娄旸
- 作品数:9 被引量:14H指数:2
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程更多>>
- 重金属汞单克隆抗体的制备及鉴定被引量:3
- 2008年
- 通过双功能螯合剂(异硫氰基-苯甲基-乙二胺四乙酸,ITCBE)使汞离子与载体蛋白(匙孔血蓝蛋白,KLH)偶联,获得了免疫抗原KLH-ITCBE-Hg(II)。以该抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞用ELISA方法筛选及有限稀释法亚克隆化,获得了5株可稳定分泌抗汞单克隆抗体的杂交瘤细胞株(E/H9、E/B2、1/F11、1/H7和B/B11)。杂交瘤细胞染色体数目在97—104之间,所分泌的抗体均为IgM、k型,其中杂交瘤细胞株E/H9、1/F11和B/B11细胞培养上清液效价分别达1:640、1:320、1:160,腹水效价分别达1:6400、1:3200、1:6400。B/B11的亲和常数为2.981×10^8L/mol,特异性试验表明:B/B11与其它金属离子的交叉反应率均小于2%,具有较高的特异性。高亲合力和高特异性的抗汞单克隆抗体在该研究中的成功制备,为建立农产品和环境中重金属汞的快速免疫检测方法奠定了基础。
- 杨凤丽朱晓霞胡白石徐丽娜娄旸刘凤权
- 关键词:汞单克隆抗体ELISA
- O,O-二甲氧基硫代磷酸酯类农药单克隆抗体
- 本发明涉及O,O-二甲氧基硫代磷酸酯类农药单克隆抗体及其制备方法,属于生物技术领域。用免疫原“3-[4-(O,O-二甲基硫代磷酰氧基)苯基]-1-丙酸-牛血清白蛋白偶联物”免疫BALB/C鼠,脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞...
- 刘凤权刘艳娄旸
- 文献传递
- 重金属汞单克隆抗体的制备方法
- 本发明重金属汞单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别重金属汞单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中汞残留的高灵敏快速检测。重金属汞离子与载体蛋白通过双功能金属螯合剂1-(4-异硫氰基苯基)-乙二...
- 刘凤权杨凤丽娄旸朱晓霞胡白石
- 文献传递
- 重金属铜单克隆抗体研制及铜、汞单链抗体三维结构模拟
- 重金属是有毒并对环境有着持久污染的物质,重金属可以在生物体内长期积累不可降解,在环境中可长时间结合在土壤或沉淀物中,随着环境的变化使金属发生移动,大大提高了它们的毒性和可吸收性。因此重金属在环境、农产品中残留检测都是非常...
- 娄旸
- 关键词:重金属单克隆抗体单链抗体
- 文献传递
- 复合免疫制备3种有机磷农药单克隆抗体的技术研究被引量:10
- 2009年
- 以α-氨基丁酸和农药中间体为原料合成了甲基对硫磷、杀螟硫磷和甲基毒死蜱3种有机磷农药人工半抗原(H1、H2和H3);通过活泼酯法将H1、H2和H3分别交联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制备免疫原和包被原。以等体积混合的H1-BSA、H2-BSA和H3-BSA复合免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备单克隆抗体获4株抗上述复合抗原的单克隆抗体,其中甲基对硫磷1株(H9/A3),杀螟硫磷2株(H9/B3、C8/H6),甲基毒死蜱1株(G7/F5)。所获4株抗体的类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链,间接ELISA法测定腹水效价均高达1×106。间接竞争ELISA法测定H9/A3、C8/H6和G7/F5细胞株的抑制中浓度(I50)分别为107.0、40.4和75.2μg.L-1,且与类似物无交叉反应。本研究建立了一种可在较短的研制周期内,通过单次细胞融合获得多种不同农药的单克隆抗体的有效方法。
- 吴芸茹王利民娄旸刘扬胡白石刘凤权
- 关键词:甲基对硫磷杀螟硫磷半抗原单克隆抗体ELISA
- 水稻白叶枯病菌gacA基因的克隆、测序及敲除研究被引量:1
- 2006年
- 根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXoo。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。蛋白质保守结构域搜索表明,GacAXoo属于LuxR家庭的一员,具有与其他GacA蛋白相似的结构。通过同源重组的方法,构建了gacAXoo的插入突变体,为下一步研究gacAXoo的功能奠定了良好的基础。
- 杨万风刘红霞娄旸胡白石许志刚刘凤权
- 关键词:水稻白叶枯病菌基因敲除
- 重金属铜单克隆抗体及其制备方法
- 本发明重金属铜单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别重金属铜单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中铜残留的高灵敏快速检测。重金属铜离子与载体蛋白通过双功能金属螯合剂1-(4-异硫氰基苯基)-乙二...
- 刘凤权娄旸刘艳徐丹
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- O,O-二甲氧基硫代磷酸酯类农药单克隆抗体
- 本发明涉及O,O-二甲氧基硫代磷酸酯类农药单克隆抗体及其制备方法,属于生物技术领域。用免疫原“3-[4-(O,O-二甲基硫代磷酰氧基)苯基]-1-丙酸-牛血清白蛋白偶联物”免疫BALB/C鼠,脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞...
- 刘凤权刘艳娄旸
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- 重金属铜单克隆抗体及其制备方法
- 本发明重金属铜单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别重金属铜单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中铜残留的高灵敏快速检测。重金属铜离子与载体蛋白通过双功能金属螯合剂1-(4-异硫氰基苯基)-乙二...
- 刘凤权娄旸刘艳徐丹
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