房华丽
- 作品数：12 被引量：12H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 底物蛋白SNVP及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种梭菌属神经毒素底物蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的梭菌属神经毒素底物蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的...
- 王慧李涛罗森王琴房华丽韩燃
- 文献传递
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 EspA和EspB蛋白的重组表达及其免疫效果
- 2013年
- 目的:通过DNA重组技术表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的EspA和EspB蛋白,并分析它们的免疫保护性。方法:采用PCR技术从EHEC O157∶H7基因组中扩增espA和espB基因,连接至pET-22b(+)载体上,转化至宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,用亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE测定其相对分子质量,免疫小鼠分析其免疫保护性。结果:重组espA和espB基因片段的测序结果与GenBank中的相应基因序列完全一致,一致性均为100%;得到了纯度为95%以上的重组EspA和EspB蛋白,免疫小鼠所得到的抗体效价均为106。结论:重组EspA和EspB蛋白获得了可溶性表达,表达的蛋白具有良好的免疫保护性,为进一步制备疫苗奠定了基础。
- 韩燃李涛王琴房华丽罗森郭峰李崭王德慧李文平王慧
- 关键词：重组蛋白免疫效果
- KPC-2型碳青霉烯酶的表达纯化及其催化抗生素水解的动力学
- 2013年
- 目的:表达纯化KPC-2型碳青霉烯酶,并研究其催化抗生素水解的酶动力学活性。方法:将KPC-2基因与pET-22b(+)原核表达载体连接后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经FF镍柱纯化后,SDS-PAGE检测蛋白的纯度;用BioTek酶联仪进一步检测其抗生素水解范围及动力学特性。结果:构建了高效表达KPC-2的工程菌,得到了纯度在90%以上的KPC-2蛋白,该蛋白能水解几乎所有β内酰胺类抗生素,其水解美罗培南等碳青霉烯类抗生素的能力较强,最适温度约为40℃,最适pH值约为6.5。结论:为进一步了解最常见的KPC功能与活性提供了重要信息。
- 刘雄张凤娇李享陈芳红房华丽王琴李涛王慧
- 关键词：细菌耐药KPC-2型碳青霉烯酶Β内酰胺类抗生素
- 突触小泡膜蛋白VAMP-2的原核表达、纯化及活性鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的克隆突触小泡膜蛋白(VAMP-2)基因,原核表达、纯化并鉴定重组蛋白VAMP-2活性。方法根据GenBank中已报道的VAMP-2基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR从小鼠的全脑组织总RNA中获得基因。将去疏水区后的基因克隆至含有N端信号肽pelB序列的原核表达载体pET-22b中,重组质粒转化BL21(DE3)Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达,表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western印迹进行鉴定,并利用金属内肽酶BoNT/B轻链对该蛋白进行生物活性分析和酶活动力学测定。结果与结论成功构建pET-22b-VAMP-2表达质粒,并转化大肠杆菌BL21(DE3)Rosetta,Western印迹证实重组蛋白VAMP-2(残基Met 1-Met 94)获得可溶性表达。重组蛋白VAMP-2可被金属内肽酶BoNT/B特异性酶解,具有良好的生物学活性。
- 罗森王琴房华丽王德慧李崭李涛王慧
- 关键词：底物原核表达
- 展示保护性抗原的细菌菌蜕及其应用
- 本发明公开了一种展示保护性抗原的细菌菌蜕及其应用。本发明保护展示保护性抗原或展示含有所述保护性抗原的融合蛋白的细菌菌蜕。所述保护性抗原可为引起手足口病的病毒的保护性抗原。所述引起手足口病的病毒可为肠道病毒或柯萨奇病毒组，...
- 王慧李涛房华丽刘雄
- 文献传递
- 底物蛋白SNVP及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种梭菌属神经毒素底物蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的梭菌属神经毒素底物蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的...
- 王慧李涛罗森王琴房华丽韩燃
- EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价
- 2013年
- 目的构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性。方法利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,经重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接构建重组融合蛋白基因(ecvp1),将该片段连接到pET-22b表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白,经Western blot鉴定其抗原性。结果pET-22b-ECVP1表达载体构建成功,融合蛋白相对分子量约为65 ku,Western blot分析表明,该融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗体特异识别。结论成功构建pET-22b-ECVP1表达质粒并诱导ECVP1融合蛋白表达,且融合蛋白具有良好的抗原性。
- 房华丽王琴罗森高翔屠伟田仁茂刘雄李涛王慧
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇B3病毒融合蛋白
- 展示保护性抗原的细菌菌蜕及其应用
- 本发明公开了一种展示保护性抗原的细菌菌蜕及其应用。本发明保护展示保护性抗原或展示含有所述保护性抗原的融合蛋白的细菌菌蜕。所述保护性抗原可为引起手足口病的病毒的保护性抗原。所述引起手足口病的病毒可为肠道病毒或柯萨奇病毒组，...
- 王慧李涛房华丽刘雄
- 文献传递
- 人β防御素1～4抑菌及盐敏感性研究被引量：4
- 2013年
- 目的对人β防御素(hBD)1～4的抑菌及盐敏感性进行测定并分析其二级结构对抑菌及盐敏感性的影响。方法圆二色谱预测hBD 1～4的二级结构,应用抑菌实验来测定抑菌效力,提高溶液中的NaCl浓度来进行盐敏感性分析。结果获得了4种hBD的圆二色谱谱图并进行分析。实验发现hBD-1抑菌活力低,抑菌谱窄,hBD-2、hBD-4抑菌活力好于hBD-1,抑菌谱也更广,但是对盐耐受力差,而hBD-3在这4种防御素中拥有最强的抑菌活性及耐盐效力。结论 4种hBD具有不同的抑菌活性和盐敏感性。防御素的理化性质与二级结构共同决定了抑菌活力及其盐敏感性。
- 郭峰李涛韩燃房华丽罗森王琴高剑峰王慧
- 关键词：抑菌活性盐敏感性圆二色谱抗菌谱
- 手足口病相关病毒VP1蛋白及其菌蜕嵌合抗原免疫效应研究
- 手足口病(Hand-food-and-mouthdisease)是由肠道病毒引起的全球性传染病,在世界各地均有不同规模的爆发流行,我国自1981年在上海始见本病,以后北京、河北、天津、福建、吉林、山东、湖北、安徽、湖北、...
- 房华丽
- 关键词：手足口病病毒包膜蛋白免疫效应
- 文献传递
