王珊珊
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:北京师范大学生命科学学院细胞增殖及调控生物学实验室更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- ICF45单克隆抗体的制备及其鉴定
- 2016年
- 本研究利用RT-PCR的方法扩增出人ICF45基因片段并将其构建至原核表达载体p ET-30a,随后将此质粒转化,用IPTG诱导大量表达ICF45蛋白。利用纯化的ICF45蛋白免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,采用间接酶联免疫ELISA筛选阳性克隆,最终获得了2株分泌ICF45抗体的杂交瘤细胞。Western Blot、免疫荧光和免疫组化结果均显示其分泌的抗体能特异性识别ICF45蛋白,并且该抗体灵敏度高、特异性强。本研究获得的ICF45单克隆抗体,为深入阐明ICF45在人类细胞周期调控和肿瘤发生发展中的作用机制提供了重要的工具。
- 伊力亚尔.尼加提王珊珊王俊坡商瑜何大澄
- 关键词:蛋白纯化单克隆抗体ELISA
- ICF45相互作用蛋白的筛选及鉴定被引量:2
- 2015年
- 为了利用蛋白质组学技术,寻找可能与ICF45存在相互作用的蛋白,从而为探讨ICF45蛋白的生物学功能和作用机制提供依据,本文利用免疫共沉淀和GST-pull down技术对Hela细胞的ICF45蛋白进行富集,通过SDS-PAGE电泳寻找差异条带,并联用质谱进行蛋白鉴定。结果表明:2种实验方法共同筛选得到线粒体定位的分子伴侣HSPA9及Annexin A2与ICF45在体内可能存在相互作用。研究成果为进一步研究ICF45在细胞增殖和调控中的作用奠定了实验基础。
- 伊力亚尔王珊珊王俊坡商瑜何大澄
- 关键词:细胞生物学免疫共沉淀DOWN相互作用蛋白