表明,经42℃诱导后,广宿主裂解质粒对犬布鲁氏菌RM6/66的裂解率达100%,成功制备了犬布鲁氏菌RM6/66菌壳疫苗。本试验通过菌壳技术制备的犬布鲁氏菌疫苗对预防宠物犬布鲁氏菌病起到重要作用,同时也对人兽布鲁氏菌疫苗的研制提供新策略。
钱晶尹秋丹卜昭阳陈思王兴龙王秀然郎需龙王晓旭
关键词：疫苗
布鲁氏菌菌壳疫苗株的制备方法
布鲁氏菌菌壳疫苗株的制备方法，涉及分子生物学和微生物学领域，解决了现有菌壳制备方法存在的成本高而不适合大规模生产的问题，该方法为将布鲁氏菌菌株基因组特定基因的上下游同源臂的PCR产物分别克隆至pMD18‑T Simple...
王兴龙钱晶郎需龙卜昭阳王秀然陈思
文献传递
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