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细胞色素P450 119酶突变文库的构建: P450单加氧酶参与着生物体生命活动的多种进程,在人体内主要存在于肝脏,参与药物、酒精等外源性物质的代谢,同时参与甾体、脂肪酸、前列腺素等内源性生理化合物的代谢合成。CYP119酶是P450酶系统中的一种源于硫矿硫化叶菌...; 何芳李静张春王钦; 关键词：易错PCR

突变体CYP 119 T213G催化苯乙烯不对称环氧化反应研究: 细胞色素P450单氧化酶CYP 119为最早发现的耐热酶之一,在药物和精细化学品中间体合成中具有较好的应用前景[1]。目前研究的CYP 119酶催化环氧化和羟基化反应的底物主要是苯乙烯类似物和饱和脂肪酸如月桂酸等。Mon...; 张春李静何芳王钦; 关键词：定向进化定点突变不对称环氧化; 文献传递

CYP119-T213G酶及其纯化方法: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及CYP119-T213G酶及其纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种催化效率更高的CYP119酶。本发明的技术方案是一种CYP119-T213G酶，其氨基酸序列如SEQ ID No...; 张春王钦李静郭建敏杜曦何芳; 文献传递

LPS诱导HUVEC细胞凋亡最适浓度与时间选择被引量：1: 2013年; 目的:探讨脂多糖诱导HUVEC细胞凋亡的最适浓度和时间。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC),将脂多糖(LPS)分为100、10、1、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5μg·ml-18个浓度,分别刺激0.5、1、2、6、12、24h后,采用CCK-8法观察细胞活力,荧光显微镜观察Hochest33342/PI双染后细胞形态。结果:同阴性对照组比较,药物浓度≥10-2μg·ml-1刺激24h均可引起细胞活力明显下降(P<0.05)。100μg·ml-1刺激1h,10μg·ml-1与1μg·ml-1刺激6h可引起HUVEC细胞活力下降,但12h与24hHUVEC细胞活力下降更明显(P<0.05),10-1μg·ml-1刺激12h可引起HUVEC细胞活力下降(P<0.05)。Hochest33342/PI双染可见明显核浓缩和凋亡小体的产生,甚至出现死亡现象。结论:LPS刺激后引起HUVEC细胞活力下降呈时间与剂量依赖性,综合时间与剂量考虑,10-1μg·ml-1刺激12h或24h与10-2μg·ml-1刺激24h可致理想的HUVEC细胞凋亡模型。; 周洁张红何芳丁青青张利章卓; 关键词：脂多糖细胞凋亡

细胞色素P450 119酶表达纯化的条件优化及相关性质的初步研究: 目的:优化硫矿硫化叶菌细胞色素CYP119酶在大肠杆菌中的表达及纯化条件,验证CYP119酶的活性,及研究该酶在过氧化物途径下,分别在35℃和70℃下催化苯乙烯环氧化反应的动力学性质。方法:利用基因工程技术,分别以大肠杆...; 何芳; 关键词：紫外可见光谱环氧化; 文献传递

酶标仪测定不同产地、不同组织部位紫花地丁总糖和还原糖被引量：9: 2013年; 目的比较不同产地、不同组织部位紫花地丁中多糖和还原糖量,为指导采收和进一步利用提供依据。方法采用L9(34)正交试验,以料液比、提取温度和盐酸浓度为影响因素,通过蒽酮硫酸法结合全功能酶标仪,在628 nm处测定,计算其总糖和还原糖的量。结果最佳水解条件为15%(W/V)的盐酸,1∶50的料液比,100℃水解。紫花地丁根部位的总糖和还原糖量最高,叶中量最低。泸州产紫花地丁中含有具生物活性的糖类物质高于自贡产地。结论以紫花地丁中的具生物活性的糖类物质为指标,果期采收质量较佳。; 何芳王钦张春; 关键词：紫花地丁总糖还原糖酶标仪

CYP119酶表达载体及其纯化方法: 本发明属于生物技术领域，具体涉及CYP119酶表达载体及其纯化方法。本发明要解决的技术问题是建立CYP119酶的高效表达体系。为解决本发明技术问题，本发明提供了含有CYP119酶编码基因的载体。本发明还提供了含有前述载体...; 王钦张春李静何芳肖星茂; 文献传递

CYP119‑T213G酶及其纯化方法: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及CYP119‑T213G酶及其纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种催化效率更高的CYP119酶。本发明的技术方案是一种CYP119‑T213G酶，其氨基酸序列如SEQ ID No...; 张春王钦李静郭建敏杜曦何芳; 文献传递

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何芳