卞曙光
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程重要方向项目中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 凡纳滨对虾溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达和活性检测被引量:2
- 2010年
- 原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在,经变性和复性处理后活性仍较差。研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母GS115细胞,经组氨酸营养缺陷培养基筛选和PCR检测获得转化子。对其进行连续甲醇诱导表达,利用SDS-PAGE和C端携带的6×His标签,对发酵液上清进行Western blot检测,结果表明19.3 kD左右的条带即是重组表达的溶菌酶蛋白。用溶壁微球菌平板抑菌法鉴定表达产物具有较强的抑菌能力。研究首次利用毕赤酵母真核表达系统实现对虾溶菌酶基因的可溶性表达,并且表达产物的活性良好。
- 卞曙光陈华新姜鹏张海波刘兆普秦松
- 关键词:凡纳滨对虾溶菌酶毕赤酵母分泌表达
- 除草剂草丁膦抗性基因bar作为三角褐指藻基因工程选择标记的研究被引量:5
- 2010年
- 研究了三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)对氯霉素、卡那霉素、青霉素、链霉素、潮霉素5种抗生素和一种除草剂草丁膦的敏感性,发现三角褐指藻对草丁膦非常敏感,用统计学分析法得出了其72h半致死质量浓度为22mg/L。通过基因枪法将携带草丁膦抗性基因bar的载体pSVB导入三角褐指藻细胞中,通过草丁膦筛选成功获得了抗性藻细胞,PCR检测获得阳性结果,提示草丁膦更适合用于构建安全、高效、廉价的三角褐指藻表达系统。
- 卞曙光姜鹏崔玉琳刘兆普秦松
- 关键词:草丁膦BAR基因基因工程
- 两种海洋抗菌活性物质的重组表达研究
- 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是我国对虾养殖中占绝对优势的优良品种。近年来,随着集约化高密度人工养殖时间的延长,对虾抗病力逐年降低;又加上环境污染,使病原菌增多,因而虾病频繁暴发,我国的水产养殖业...
- 卞曙光
- 关键词:分泌表达三角褐指藻草丁膦BAR基因
- 文献传递
- 小球藻Δ12脂肪酸去饱和酶基因的克隆与序列分析被引量:3
- 2009年
- 利用已报道的Δ12脂肪酸去饱和酶基因序列的保守区域,设计简并引物,通过RT-PCR的方法获得了小球藻NJ-7的内质网型Δ12脂肪酸去饱和酶基因(CvFAD2)的部分序列,然后采用RACE的方法分别克隆到5′片段和3′片段,拼接后设计特异引物扩增到全长cDNA。该基因全长为2 032 bp,ORF为1 158 bp,编码385个氨基酸,分子质量约为44 ku。根据已经得到的CvFAD2序列推导成氨基酸序列与一些已知物种的FAD2氨基酸序列相比较,同源性分别为普通小球藻(Chlorella vulgaris)75%,莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)57%,石榴(Punica granatum)57%,麻疯树(Jatropha curcas)52%。系统发育分析表明,南极小球藻CvFAD2基因与真核微藻(衣藻和普通小球藻)的FAD2基因聚在一起,介于真菌与高等植物之间,并且真核微藻FAD2基因与高等植物的同源性更高,推测其在进化上与高等植物的亲源关系更近。
- 迟晓元路延笃王明清卞曙光杨庆利秦松
- 关键词:脂肪酸去饱和酶基因克隆