杨福春
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
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- ROCK亚型在血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用
- 目的:血管平滑肌细胞的迁移和增殖在动脉粥样硬化、血管术后再狭窄等心血管疾病中具有重要作用。影响血管平滑肌细胞的迁移和增殖的信号转导通路很多,其中在RhoA/ROCK信号转导通路中,ROCK通过使其下游的蛋白质磷酸化,间接...
- 杨福春
- 关键词:血管平滑肌细胞细胞周期信号转导
- 文献传递
- PDGF诱导大鼠主动脉平滑肌细胞迁移模型的建立被引量:4
- 2009年
- [目的]建立PDGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞(A7r5)迁移的模型。[方法]采用改良的Boyden小室法,以不同浓度(1、5、10、20、50和100 ng/mL)PDGF-BB为诱导剂,将不同浓度(1×105/mL、2×105/mL、4×105/mL)的A7r5细胞置入Boyden小室,分别培养5、7、9 h。迁移膜经Giemsa染色后,显微镜下观察迁移到下室的细胞,进行细胞计数。[结果]在无PDGF诱导时,迁移细胞数为每视野10个左右;而以10 ng/mL PDGF-BB诱导时,迁移细胞数每视野可达70个左右;当PDGF浓度达到100 ng/mL时,细胞迁移数降至每视野10个左右。随细胞浓度的增高,迁移细胞数目增加,细胞浓度为1×105/mL时,7 h迁移细胞数目为(48±8.944)个;2×105/mL细胞在5 h左右发生迁移的数目为(55±12.864)个,随时间延长而增多,在7 h前后增幅最明显,达(78±15.828)个(P<0.05);但细胞浓度为4×105/mL时,7 h迁移细胞数为(84±12.213)个(P>0.05)。[结论]以10 ng/mL PDGF-BB为诱导剂,以2×105/mL浓度接种,培养7 h建立的迁移模型为最佳。
- 崔颖白柳张金超杨福春李胜赵莹高颖
- 关键词:平滑肌细胞BOYDEN小室血小板源性生长因子
- ROCKⅠ/Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响被引量:5
- 2009年
- 目的:探讨ROCK亚型ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞(A7r5)迁移及增殖的影响。方法:利用Western blot技术检测ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCKⅠ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后及ROCK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响;使用MTT法检测ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响。结果:ROCKⅠ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCKⅠ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4%和94.7%;基因表达下调后,ROCKⅠ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别。结论:ROCKⅠ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异。
- 赵莹杨福春魏晓晴吕广艳崔颖高颖
- 关键词:ROCK血管平滑肌细胞细胞迁移增殖