李圃 作品数:15 被引量:12 H指数:2 供职机构: 天津市中心妇产科医院 更多>> 发文基金: 天津市自然科学基金 天津市科技计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
融合基因CDglyES重组腺病毒对卵巢癌细胞抑制作用的体外研究 被引量:2 2014年 目的:构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,体外观察其对人卵巢癌细胞的直接抑制作用及其对血管内皮细胞生长的抑制作用。方法:用细菌内同源重组方法构建腺病毒穿梭质粒prAdCDglyES。采用脂质体介导转染293包装细胞,扩增获取重组腺病毒rAdCDglyES。采用MTT法观察rAdCDglyES对卵巢癌细胞SKOV-3生长抑制的影响,同时观察其表达产物抑制脐静脉血管内皮细胞ECV-304增殖的作用。结果:纯化的rAdCDglyES滴度是1×1013.3TCID50/L,其对SKOV-3细胞生长抑制率是(83.1±6.3)%,与对照组rAd-LacZ(24.1±13.2)%相比有显著性差异(P<0.01)。浓缩的转染rAdCDglyES的细胞培养上清液抑制ECV-304细胞增殖,抑制率是(78.7±1.6)%,而同样浓缩的转染rAd-CD的细胞培养上清液抑制率是(23.9±9.7)%,二者有显著性差异(P<0.01)。结论:研究结果表明重组腺病毒rAdCDglyES具有体外直接和间接抑制人卵巢癌细胞效能。 李圃 李冬田 尹冰楠 汤华 尹利荣关键词:人卵巢癌细胞 胞嘧啶脱氨酶基因 内皮抑素 重组腺病毒 SUMO特异性蛋白酶1诱导蛋白质去小泛素相关修饰增加子宫内膜癌侧群细胞化疗敏感性 被引量:1 2022年 目的探讨通过诱导蛋白质广泛去类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的干性维持潜能,达到子宫内膜癌侧群细胞化疗增敏的目的。方法流式细胞术分选培养CD133^(+)CD44^(+)的KLE子宫内膜癌侧群细胞克隆球,Western blot法检测小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)及肿瘤侧群细胞干性维持基因八聚体结合转录因子4(Oct4)和性别决定区Y-box2(Sox2)蛋白的表达情况。慢病毒介导KLE侧群细胞稳定转染SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)基因,Western blot法检测SENP1、SUMO1、Oct4和Sox2的蛋白表达;比较过表达与未过表达SENP1基因的KLE侧群细胞克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期变化,四甲基偶氮唑蓝实验和流式细胞术检测子宫内膜癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性,子宫内膜癌荷瘤鼠模型检测SENP1过表达对顺铂的化疗敏感性影响。结果CD133^(+)CD44^(+)和CD133-CD44-子宫内膜癌KLE细胞克隆形成率分别为(23.64±5.03)%和(4.64±1.25)%,差异有统计学意义(P=0.003),CD133^(+)CD44^(+)子宫内膜癌KLE细胞中SUMO1、Oct4和Sox2蛋白表达水平高于CD133-CD44-子宫内膜癌KLE细胞(均P<0.05)。与未转染SENP1基因的KLE侧群细胞比较,SENP1过表达的KLE侧群细胞SUMO1、Oct4、Sox2蛋白表达水平降低,细胞克隆形成率由(25.67±5.44)%下降至(7.46±1.42)%,细胞周期发生由G0/G_(1)期向G_(2)期的偏移,顺铂半数抑制浓度由(55.46±6.14)μg/ml下降至(11.55±3.12)μg/ml,细胞凋亡率由(9.76±2.09)%上升至(16.79±3.44)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达SENP1能够降低KLE侧群细胞增殖能力,增加化疗敏感性。结论通过过表达SENP1能够诱导蛋白质去SUMO化修饰,抑制子宫内膜癌侧群细胞的干性维持潜能,进而增强其化疗敏感性。 袁梦岚 白洁 李承尧 薛娜 陈旭红 盛凤 刘晓智 李圃关键词:子宫内膜肿瘤 子宫内膜异位症患者血清抗心磷脂抗体与细胞因子的研究 高桂琴 郑天强 郭成秀 林婉君 任晨春 张哲 李圃 曲芃芃 本研究旨在探讨抗心磷脂抗体(ACL)、细胞因子IL-6、IL-8、IL-10这四项免疫相关因子在子宫内膜异位症发病机制中的作用以及临床应用价值。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法,动态监测子宫内膜异位症患者术前与术后...关键词:关键词:子宫内膜异位症 抗心磷脂抗体 白细胞介素 妇科常见恶性肿瘤保留生育功能的研究进展 被引量:2 2022年 妇科常见的恶性肿瘤包括宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢癌,虽在治疗上已取得很多进展,但常规的治疗手段多涉及子宫切除。对于仍有妊娠需求的女性,需要在保证安全的前提下,最大程度地满足患者的生育需求。现阶段对于保留生育功能的治疗方式已有很多研究,出现了较多新的方法和手段,在疾病评估上也愈加完善。宫颈癌早期可选择宫颈锥切术、单纯宫颈切除术和根治性宫颈切除术;子宫内膜癌保留生育功能治疗非标准治疗,在严格筛选下可有激素治疗或联合先行宫腔镜下病灶切除术;卵巢癌中的早期低风险患者可选择保留生育功能的患侧附件切除或肿瘤剔除术。综述常见妇科恶性肿瘤保留生育功能治疗的适应证、治疗方式、治疗效果和存在问题等,以期为临床治疗提供思路和帮助。 