李亚亚
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金:山东省“泰山学者”建设工程项目国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 异源和同源dmrt1基因过表达载体在青鳉体内的整合和表达被引量:1
- 2014年
- 利用半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)dmrt1基因和青鳉(Oryzias latipe)dmrt1基因构建过表达载体,采用显微注射技术将两种载体分别导入青鳉受精卵中,比较异源和同源dmrt1基因对青鳉胚胎孵化率的影响以及两种dmrt1基因在青鳉体内的基因整合率、基因表达率及对芳香化酶基因(cyp19a)表达的影响。结果表明,注射48 h后,两种载体均在胚胎内大量表达,注射青鳉同源性dmrt1载体的受精卵孵化率(69.5%)要显著高于注射异源性dmrt1载体的受精卵(36.5%)。30 dph(days post hatching)两组被注射稚鱼均能检测到基因整合,注射同源dmrt1的整合率(30%)要高于异源dmrt1(10%)。30 dph稚鱼体内检测不到异源性dmrt1载体的表达,但能检测到同源dmrt1载体的mRNA表达,同时芳香化酶基因的表达受到了抑制。本研究为研究舌鳎性别分化相关基因功能提供了基础,并为在模式鱼类中研究海水鱼相关基因功能累积了必要的资料。
- 李亚亚陈松林林帆王娜刘洋黄进强
- 关键词:半滑舌鳎青鳉DMRT1转基因鱼显微注射
- 半滑舌鳎vasa调控区的克隆、表达载体构建及其驱动活性检测被引量:2
- 2015年
- 为研究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)vasa(Csvasa)基因调控区的功能,在已克隆的Csvasa基因编码序列的基础上,采用基因组步移和PCR扩增的方法克隆得到Csvasa调控区,通过生物信息学方法分析vasa基因5′区,并构建了含Csvasa基因调控区的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体(p Csvasa-GFP-T),进一步通过显微注射技术初步验证调控区的驱动活性。结果表明,通过基因组步移和PCR扩增获得Csvasa 5′区5 166 bp和3′区1 655 bp,利用在线生物信息学软件对5′区序列进行分析,发现在转录起始点上游26 bp处存在保守的TATA框,以及潜在的转录因子结合点如SRY、Oct-1、Sox-5、CREB、GATA、AP-1、C/EBP、Sp-1、c-Myc、HNF、NKX2-5、V-Myb等。通过显微注射技术,将所构建的p Csvasa-GFP-T表达载体注射于青鳉(Oryzias latipes)受精卵并进行培养观测,发现Csvasa调控区能够驱动GFP在青鳉胚胎内表达,荧光表达率为81%。将有荧光的胚胎培养为成鱼,检测外源基因的整合率为11.5%。这些结果为进一步研究半滑舌鳎原始生殖细胞(PGCs)的标记、追踪和操作研究以及半滑舌鳎的性别控制等奠定了基础。
- 黄进强陈松林邵长伟刘洋林帆李亚亚王娜
- 关键词:半滑舌鳎显微注射
- 青鱂在半滑舌鳎性别相关基因dmrt1和csw1研究中的应用
- 本研究以青鱂为模式生物研究半滑舌鳎性别分化相关基因的表达情况,为海水鱼基因功能研究提供了新的思路。本研究从三个方面进行阐述:一是异源和同源 dmrt1基因过表达载体构建;二是异源和同源 dmrt1基因过表达载体在青鳉体内...
- 李亚亚
- 关键词:半滑舌鳎DMRT1基因性别分化
- 文献传递
- 青鳉(Oryzias latipes)性腺分化与发育的组织学观察被引量:4
- 2013年
- 青锵(Oryzias latipes)繁殖力强、繁殖周期短,为硬骨鱼类研究领域的模式生物。口前,尚无青鲻性腺分化与发育过程的系统资料。该文以青鲻孵化后不同时期的生殖腺为材料,经石蜡切片和HE染色后,于光学显微镜下观察其性腺的出现、分化及成熟过程。结果显示:孵化后5~10d,仔鱼腹腔右侧已可见生殖腺,生殖细胞体积明显大于周围的体细胞;孵化后10d,性腺开始分化,雌、雄性个体性腺出现结构上的差异,雌性个体内可明湿观察到生殖包囊结构;随后,雌、雄性个体内先后可见卵子和精子的发生过程和组织学分期;孵化后50d,首见卵巢腔结构和成熟精子。此外,还观察到性反转现象的特例,即两性特征共存的现象。该结果将为发育生物学、遗传生物学提供基础资料。
- 张静黄进强李亚亚王娜孙建王天姿陈松林