李承尧 李圃关键词:保留生育能力 宫颈肿瘤 子宫内膜肿瘤 卵巢肿瘤 重组腺病毒Adv-AFPsiRNA的构建及其对卵巢癌生长抑制的实验研究 [目的]: 鉴于近年来,许多学者和临床医生经过反复研究及临床详尽的观察和检测发现甲胎蛋白在肿瘤发生、发展过程中不仅是一种伴随现象,而是一种与肿瘤细胞生长密切相关的内源性蛋白。并且,在多种疾病(如:原发性肝细胞癌、急... 李圃关键词:甲胎蛋白 卵巢癌 文献传递 壮观霉素B1抑制SUMO化修饰遏制子宫内膜癌侵袭和转移 2022年 目的观察壮观霉素B1能否通过抑制蛋白质类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的侵袭和转移,为子宫内膜癌的靶向治疗提供依据。方法以子宫内膜癌KLE细胞株为研究对象,分对照组及壮观霉素B1组;细胞增殖检测试剂盒检测5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)的阳性表达率;细胞划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blotting方法检测泛素连接酶-9(Ubc9)、小泛素样修饰蛋白-1(SUMO1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和MMP-13的蛋白表达情况。结果对照组及壮观霉素B1组KLE细胞中EdU的阳性表达率分别为(94.46±4.27)%和(51.33±5.08)%(t=12.654,P<0.01);细胞迁移距离分别为(44.15±4.07)μm和(22.74±3.95)μm(t=14.359,P<0.01);高倍视野下自Transwell上室向下室迁移的细胞数分别为(67.05±6.54)个和(36.44±4.05)个(t=11.997,P<0.01);壮观霉素B1组KLE细胞中Ubc9、SUMO1、MMP-9和MMP-13的蛋白表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论壮观霉素B1能够明显抑制蛋白质SUMO化修饰反应,进而影响子宫内膜癌迁移和侵袭相关责任蛋白的表达,有望成为一种靶向治疗子宫内膜癌的新方法。 袁梦岚 李承尧 白洁 陈旭红 刘晓智 李圃关键词:子宫内膜癌 miR-27a在妇科肿瘤中的研究进展 2020年 微小RNA(miRNA)是一类内源性的非编码小RNA,通常可通过特异性降解mRNA或抑制蛋白质的翻译,在转录后水平调控靶基因的表达,参与机体的多个生理或病理过程。miRNA可通过调节癌基因和抑癌基因的表达来参与肿瘤的发生发展,在不同类型的肿瘤中及肿瘤的不同发展阶段,miRNA分子的表达谱呈现不同的特征。其中,miR-27a定位于人类19号染色体,在子宫内膜癌、宫颈癌、卵巢癌等多种妇科肿瘤中异常表达。本文对miR-27a在子宫内膜癌、宫颈癌和卵巢癌中的作用及其临床应用进展进行综述,为开发新型的肿瘤分子标志物或靶向药物提供理论依据。 李圃 杜晓琴关键词:妇科肿瘤 子宫附腔的研究进展 被引量:1 2024年 子宫附腔(ACUM)是一种先天性苗勒管异常疾病,临床罕见。严重痛经和盆腔痛为主要临床症状,有独特的影像学表现,但鉴别诊断困难,需组织病理学确诊。治疗方式主要是手术切除,结局良好。ACUM为良性疾病,但缺乏规范化诊治策略。现对ACUM的研究进展进行综述,以提高临床医生对此病的认识,减少漏诊及误诊,提高诊疗水平。 曹玉盈 杨瑾 周芳竹 李圃人卵巢癌基因治疗的体外实验研究 目的构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,并观察其在体外对人卵巢癌细胞的直接抑瘤作用和对血管内皮细胞的抑制作用。方法用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段,构建成腺病毒穿梭质粒pAdCDglyES。用细菌内同源... 李圃 李冬田 尹冰楠 汤华关键词:内皮抑素 重组腺病毒 基因治疗 文献传递 子宫内膜异位症关键通路的鉴定和诊断模型的建立 2023年 目的:子宫内膜异位症是一种发病率较高、诊断困难且目前病理机制不清的妇科疾病。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)鉴定与子宫内膜异位症相关的关键通路和基因,并建立子宫内膜异位症的临床诊断模型。方法:利用基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取子宫内膜异位症患者的基因芯片数据和临床信息。从子宫内膜异位症患者和非子宫内膜异位症患者的转录组数据中获取差异表达基因,并进行GSEA和GSVA。两者结果的交集就是子宫内膜异位症的关键表达途径,随后又构建这些关键通路基因的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并利用Cytoscape对关键基因进行鉴定,应用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)和逻辑回归建立子宫内膜异位症的临床诊断模型,最后利用另一组GEO数据集验证和评估该模型。结果:共鉴定出394个上调基因和37个下调基因和2个关键通路(FOSTER_TOLERANT_MACROPHAGE_DN和TGGTGCT_MIR29A_MIR29B_MIR29C)。2条通路中分别鉴定出96个和142个关键基因。进一步筛选后,建立了包含4个基因和2个基因的2个预测模型,并根据其风险评分构建风险预测模型(列线图)。3个模型在训练集[曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.860、0.805、0.883]和验证集(AUC=0.606、0.636、0.633)中均表现良好。结论:本研究运用GSEA和GSVA交集法初步筛选出子宫内膜异位症的关键通路,建立了诊断模型,这些模型具有良好的诊断效能。 杨瑾 杨瑾关键词:子宫内膜异位症 列线图